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研究用

細胞本来の機能性を維持 不死化細胞作製受託サービス
細胞本来の機能性を維持

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遺伝子導入による不死化細胞構築においては、SV40やHPV16 E6/E7などのウイルス癌遺伝子がよく用いられてきました。しかしながら、それらのウイルス癌遺伝子が高発現することで細胞自体の形質が変化し、本来の機能性が失われてしまうことが多くあります。

InSCREENeX社では、33種類の遺伝子で構成される独自の遺伝子ライブラリー(CI-SCREENライブラリー)を用いた不死化細胞作製受託サービスをご提供しており、より高い確率で細胞本来の機能性を維持した不死化細胞の取得が可能です。

特長

  • 機能性を維持した不死化細胞株の取得
  • 様々な細胞種での構築が可能
  • 使用目的に応じた柔軟な評価項目設定

原理とサービスの流れ

InSCREENeX社の不死化細胞構築では、増殖能だけでなく細胞の特長・機能性の評価も可能です。もしくは、増殖能を獲得した複数のクローンをご提供して、お客様側でクローンの選抜を行っていただくことも可能です。
図1. CI-SCREENライブラリーを用いた不死化細胞構築
図1. CI-SCREENライブラリーを用いた不死化細胞構築
Step 1. レンチウイルスを用いてCI-SCREENライブラリーをご希望の初代培養細胞に導入します。
Step 2. 異なる遺伝子セットが導入された細胞から、安定した増殖能を獲得したクローンを選択します。
Step 3. 目的とする機能性が維持されたクローンを選択します。

参考文献
Lipps, Christoph, et al. "Expansion of functional personalized cells with specific transgene combinations." Nature communications 9.1 (2018): 994.

機能評価例

不死化ヒトアストロサイトの機能評価
図2. 不死化ヒトアストロサイトの機能評価
(左)CI-SCREENライブラリーを用いて作製した不死化ヒトアストロサイト
(右)GABABアゴニストであるBaclofen、およびP2プリン受容体アゴニストであるATP刺激による細胞内カルシウム流入を、蛍光指示薬(Fluo-4)を用いて測定した。どちらの刺激に対しても、細胞内カルシウム濃度上昇が確認された。

不死化マウス腸管上皮細胞の機能評価
図3. 不死化マウス腸管上皮細胞の機能評価
(左)CI-SCREENライブラリーを用いて作製した不死化マウス腸管上皮細胞では、3週間以上に渡って高いTEER値が維持されることを確認した。
(右)腸管病原性大腸菌(EPEC)の感染により、形成されたタイトジャンクションが破壊されることを確認した

構築済み不死化細胞株

以下の構築済み不死化細胞株も販売しております。

動物種 品番 品名 細胞種
Human INS-CI-1011 CI-huAEC Airway Epithelial cells
INS-CI-1015 CI-hAELVi Alveolar Epithelial cells
INS-CI-1006 CI-huChon Chondrocytes
INS-CI-1010 CI-huFIB Fibroblasts
INS-CI-1008 CI-huMEC Microvascular Endothelial cells
INS-CI-1005 CI-huOB Osteoblasts
INS-CI-1002 CI-huVEC Umbilical Vein Endothelial cells
INS-CI-1017 CI-huThyrEC Thyroid Epithelial Cells
INS-CI-1023 CI-huAstro Astrocytes
INS-CI-1024 CI-huPeri Pericytes
INS-CI-1030 CI-huEGC Enteric Glial Cells
Mouse INS-CI-1007 CI-muINTEPI Intestinal Epithelial cells
INS-CI-1018 CI-muADINTESTI Adult Intestinal Epithelial cells
INS-CI-1012 CI-muHepa Hepatocytes
INS- CI-1004 CI-muMEC Microvascular Endothelial cells

使用文献リストExcel

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