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エリスロポエチン産生肝細胞性A2（EphA2）は、Ephチロシンキナーゼ受容体ファミリーの一員であり、様々な生物学的プロセスとの関連が指摘されています。腫瘍において、EphA2の過剰発現は、非標準的な経路の活性化、腫瘍の進行、そして予後不良と関連しており、悪性腫瘍のマーカーとしての重要性が示唆されています。１）
特長
- ヒトEphA2タンパク質の細胞外ドメインに対する2種類のモノクローナル抗体によるELISAです。
- 抗EphA2抗体を固相化したプレートとHRP標識した抗EphA2抗体を用いたサンドイッチ法により高感度にEphA2を検出します。
- 特殊な装置は不要で、通常のプレートリーダーがあれば測定できます(波長450nm)。
原理
このELISAキットは２ステップサンドイッチ法を原理としています。 このキットのELISAプレートは抗EphA2抗体が予め固相されています。
最初に、サンプルをプレートのウェルに加えて撹拌反応させます。洗浄後、HRP標識抗EphA2抗体をプレートのウェルに加えて撹拌反応させます。
次に、洗浄後、プレートにトラップされたサンプル中のEphA2とHRP標識抗EphA2抗体の結合物に基質を添加します。
最後に、HRPによる発色をプレートリーダーで読み取り、サンプル中のEphA2を定量します。
測定例
標準曲線
一例として、標準EphA2 (pg/mL)に対する吸光度(OD450)をグラフに描くと図1のようになります。ただし、標準曲線は、アッセイ毎に新たに描いてください。サンプル溶液の吸光度を標準曲線に対応させてEphA2(pg/mL)を算出し、更に希釈倍数を乗じて尿中などのEphA2(pg/mL)を求めてください。
図１ 標準EphA2による標準曲線
| 標準タンパク質 (pg/mL) | 吸光度 (450 nm) |
平均吸光度 | |
|---|---|---|---|
| 1 | 2 | ||
| 0 | 0.050 | 0.061 | 0.056 |
| 46.875 | 0.095 | 0.099 | 0.097 |
| 93.75 | 0.146 | 0.149 | 0.148 |
| 187.5 | 0.243 | 0.251 | 0.247 |
| 375 | 0.465 | 0.445 | 0.455 |
| 750 | 0.853 | 0.842 | 0.848 |
| 1500 | 1.605 | 1.664 | 1.634 |
| 3000 | 2.839 | 2.737 | 2.788 |
ヒトEphA2 ELISAキット
| 品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
|---|---|---|---|---|
| ヒトEphA2 ELISAキット / EphA2 ELISA Kit, Human   |
HAK | HAK-HELEPHA2-1 | 1 KIT [96test] |
￥100,000 |
参考文献
- L. Toracchio, et al.: Int J Mol Sci., 25, 12191 (2024).
商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。
※ 表示価格について
- 「ヒトEphA2 ELISAキット」は、下記のカテゴリーに属しています。
