多細胞生物体内の細胞が放つエクソソームは細胞外小胞: EVs(Extracellular Vesicles)の1つであり、すでに医薬品および化粧品への応用が期待され各分野で開発が進行しています。一方、単細胞である微生物からも同様のEVsが放出され、20-400 nmの球状の構造体であり、エクソソームと同様に微生物-微生物間、さらには微生物-宿主細胞間の情報伝達を担っていることが明らかになっています。EV産生は微生物にとって不可欠な機能であり、EVsによる細菌間もしくは宿主との相互作用の機能解明は、ワクチン開発のシーズや腸内における細菌の宿主への作用、ドラッグデリバリーシステム（DDS）といった様々な応用分野への展開が期待されています。
・乳酸菌由来細胞外小胞 ・酵母由来細胞外小胞 ・大腸菌由来細胞外小胞 ・LPS産生細菌由来細胞外小胞
本製品は、乳酸菌の培養上清から 超遠心分離法または限外濾過法により EV 画分を精製した研究用試薬です。乳酸菌由来EVのヒトへの作用や生理的機能の解明の研究を支援いたします。また、菌体そのものを利用する従来のプロバイオティクスの発展形として、医薬品、機能性食品、化粧品原材料の開発等にご利用ください。
＜商品ラインアップ＞
Bacillus coagulans は世界中で利用されている有胞子性乳酸菌で、lilac-01※1 は、ライラックの花から単離された株です。
本製品はBacillus coagulans lilac-01の培養上清を、限外ろ過法によりEV画分を精製した製品です。
※1：アテリオ・バイオ株式会社が特許を取得した（特許第5006986号）有胞子性乳酸菌です。
図1. NanoSight 粒度分布データ
粒子数：1.87e+11 particles/mL
| 品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
|---|---|---|---|---|
| 乳酸菌由来細胞外小胞(Bacillus coagulans lilac-01 株) / Extracellular Vesicles derived from Bacillus coagulans lilac-01 strain  |
CSR | LBEV01-UF | 200 UL [>1 x 10^11 particles/mL] |
￥50,000 |
Leuconostoc mesenteroides※2 は、漬物などから分離される植物性乳酸菌の代表で偏性ヘテロ発酵様式をとります。
本製品はLeuconostoc mesenteroides から生成された培養上清を、限外濾過法によりEV画分を精製した製品です。
図2. 菌体の電子顕微鏡画像
図3. NanoSight 粒度分布データ
| 品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
|---|---|---|---|---|
| 乳酸菌由来細胞外小胞(Leuconostoc mesenteroides 180720-12-1 株) / Extracellular Vesicles derived from Leuconostoc mesenteroides 180720-12-1 strain |
CSR | LBEV-R1-UF | 200 UL [>1 x 10^10 particles/mL] |
￥50,000 |
Lactobacillus paracasei ※2 は植物性発酵食品、発酵乳など幅広く分離される偏性ヘテロ発酵乳酸菌で免疫活性が注目されています。本製品は、Lactobacillus paracasei から生成された 培養上清を、限外濾過法によりEV画分を精製した製品です。
※2：酪農学園大学 応用微生物学研究室 山口 昭弘 教授 、亀田 くるみさんら研究室生が学内植物材料や道産食材などから、独自に分離培養・同定した乳酸菌です。また電子顕微鏡画像は同大学 応用生化学研究室 岩﨑 智仁 教授の撮影です。
図4. 菌体の電子顕微鏡画像
図5. NanoSight 粒度分布データ
| 品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
|---|---|---|---|---|
| 乳酸菌由来細胞外小胞(Lactobacillus paracasei 180913-R1 株) / Extracellular Vesicles derived from Lactobacillus paracasei 180913-R1 strain |
CSR | LBEV-R2-UF | 200 UL [>1 x 10^10 particles/mL] |
￥50,000 |
単細胞性の真菌である酵母もEVsを産生することが報告されており、様々な生理活性物質の運搬を担っていることが示唆されています。
本品は、酵母の培養上清を、限外濾過法により EV 画分を精製した製品です。
＜商品ラインアップ＞
Hanseniaspora vineae※2 は自然界に広く分布する代表的な芳香性野生酵母であり、自然発酵ワインの醸造初期段階で働くことが知られています。本製品はHanseniaspora vineae 181019Y5-2 の培養上清から、限外濾過法により EVs を精製し た製品です。
| 品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
|---|---|---|---|---|
| 酵母由来細胞外小胞 (Hanseniaspora vineae 181019Y5-2 株 ) / Extracellular Vesicles derived from Hanseniaspora vineae 181019Y5-2 strain |
CSR | YSEV-R3 | 200 UL [(>1 x 10^10 particles/mL)] |
￥50,000 |
Kloeckera apiculata※３ はワインの発酵初期に働くブドウ糖のみを資化するレモン型酵母で、揮発酸( 酢酸) 生成量が多いことが知られています。本製品はKloeckera apiculata 180926-3 の培養上清から、限外濾過法により EVs を精製
した製品です。
| 品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
|---|---|---|---|---|
