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細胞本来の機能性を維持不死化細胞作製受託サービス
細胞本来の機能性を維持

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メーカー名：InSCREENeX GmbH

遺伝子導入による不死化細胞構築においては、SV40やHPV16 E6/E7などのウイルス癌遺伝子がよく用いられてきました。しかしながら、それらのウイルス癌遺伝子が高発現することで細胞自体の形質が変化し、本来の機能性が失われてしまうことが多くあります。

InSCREENeX社では、33種類の遺伝子で構成される独自の遺伝子ライブラリー（CI-SCREENライブラリー）を用いた不死化細胞作製受託サービスをご提供しており、より高い確率で細胞本来の機能性を維持した不死化細胞の取得が可能です。

特長

機能性を維持した不死化細胞株の取得
様々な細胞種での構築が可能
使用目的に応じた柔軟な評価項目設定

原理とサービスの流れ

InSCREENeX社の不死化細胞構築では、増殖能だけでなく細胞の特長・機能性の評価も可能です。もしくは、増殖能を獲得した複数のクローンをご提供して、お客様側でクローンの選抜を行っていただくことも可能です。

図1. CI-SCREENライブラリーを用いた不死化細胞構築
Step 1. レンチウイルスを用いてCI-SCREENライブラリーをご希望の初代培養細胞に導入します。
Step 2. 異なる遺伝子セットが導入された細胞から、安定した増殖能を獲得したクローンを選択します。
Step 3. 目的とする機能性が維持されたクローンを選択します。

参考文献
Lipps, Christoph, et al. "Expansion of functional personalized cells with specific transgene combinations." Nature communications 9.1 (2018): 994.

お客様より細胞/サンプルをご提供いただく場合、インフォームド・コンセントが取得されており、かつドナーの個人情報が特定できないように匿名化されたものである必要がございます。

機能評価例

図2. 不死化ヒトアストロサイトの機能評価
(左)CI-SCREENライブラリーを用いて作製した不死化ヒトアストロサイト
(右)GABA_BアゴニストであるBaclofen、およびP2プリン受容体アゴニストであるATP刺激による細胞内カルシウム流入を、蛍光指示薬(Fluo-4)を用いて測定した。どちらの刺激に対しても、細胞内カルシウム濃度上昇が確認された。

図3. 不死化マウス腸管上皮細胞の機能評価
(左)CI-SCREENライブラリーを用いて作製した不死化マウス腸管上皮細胞では、3週間以上に渡って高いTEER値が維持されることを確認した。
(右）腸管病原性大腸菌(EPEC)の感染により、形成されたタイトジャンクションが破壊されることを確認した。

構築済み不死化細胞株

以下の構築済み不死化細胞株も販売しております。

動物種	品番	品名	細胞種
Human	INS-CI-1011	CI-huAEC	Airway Epithelial cells
	INS-CI-1015	CI-hAELVi	Alveolar Epithelial cells
	INS-CI-1006	CI-huChon	Chondrocytes
	INS-CI-1010	CI-huFIB	Fibroblasts
	INS-CI-1008	CI-huMEC	Microvascular Endothelial cells
	INS-CI-1005	CI-huOB	Osteoblasts
	INS-CI-1002	CI-huVEC	Umbilical Vein Endothelial cells
	INS-CI-1017	CI-huThyrEC	Thyroid Epithelial Cells
	INS-CI-1023	CI-huAstro	Astrocytes
	INS-CI-1024	CI-huPeri	Pericytes
	INS-CI-1025	CI-huBroBEC	Bronchial Basal Epithelial Cell
	INS-CI-1030	CI-huEGC	Enteric Glial Cells
Mouse	INS-CI-1007	CI-muINTEPI	Intestinal Epithelial cells
	INS-CI-1018	CI-muADINTESTI	Adult Intestinal Epithelial cells
	INS-CI-1012	CI-muHepa	Hepatocytes
	INS- CI-1004	CI-muMEC	Microvascular Endothelial cells