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記事ID : 35317
研究用

色素関連細胞障害の分子病理学研究に有用不死化 マウス メラニン形成細胞

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本商品は、マウス(C57BL/6)皮膚より単離したメラニン形成細胞に、Cre/loxP部位を隣接するSV40ラージT抗原をもつ非複製レトロウイルスを感染させることにより不死化した、不死化マウスメラニン形成細胞です。表皮メラニン形成細胞は、有害なUV線に対して防御機構として機能するメラニン産生細胞です。メラノーマは、メラニン形成細胞の欠損、機能障害、または欠乏と関連することが示されています。本細胞は、ハイグロマイシン耐性細胞であり、メラニン形成マーカー(c-kit、Pax3、Sox10、およびMITF-m) を発現し、また非腫瘍原性です。本細胞は、前駆体様中程度に分化された段階、および後期メラニン形成細胞からなる細胞プールです。本細胞をデキサメサゾン存在下で培養すると分化され、HMB45とチロシナーゼを発現する成熟したメラニン形成細胞が得られます。本細胞はメラニン形成細胞の生物学や色素関連細胞障害における分子病理学研究に有用です。

 

【ご注意】
下記商品は、2004年2月19日に施行されました「遺伝子組換え生物等の使用等の規制による生物の多様性の確保に関する法律」(通称カルタヘナ法)の使用規制対象品です。ご使用に際しては、規則に則し、適切にお取扱いください。

特長

生物種 マウス(C57BL/6)
由来器官 皮膚
生育特徴 接着
形態 多角形
不死化方法 連続継代とCre/loxP部位を隣接するSV40ラージT抗原をもつ組換え型レトロウイルス(SSR#69)のトランスダクション
マーカー c-kit, Pax3, Sox10, MITF-m

製品データ

不死化マウス メラニン形成細胞の特性解析
図.1 不死化マウス メラニン形成細胞の特性解析
(a) 不死化マウス前駆体様メラニン形成細胞 (iMC23) (aA)、および 不死化マウス後期メラニン形成細胞 (iMC65) (aB)を低密度で播種し、5日目に観察した。
(b) (bA) 不死化マウスメラニン形成細胞にAdGFPまたはAdFLPを感染させ、緑色蛍光タンパク質シグナルを24時間後に確認した。
(bB) 不死化マウスメラニン形成細胞にAdFLP(+)または AdGFP(-)を48時間感染させた。全細胞タンパク質を抗-SV40Tを用いたウェスタンブロットで分析した(ローディングにはβ-アクチンブロットを使用した)。
(bC, bD) 不死化マウス前駆体様メラニン形成細胞 (iMC23)にAdFLPまたはAdGFPを感染させ、クリスタルバイオレットで染色した。その後、560 nmで吸光度を定量した。
(c) (cA) 不死化マウスメラニン形成細胞を沈殿させて回収した。細胞沈殿の色素沈着を観察した。
(cB) 不死化マウスメラニン形成細胞を回収し内在性チロシナーゼ酵素分析を行った。
(d) (dA) 不死化マウスメラニン形成細胞をc-kitとHMB45抗体を用いて免疫染色した。
(dB) 不死化マウスメラニン形成細胞においてメラニン(矢印)のフォンタナ・マッソン染色を行った。
OD: 光学密度、バー:50 µm

不死化 メラニン形成細胞(iMCs)のメラニン形成能
図.2 不死化 メラニン形成細胞(iMCs)のメラニン形成能
(aA) iMC23細胞をデキサメサゾン(Dex)で5日間処理後、チロシナーゼ酵素アッセイ用に回収した。
(aB) iMC23細胞を12nM Dexで刺激した。遺伝子発現をRT-PCRで確認した。GAPDHをコントロールとした。
(b) iMC23細胞を12nM Dexで5日間処理した。細胞沈殿中(bA)、培養物中 (bB) におけるメラニン産生を顕微鏡下、または、(bC) フォンタナ・マッソン染色で可視化した。メラニン陽性細胞は矢印で示した。
バー: 100 µm

不死化 マウス メラニン形成細胞

「営利研究機関」と「非営利研究機関」で販売価格が異なります。

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Immortalized Mouse Melanocytes for commercial user, Mouse APB T0466-C 1 EACH
[1x10^6 cells/1.0 ml]
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Immortalized Mouse Melanocytes for academic user, Mouse APB T0466-C-ACADEMIC 1 EACH
[1x10^6 cells/1.0 ml]
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