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記事ID : 45353
研究用

超高純度Hygromycin B エンドトキシン試験済み Hygromycin B Gold

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HygromycinBGoldの図

Hygromycin Bは、Streptomyces hygroscopeusによって産生されるアミノグリコシド系抗生物質です。

タンパク質合成を阻害することで、細菌、真菌、高等真核細胞を死滅させます。転写を阻害し1、70Sリボソームで誤翻訳を引き起こすことが報告されています2

Hygromycin Bに対する耐性
Hygromycin Bは、さまざまな真核生物および原核生物種に対する分子遺伝学実験の選択用試薬として使用されます3-5

hph遺伝子は、それを発現する細胞およびhph遺伝子を持つ多くのベクターにHygromycin耐性を与えます。

通常、哺乳動物細胞は50〜200µg/ml、細菌は50〜100µg/mlのHygromycin B濃度に感受性があります。

仕様

濃度 100 mg/mL
CAS RN 番号 31282-04-9
品質管理 各ロット、ロット間差がないことを確認するために徹底的に試験
純度 ≥ 90% (HPLC)
エンドトキシンレベル < 0.5 EU/mg
物理化学的特性 pH、外観
細胞培養試験 hygromycin感受性およびhygromycin耐性の哺乳類細胞株で有効性を評価
微量汚染物質の非細胞毒性 hygromycin耐性細胞で長期的に影響がないことを確認
組成式 C20H37N3O13,HCl
分子量 563.5
構造式 HygromycinBGoldの構造式

ワーキング濃度

Hygromycin B Goldは通常ストック溶液の500倍希釈である200µg/mlの濃度で使用されます。ただし、細胞に最適な濃度を決定する必要があります。

一部の哺乳動物細胞での選択に推奨される作業条件を以下に示します。

細胞 培地 濃度 文献情報
B16 (Mouse melanocytes) RPMI 100-200 µ/ml 1,2
CHO (Chinese hamster ovarian cells) MEM 100-500 µ/ml 3,4,5
HeLa (Human uterine cells) DMEM 100-200 µ/ml 6,7
HEK293 (Human embryonic kidney cells) DMEM 50-400 µ/ml 8,9,10
Raji (Human lymphocytes) RPMI 125-300 µ/ml 11,12
THP-1 (Human monocytes) RPMI 250-400 µ/ml 13,14

Hygromycin B Gold溶液

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Hygromycin B Gold (solution) new詳細データ ING ANT-HG-1 1 G
[10 x 1 ml]
¥25,000
Hygromycin B Gold (solution) new詳細データ ING ANT-HG-2 2 G
[20 x 1 ml]
¥42,000
Hygromycin B Gold (solution) new詳細データ ING ANT-HG-5 5 G
[1 x 50 ml]
¥78,000

参考文献

  1. Cabanas M. et al., 1978. Dual interference of Hygromycin B with ribosomal translocation and with Aminoacyl-tRNA recognition. Eur. J. Biochem. 87:21-7.
  2. Gonzales, A. et al., 1978. Studies on the mode of action of hygromycin B, an inhibitor of translocation in eukaryotes. Biochem Biophys Acta 521:459-69.
  3. Gritz L. & Davies J., 1983. Plasmid-encoded hygromycin B resistance: the sequence of hygromycin B phosphotransferase gene and its expression in Escherichia coli and Saccharomyces cerevisiae. Gene 25:179-88.
  4. Cullen D. et al., 1987. Transformation of Aspergillus nidulans with the hygromycin-resistance gene, hph. Gene 57:21-6.
  5. Santerre R. et al., 1984. Expression of prokaryotic genes for hygromycin B and G418 resistance as dominant-selection markers in mouse L cells. Gene 30:147-56.

文献情報

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  2. Saccheri F. et al., 2010. Bacteria-induced gap junctions in tumors favor antigen cross-presentation and antitumor immunity. Sci Transl Med. 2(44):44ra57.
  3. Hidmark A. et al., 2012. Cutting edge: TLR13 is a receptor for bacterial RNA. J Immunol. 189(6):2717-21.
  4. Hennen S. et al., 2013. Decoding signaling and function of the orphan G protein-coupled receptor GPR17 with a small-molecule agonist. Sci Signal. 6(298):ra93.
  5. Raschi E. et al., 2014. β-2-glycoprotein I, lipopolysaccharide and endothelial TLR4: Three players in the two hit theory for anti-phospholipid-mediated thrombosis. J Autoimmun. S0896-8411(14)00065-1.
  6. Ravid D. et al., 2010. A role for caveolin 1 in assembly and budding of the paramyxovirus parainfluenza virus 5. J Virol. 4(19):9749-59.
  7. Hayashi Y. et al., 2014. Mechanism by which a LINE protein recognizes its 3’ tail RNA. Nucleic Acids Res. 42(16):10605-17.
  8. Bowen WS. et al., 2012. Selective TRIF-dependent signaling by a synthetic Toll-like receptor 4 agonist. Sci Signal. 5(211):ra13.
  9. Leskela TT. et al., 2012. Cys-27 variant of human {delta}-opioidreceptor modulates maturation and cell surface delivery of Phe-27 variant via heteromerization. J. Biol. Chem., 287: 5008-20.
  10. van den Bosch MW. et al., 2014. LPS induces the degradation of programmed cell death protein 4 (PDCD4) to release Twist2, activating c-Maf transcription to promote interleukin-10 production. J Biol Chem. 289(33):22980-90.
  11. Benjamin LR. et al., 2008. Hierarchical mechanisms build the DNA-binding specificity of FUSE binding protein. PNAS. 105(47):18296-301.
  12. Bouwman LI. et al., 2014. Inflammasome Activation by Campylobacter jejuni. J Immunol. 193(9):4548-57.
  13. 13. Bryan NB. et al., 2009. Activation of inflammasomes requires intracellular redistribution of the apoptotic speck-like protein containing a caspase recruitment domain. J Immunol. 182(5):3173-82.

商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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