本製品は、L-グルタミン酸特異的に作用する酵素 L-グルタミン酸オキシダーゼ(EC1.4.3.11)を用いて、L-グルタミン酸を測定するキットです。 従来製品である「ヤマサ L-グルタミン酸測定キットII」を、より使いやすく改良したものです。一方で、測定値に変動はなく、従来製品に引き続いてご使用いただけます。
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本製品は、L-グルタミン酸特異的に作用する酵素 L-グルタミン酸オキシダーゼ(EC1.4.3.11)を用いて、L-グルタミン酸を測定するキットです。 従来製品である「ヤマサ L-グルタミン酸測定キットII」を、より使いやすく改良したものです。一方で、測定値に変動はなく、従来製品に引き続いてご使用いただけます。
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L-グルタミン酸は、「うま味」成分の一つして知られており、ナトリウム塩であるL-グルタミン酸ナトリウムは「うま味調味料」の主成分として用いられています。また、動物の体内でグルタミン酸受容体を介しての神経伝達を行う興奮性の神経伝達物質としても機能しています。そのため、L-グルタミン酸を検出・定量することは食品や生化学の分野において重要視されています。
L-グルタミン酸の測定には、アミノ酸分析機やグルタミン酸脱水素酵素、脱炭酸酵素を用いた方法などがありますが、どれも正確性や再現性に欠けたり、手間が複雑であったり高価であるなどの諸問題が指摘されています。
ヤマサ醤油では、1983年醤油研究の過程で Streptomyces の一種がL-グルタミン酸特異的に作用する酵素L-グルタミン酸オキシダーゼを産生することを見いだし1)、製品化に成功しました。さらに本酵素を用いて、L-グルタミン酸を簡単に測定できる方法を開発しました(測定原理参照)2)3)。この方法を基に、簡便にL-グルタミン酸を測定できる試薬として製品化したのがヤマサL-グルタミン酸測定キット4)で、2008年からは改良を加えたヤマサL-グルタミン酸測定キットIIを販売してまいりました。
本品は、ヤマサL-グルタミン酸測定キットIIをさらに改良したものです。測定に必要な試薬はすぐに使える状態で添付されており(構成内容参照)、より使い易くなり、簡単な操作でL-グルタミン酸を定量できます(測定方法参照)。
ヤマサ L-グルタミン酸測定キットII からの改良点についてはキットの特長をご覧下さい。
本製品は従来製品(ヤマサ L-グルタミン酸測定キットII)と比較して、下記特徴をもってL-グルタミン酸を測定できます。
本製品と従来製品との比較を下記に示します。
比較項目 | L-グルタミン酸測定キット「ヤマサ」NEO | ヤマサ L-グルタミン酸測定キットII |
---|---|---|
構成内容 |
|
|
試料量 | 0.01mL | 0.06mL |
測定範囲 | 10〜1500mg/L | 10〜500mg/L |
アスコルビン酸 共存試料 |
前処理不要 (1000mg/L まで共存しても影響なし) |
処理必要 (100mg/L 共存で測定値約 30% 低下) |
テスト数 | 66テスト | |
貯蔵方法 | 2〜8℃ | |
有効期間 | 製造日より12ヶ月 |
各種試料を、本製品と従来製品で測定した結果を下記に示します。本製品での測定値は従来製品に対して 94〜106% を示しました。
試料 | L-グルタミン酸濃度(mg/L) | 本製品/従来品 | |
---|---|---|---|
本製品 | 従来品 | ||
Grace培地(10%FBS) | 700 | 747 | 94% |
トマト汁 | 2032 | 2072 | 98% |
醤油 | 10701 | 10850 | 99% |
市販だし溶解液 | 22327 | 22673 | 98% |
ソーセージ液 | 200 | 189 | 106% |
(注意)
L-グルタミン酸溶液に、アスコルビン酸を 0、100、1000mg/L の濃度になるよう加えたものを試料とし、本製品および従来品で測定を行いました。本製品ではアスコルビン酸が 1000mg/L 共存している場合でもほとんど影響は見られませんでした。
*1キットで約66試料が測定できます(同時に測定する標準液、精製水、試料色も含む)。
試料にR1酵素試薬液を添加すると、アスコルビン酸オキシダーゼの作用で試料に含まれるアスコルビン酸(ビタミンC)が除かれます。続いてR2酵素試薬液を添加すると、 L-グルタミン酸はL-グルタミン酸オキシダーゼの作用で酸化され、過酸化水素を生成します(1)。生成された過酸化水素からペルオキシダーゼの作用によるTOOSと4-アミノアンチピリンとの酸化縮合反応で紫色色素が生成されます(2)。この紫色の吸光度(555nm)から試料中のL-グルタミン酸濃度を定量します。
試料用 試験管 | 標準液用 試験管 | 精製水用 試験管 | 試料色用 試験管 |
|
---|---|---|---|---|
試料 | 10μL | − | − | 10μL |
標準液 | − | 10μL | − | − |
精製水 | − | − | 10μL | 900μL |
R1酵素試薬液 | 450μL | 450μL | 450μL | − |
R2酵素試薬液 | 450μL | 450μL | 450μL | − |
吸光度 | A | S | R | B |
試料中のL-グルタミン酸の濃度は下記の計算式にて算出します。
L-グルタミン酸(mg/L)=(A-B-R)÷(S-R)×250×希釈倍率
※注意
上記使用例は、L-グルタミン酸オキシダーゼを用いた独自の測定法、あるいは従来品を用いた検討です。
品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
---|---|---|---|---|
L-グルタミン酸測定キット「ヤマサ」NEO / L-Glutamate Assay Kit YAMASA NEO |
YMS | 80128 | 1 KIT [66 TESTS] |
¥47,000 |
商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。
※ 表示価格について
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