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EndotoxDetect™（旧称：HEK-Blue™ LPS Detection Kit 2）は、ワクチンアジュバントやLALテスト (カブトガニ血球成分を用いた試験) の阻害剤を含む、ほぼすべての生物学的試料中のエンドトキシンを、目視および比色法で検出できる初の細胞ベースアッセイです。
エンドトキシンは、リポ多糖 (LPS) やリポグリカンとしても知られ、グラム陰性菌の細胞壁の主要な構成成分です。エンドトキシンは in vitro (試験管内) および in vivo (生体内) の両方において、炎症反応の強力な誘導因子となります。これらは細胞の形態、増殖、サイトカイン産生を変化させるだけでなく、発熱、多臓器不全、致死的な敗血症性ショックを引き起こす可能性があり、エンドトキシンのコンタミネーションは、極めて重大な懸念事項です。そのため、トリプシン、水、バッファーなどの細胞培養用試薬におけるエンドトキシンの有無をモニタリングすることは非常に重要です。
こうした背景から、InvivoGen社は、生物学的に活性なLPSを検出するための、細胞ベースで信頼性が高く、持続可能なツールである EndotoxDetect™ を提供しています。
LPSに対して極めて高い感受性を持つように設計されたHEK-Blue™-4細胞は、Toll様受容体(TLR) 4を介して、微量のエンドトキシン (0.03 ng/ml以上、または0.01 EU/ml以上 )を認識します。これによりNF-κBが活性化され、続いてレポータータンパク質であるSEAP (分泌型胚性アルカリホスファターゼ) が培養上清中に放出されます。
紫／青色を呈するSEAP検出試薬QUANTI-Blue™を使用することで、NF-κBの活性化を肉眼、あるいは620〜655 nmの波長で測定することが可能です。また、オプションとして、HEK-Blue™ Endotoxin Standard (FDA認可の対照標準エンドトキシン (CSE) に対して標準化された大腸菌O55:B5由来LPS) の連続希釈液を用いて作成した標準曲線から、エンドトキシン濃度を算出することも可能です。
記事ID ： 45360
生物学的に活性なエンドトキシンを検出する細胞ベース比色アッセイ EndotoxDetect™
特長
- シンプル：細胞培養の基本的な知識で実施可能
- 高汎用性：ほぼすべての生物学的試薬に含まれるエンドトキシンレベルを測定可能
- 高感度：わずか0.01EU/mlという極微量のエンドトキシンを検出可能
- 経済的：1キットで最大500テストの実施が可能
構成内容
- HEK-Blue™-4 cells (3-7x 106 cells)
- HEK-Blue™ Selection
- Normocin™
- QB reagentおよびQB buffer
- HEK-Blue™ Endotoxin Standard
- HEK-Blue™ water
仕様
| シンプル | 基本的な細胞培養の知識があれば、特別な実験装置不要 |
|---|---|
| 多用途 | ほぼすべての生物学的試薬のエンドトキシンレベルを測定 |
| 高感度 | わずか0.01 EU/mlを検出 |
| 経済的 | 1キット最大 500 個のサンプルをテスト可能 |
概要
EndotoxDetect™
| 品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
|---|---|---|---|---|
EndotoxDetectTM |
ING | REP-LPS2 | 1 KIT |
￥318,000 |
参考文献
- Zhang G. and S. Ghosh, 2000. Molecular mechanisms of NF-kappaB activation induced by bacterial lipopolysaccharide through Toll-like receptors. J Endotoxin Res. 6(6): p. 453-7.
- Beutler B., 2003. Science review: key inflammatory and stress pathways in critical illness - the central role of the Toll-like receptors. Crit Care. 7(1): p. 39-46.
- Dobrovolskaia M.A. and S.N. Vogel, 2002. Toll receptors, CD14, and macrophage activation and deactivation by LPS. Microbes Infect. 4(9): p. 903-14.
- Wolk K. et al., 2000.Impaired antigen presentation by human monocytes during endotoxin tolerance. Blood. 96(1): p. 218-23.
- Kariko K. et al., 2004. Small interfering RNAs mediate sequence-independent gene suppression and induce immune activation by signaling through toll-like receptor 3. J Immunol. 172(11):6545-9.
- Darveau RP et al., 2004. Porphyromonas gingivalis lipopolysaccharide contains multiple lipid A species that functionally interact with both toll-like receptors 2 and 4. Infect Immun. 72(9):5041-51.
製品使用文献
- 2023 J Invest Dermatol. DOI: 10.1016/j.jid.2023.08.004 Reduced Bioactive Microbial Products (PAMPs) Contribute to Dysregulated Immune Responses And Impaired Healing in Infected Wounds in Diabetic Mice. Roy R. et al.
- 2023 PLoS Pathog. DOI: 10.1371/journal.ppat.1011556 Acyloxyacyl hydrolase promotes pulmonary defense by preventing alveolar macrophage tolerance. Cheng X. et al.
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