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記事ID : 34209
研究用

エンドグリンの発現や制御、心血管疾患の研究に有用不死化 ヒト 上行大動脈血管平滑筋細胞 - SV40

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本商品は、大動脈二尖弁(BAV)をもつ男性ドナーの心臓から単離した行大動脈血管平滑筋細胞を連続継代し、SV40ラージT抗原を発現するプラスミドベクターをトランスフェクション法で導入することで不死化した、不死化ヒト上行大動脈血管平滑筋細胞です。血管平滑筋細胞(VSMCs)は、合成機能や収縮性を遂行することができ、これらは形態変化、増殖率、およびTGFβといった異なるマーカータンパク質発現に関与します。本細胞の表現型は、無活動のものから収縮性で増殖性かつ合成性のものまで様々であり、これらは表現型に応じて一連の機能を遂行することができます。本細胞は、特にエンドグリン遺伝子の発現や制御の研究において有用です。エンドグリンは、本細胞において様々な濃度のロサルタン(Cozaar)処理に応答して下方制御されます。

 

特長

生物種 ヒト
由来器官 心臓
ドナー情報 年齢:46歳、性別:男性
生育特徴 接着
形態 多角形
推奨播種密度 20,000 〜 50,000 cells/cm2
倍加時間 30〜40時間
不死化方法 連続継代とSV40ラージT抗原をもつ哺乳動物発現ベクタ−のトランスフェクション

製品データ

不死化ヒト上行大動脈血管平滑筋細胞
図.1 不死化ヒト上行大動脈血管平滑筋細胞 - SV40(T0549-C/T0549-C-ACADEMIC)

上行大動脈血管平滑筋細胞の不死化
図.2 上行大動脈血管平滑筋細胞の不死化
(A) 形質転換後26日における形質転換細胞の初期病巣を明視野顕微鏡で観察した結果。培養した形質転換細胞において病巣が明確に区別できた。
(B) 形質転換細胞におけるGFP標識T抗原発現。
(C) 不死化したコンフルエントなWG-59と、形質転換していないコンフルエントな初代VSMCsの比較。
(D)はその10倍拡大写真。
(E) 第20継代の3日目におけるWG-59細胞培養物。10倍拡大写真。
(F) 第20継代の6日目におけるWG-59細胞培養物。10倍拡大写真。

不死化ヒト上行大動脈血管平滑筋細胞の染色体図
図.3 不死化ヒト上行大動脈血管平滑筋細胞の染色体図
WG-59不死化培養細胞において検出された染色体図を着色して示した。複数の異常が見られる偽三倍体細胞株が確認できる。

不死化ヒト上行大動脈血管平滑筋細胞の純度分析
図.4 不死化ヒト上行大動脈血管平滑筋細胞の純度分析
単離したVSMCsをフローサイトメトリにより純度分析したところ、第20継代目の80-90%コンフルエントな培養物においてαアクチンとミオシン重鎖陽性細胞が確認できた。
(A) イソ型コントロール。
(B) WG-59細胞。
(C-D) 単離したVSMCsをフローサイトメトリにより純度分析したところ、第20継代目の80-90%コンフルエントな培養物においてαアクチンとカルポニン陽性細胞が確認できた。
(E-F) 単離したVSMCsをフローサイトメトリにより純度分析したところ、第20継代目の80-90%コンフルエントな培養物においてミオシン重鎖とカルポニン陽性細胞が確認できた。
(G-H) 単離したVSMCsをフローサイトメトリにより純度分析したところ、第20継代目の80-90%コンフルエントな培養物においてSmoothelinとWG-59細胞のイソ型コントロールが確認できた。
(G) Smoothelin発現のヒストグラムプロット。
(H) イソ型コントロールを偽カラープロットで示した。

不死化 ヒト 上行大動脈血管平滑筋細胞 - SV40

「営利研究機関」と「非営利研究機関」で販売価格が異なります。

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Immortalized Human Ascending Aorta Vascular Smooth Muscle Cells for commercial user, Human詳細データ APB T0549-C 1 EACH
[1x10^6 cells/1.0ml]
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Immortalized Human Ascending Aorta Vascular Smooth Muscle Cells for academic user, Human詳細データ APB T0549-C-ACADEMIC 1 EACH
[1x10^6 cells/1.0ml]
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