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研究用

機能性をもつ乳酸菌の開発をトータルサポート! 乳酸菌の機能性評価試験受託サービス

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LABバイオテック社では様々な健康・機能性食品メーカーと新規乳酸菌の共同開発、機能性表示乳酸菌の開発を実施しています。豊富な乳酸菌の研究・開発経験を活かして、ご要望に応じた乳酸菌や素材の機能性評価試験を行います。LABバイオテック社が保有する約350種類の乳酸菌株ライブラリを用いたスクリーニング試験もご対応可能です。

試験メニュー

1. 自然免疫亢進効果

試験項目 測定方法 試験概要
IFN-α ELISA
  • in vitro試験:免疫細胞と乳酸菌を共培養し、自然免疫応答を担っているインターフェロン産生量の変化をELISAキットにより測定します。
  • in vivo試験:マウスに乳酸菌を摂取させ、血清中インターフェロン量の変化をELISAキットにより測定します。
IFN-β
IFN-ε
IFN-γ

2. アレルギー反応抑制効果

試験項目 測定方法 試験概要
IgEの発現量抑制評価 WB, IHC, ICC
  • in vitro試験:アレルギーを模倣した環境下で、免疫細胞と乳酸菌を共培養し、アレルギー反応に関わる様々なタンパク質 (例:IgE Fcやヒスタミンなど)の発現量の変化をウェスタンブロッティングあるいはELISAキットにより測定します。また、免疫染色を行い、顕微鏡下で観察します。
  • in vivo試験:乳酸菌を摂取したアレルギーモデルマウスを用いて、臓器や血清中の標的タンパク質量の変化をウェスタンブロッティングあるいはELISAキットにより測定します。また、臓器切片の免疫染色を行い、顕微鏡下で観察します。
アレルギー増悪因子
の測定
ELISA
IgE受容体サブユニットの
発現量増加抑制評価
PCR アレルギーを模倣した環境下で、免疫細胞と乳酸菌を共培養し、アレルギー反応に関わるFcεRI を構成するサブユニットのうち、FcεRI に必須かつ特異的な分子 である α 鎖と細胞内情報伝達機能に必須の分子であるγ 鎖をReal time PCRで定量します。
脱顆粒抑制評価 酵素活性測定 乳酸菌を摂取したアレルギーモデルマウスを用いて、脱顆粒の指標となる血液中β-Hexosaminidaseの変化量をAssayキットにより測定します。

3. セロトニン分泌促進

試験項目 測定方法 試験概要
セロトニン量の測定 ELISA
  • in vitro試験:セロトニンを分泌する腸クロム親和性細胞と乳酸菌を共培養し、セロトニン産生量の変化をELISAキットにより測定します。
  • in vivo試験:乳酸菌を摂取したマウスを用いて、血清中セロトニン量の変化をELISAにより測定します。

4. 筋肉老化抑制評価

試験項目 測定方法 試験概要
細胞の損傷抑制能
の評価(生細胞数評価)
酵素活性測定 筋萎縮モデル細胞と乳酸菌を共培養し、生細胞数の比較を行います。
ROS
産生抑制評価
蛍光分析 筋萎縮モデル細胞と乳酸菌を共培養し、ROS(Reactive oxygen species)産生量の変化をAssayキットにより測定します。
抗酸化酵素SOD
の活性化能評価
吸光分析 活性酸素を生成する酵素SOD(Superoxide dismutase)に対する乳酸菌の阻害活性を、in vitro系試験により測定します。
抗酸化能評価 WB, IHC, ICC 筋萎縮モデル細胞と乳酸菌を共培養し、抗酸化応答転写因子Nrf-2およびその転写産物である抗酸化酵素HO-1のタンパク質量変化をウェスタンブロッティングにより測定します。また、免疫染色を行い、顕微鏡下で観察します。
ミトコンドリア膜電位
活性化能評価
蛍光分析 筋萎縮モデル細胞と乳酸菌を共培養し、ミトコンドリアの活性をDetectionキットにより測定します。
サイトカイン産生
抑制評価
ELISA 筋萎縮モデル細胞と乳酸菌を共培養し、サイトカイン産生量の変化をELISAキットにより測定します。

5. 血圧上昇抑制評価

試験項目 測定方法 試験概要
乳酸菌のACE阻害活性 吸光分析 昇圧作用物質を生成する酵素ACEに対する乳酸菌の阻害活性を、in vitro系試験により測定します。

