記事ID ： 45360

生物学的に活性なエンドトキシンを検出する細胞ベース比色アッセイ HEK-Blue™ LPS 検出キット 2

メーカー名：InvivoGen

HEK-Blue™ LPS検出キットは、グラム陰性菌とは構造的に異なるLPSと特にその毒性部分であるリピドAを認識するTLR4の能力に基づいています。

HEK-Blue™-4細胞と呼ばれる、LPSに対して極めて感受性が高くなるように設計された独自の細胞が、このエンドトキシン検出キットの主な特長です。0.03 ng/mL～の非常に低濃度の LPSの存在は、HEK-Blue™-4細胞によって検出され、NF-κBの活性化にいたります。特異的検出培地であるHEK-Blue™ Detectionを用いると、NF-κBの活性化を肉眼で観察したり、650 nmのODを読み取ることで定量できます。

HEK-Blue™ LPS検出キット2は、生物学的に活性なLPSの検出と定量を目的としたアッセイで、研究用です。

これは、哺乳類のエンドトキシンセンサーであるトールライクレセプター(TLR)4の活性化に基づいています (Beutler B.、2002)。TLR4はグラム陰性菌とは構造的に異なるLPSを認識します。

HEK-Blue™-4細胞と呼ばれる、LPSに対して極めて感受性が高くなるように設計された独自の細胞が、このエンドトキシン検出キットの主な特長です。これらの細胞は、ヒトTLR4およびNF-κB誘導性分泌型胚性アルカリホスファターゼ(SEAP)レポーター遺伝子を安定して発現します。

0.01 EU/mL～の微量のLPSの存在はHEK-Blue™-4細胞によって検出され、NF-κBの活性化にいたります。紫/青色を生成するSEAP検出培地であるQUANTI-Blue™を用いると、NF-κB活性化を肉眼で観察したり、620～655 nmで測定できます。吸光度は存在するエンドトキシン量に比例するため、エンドトキシン濃度は、HEK-Blue™ エンドトキシンスタンダード (FDA認可の対照標準エンドトキシン（CSE）に対して標準化した大腸菌055:B5 LPSの調製物) の連続希釈を用いて得られた標準曲線から計算できます。

構成内容

HEK-Blue™-4 cells (3-7x 106 cells)
HEK-Blue™ Selection
Normocin™
QB reagentおよびQB buffer
HEK-Blue™ Endotoxin Standard
HEK-Blue™ water

仕様

シンプル	基本的な細胞培養の知識があれば、特別な実験装置不要
多用途	ほぼすべての生物学的試薬のエンドトキシンレベルを測定
高感度	わずか0.01 EU/mlを検出
経済的	1キット最大 500 個のサンプルをテスト可能

概要

HEK-Blue™ LPS 検出キット 2

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
HEK-Blue^TM LPS Detection Kit 2	ING	REP-LPS2	1 KIT	￥303,000

エンドトキシンの検出ページへ戻る

参考文献

Zhang G. and S. Ghosh, 2000. Molecular mechanisms of NF-kappaB activation induced by bacterial lipopolysaccharide through Toll-like receptors. J Endotoxin Res. 6(6): p. 453-7.
Beutler B., 2003. Science review: key inflammatory and stress pathways in critical illness - the central role of the Toll-like receptors. Crit Care. 7(1): p. 39-46.
Dobrovolskaia M.A. and S.N. Vogel, 2002. Toll receptors, CD14, and macrophage activation and deactivation by LPS. Microbes Infect. 4(9): p. 903-14.
Wolk K. et al., 2000.Impaired antigen presentation by human monocytes during endotoxin tolerance. Blood. 96(1): p. 218-23.
Kariko K. et al., 2004. Small interfering RNAs mediate sequence-independent gene suppression and induce immune activation by signaling through toll-like receptor 3. J Immunol. 172(11):6545-9.
Darveau RP et al., 2004. Porphyromonas gingivalis lipopolysaccharide contains multiple lipid A species that functionally interact with both toll-like receptors 2 and 4. Infect Immun. 72(9):5041-51.

製品使用文献

2023 J Invest Dermatol. DOI: 10.1016/j.jid.2023.08.004 Reduced Bioactive Microbial Products (PAMPs) Contribute to Dysregulated Immune Responses And Impaired Healing in Infected Wounds in Diabetic Mice. Roy R. et al.
2023 PLoS Pathog. DOI: 10.1371/journal.ppat.1011556 Acyloxyacyl hydrolase promotes pulmonary defense by preventing alveolar macrophage tolerance. Cheng X. et al.