6. 終末糖化産物生成抑制評価

試験項目 測定方法 試験概要
AGEsの
生成抑制評価
ELISA 乳酸菌を摂取した疾患モデルマウスを用いて、血液中のAGEs量変化をELISAキットにより測定します。

7.アンチエイジング

試験項目 測定方法 試験概要
コラーゲン産生試験 蛍光分析 表皮系細胞と乳酸菌を共培養し、細胞懸濁液に含まれるコラーゲンおよびヒアルロン酸の変化量を定量キットにより測定します。
ヒアルロン酸産生試験 吸光分析
遊走性評価試験 スクラッチ
アッセイ
表皮系細胞と乳酸菌を共培養し、表皮系細胞の再生能力をスクラッチアッセイにより測定します。
細胞賦活試験 蛍光分析 表皮系細胞と乳酸菌を共培養し、細胞賦活の指標となるミトコンドリアの活性をDetectionキットにより測定します。

8. M1化抑制

試験項目 測定方法 試験概要
M1化抑制試験 遺伝子発現解析 マウスマクロファージ様細胞に被験物質を添加後、グラム陰性細菌由来のLPSを添加して炎症性を誘導します。被験物質添加による炎症性サイトカイン産生抑制を遺伝子発現解析で評価します。

9. アミロイド-β貪食能

試験項目 測定方法 試験概要
アミロイド-β貪食能評価 画像解析 マウスマクロファージ様細胞に被験物質添加後、TMAR標識したアミロイド-β(A-β)を添加し、経時的に細胞内のファゴリソゾームに取り込まれたA-β量を測定します。

10. 内臓脂肪燃焼・蓄積抑制

試験項目 測定方法 試験概要
UCP-1遺伝子
発現測定
遺伝子発現解析 内臓脂肪細胞に被験物質を添加し、一定時間培養後、ノルアドレナリンを添加して、6時間後に細胞を回収し、UCP-1の遺伝子発現解析を行います。
アディポネクチン
産生試験
ELISA 内臓脂肪細胞に被験物質を添加し、培養上清中に分泌されるアディポネクチン量をELISAアッセイで測定します。
脂肪蓄積抑制試験 蛍光染色 内臓脂肪細胞に被験物質を添加し、培養後、脂肪球を染色して、蓄積脂肪量を画像解析で計測します。また、培養上清中のジグリセリドと遊離脂肪酸を測定します。

試験実施例

アレルギー反応抑制効果

LBB_LAB_assay_service_fig1.jpg
図1. クラーク乳酸菌type-Iの添加によるサイトカイン産生量の評価
クラーク乳酸菌type-Iはアレルギーの抑制に効果が期待できる乳酸菌株(Pediococcus pentsaceus)を配合しております。 クラーク乳酸菌をマウス脾臓細胞に添加し共培養することにより、Th1型サイトカインのIFN-γが添加量依存的に増加したのに対し、Th2型サイトカインのIL-4は添加量依存的に減少しました。 このことから、クラーク乳酸菌type-IはTh1/Th2バランスを整えることでアレルギー症状を緩和することが期待できます。

【クラーク乳酸菌type-I】
乳酸菌数:6,000億個/g以上
原材料表示例:殺菌乳酸菌粉末(乳酸菌、デキストリン)
アレルギー表示の有無:無
包装形態:1 kgアルミ蒸着袋詰
(出典:株式会社LABバイオテック クラーク乳酸菌外部リンク

M1化抑制試験

LBB_LAB_assay_service_fig2.png
図2. エクソソーム(EVs)添加によるマクロファージのM1化抑制評価
マウスマクロファージ様細胞(RAW 264.7)にEVsを添加後、LPSを添加して炎症性を誘導したところ、乳酸菌EVsおよびヒト歯髄間葉系幹細胞Exosomeは対象(PBS + LPS)より炎症性サイトカインのIL-6の遺伝子発現量が減少したことより、マクロファージのM1化を抑制した。

脂肪蓄積抑制試験

LBB_LAB_assay_service_fig3.png
図3. 脂肪蓄積評価
内臓脂肪細胞(コスモ・バイオ社 品番:VAC01C)に被験物質を添加し、細胞内の脂肪球をBODIPY®で染色した。

価格および納期

各サービスの価格・納期については創薬・受託サービス部(jutaku_gr@cosmobio.co.jp)へお問い合わせください。

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受付時間:平日(9:00~17:30)

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