| 酵母由来細胞外小胞 (Kloeckera apiculata 180926-3 株 ) / Extracellular Vesicles derived from Kloeckera apiculata 180926-3 strain |
CSR | YSEV-R4 | 200 UL [(>1 x 10^10 particles/mL)] |
￥50,000 |
Saccharomyces cerevisiae※３ はアルコール耐性に優れ、醸造用・製パン用に選抜された汎用市販酵母として広く利用されています。本製品はSaccharomyces cerevisiae 1611-4 の培養上清から、限外濾過法により EVs を精製した製品です。
| 品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
|---|---|---|---|---|
| 酵母由来細胞外小胞 (Saccharomyces cerevisiae 1611-4 株 ) / Extracellular Vesicles derived from Saccharomyces cerevisiae 1611-4 strain |
CSR | YSEV-R5 | 200 UL [(>1 x 10^10 particles/mL)] |
￥50,000 |
Saccharomyces paradoxus※３ は遺伝的にS. cerevisiae の親種に相当し、アルコール耐性など優れた発酵特性を持つ酵母です。本製品はSaccharomyces paradoxus 181211-12 の培養上清から、限外濾過法により EVs を精製した製品です。
| 品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
|---|---|---|---|---|
| 酵母由来細胞外小胞 (Saccharomyces paradoxus 181211-12 株 ) / Extracellular Vesicles derived from Saccharomyces paradoxus 181211-12 strain |
CSR | YSEV-R6 | 200 UL [(>1 x 10^10 particles/mL)] |
￥50,000 |
※３酪農学園大学 応用微生物学研究室 山口 昭弘 教授 、亀田 くるみさんら研究室生が学内植物材料や道産食材などから、独自に分離培養・同定した酵母です。
YSEV-R3
YSEV-R4
YSEV-R5
YSEV-R6
図6. NanoSightによる酵母由来EVsの粒度分布測定例
グラム陰性細菌とグラム陽性細菌ではEVsの放出機構が異なり、EVsの伝達する情報も異なります。特にグラム陰性細菌である大腸菌（Escherichia coli）由来のEVs上にはLPSが存在することから、宿主細胞に対してグラム陽性菌とは異なる反応性を示すことが報告されています。
本製品は、遺伝子工学実験に広く使用されているEscherichia coli DH5αの培養上清から、限外濾過法によりEVsを精製した製品です。
イラスト：グラム陰性細菌とグラム陽性細菌由来EV
| 品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
|---|---|---|---|---|
| 大腸菌由来細胞外小胞（DH5α） / Extracellular Vesicles derived from Escherichia coli DH5α |
CSR | ECEV | 200 UL [(>1 x 10^10 particles/mL)] |
￥50,000 |
粒子数はロットごとに異なります。商品に添付のCoAをご参照ください。
図7. NanoSightによる大腸菌由来EVsの粒度分布測定例
グラム陰性細菌のEVとLPS研究に
Pantoea agglomerans IG1株EV
Pantoea agglomerans（パントエア・アグロメランス）IG1株※4は、植物(小麦、イネ、サツマイモ、リンゴ、ナシ、サトウキビなど)に広く共生するグラム陰性菌で、窒素固定や無機リン酸塩の溶解によって植物の成長を促進することが報告されています1)。また、欧米の健康食品であるライ麦パンの発酵過程で本菌が葉酸の産生に重要な役割を担っていること2)、リンゴやナシの黒カビ病を防ぐバイオ生剤として活用されていること3)など食品分野にもパントエア・アグロメランス生菌が使用されています。これらのことから、食経験の豊富な菌であり、また腸内細菌の一つとしても知られています。
本製品は、Pantoea agglomerans IG1株の培養上清から限外濾過法によりEVs画分を精製した製品です。
※4：自然免疫応用技研株式会社が特許を取得した（特許第5511112号及び特許第5517215号）LPS産生細菌です。
図8. Pantoea agglomerans IG1 株の脂質二重膜構造とEV 産生機構
LPS(Lipopolysaccharide)
グラム陰性細菌の細胞壁の外膜上に存在し、リピドA（Lipid A）と呼ばれる脂質とコア多糖とO抗原多糖が結合した構造を持つ両親媒性の物質です（図8参照）。
LPSは、主に自然免疫系細胞や上皮細胞に発現しているTLR4/MD2複合体にリピドA（Lipid A）部分が結合し、MyD88介して、細胞内の核にシグナルが伝達されて、細胞が活性化されます。
Extracellular vesicles （EVs）由来のLPSと遊離したLPSの違い
EVsは細胞が放出するエクソソーム(細胞外小胞)類の統一名称で、EVsは細胞外の情報伝達に使用されています。細菌も生存活動においてEVsを放出して、宿主や細菌間での情報伝達に使用されています。グラム陰性菌のEVsの特徴としては、図8のように外膜にLPSが含まれています。しかし、主に生理活性を担うリピドA（Lipid A）部分は外膜の内側を向いており、EVsに含まれた状態では、TLR4と反応しにくい可能性があります。そのことから、精製LPSや菌体から遊離したLPSとは免疫細胞に対する働きが異なる可能性があります。そこで、EVsは腸内、口腔内などの共生細菌の生育環境における宿主への働きを解明する一つのツールになると考えられています。
| 品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
|---|---|---|---|---|
| パントエア・アグロメランス由来細胞外小胞(Pantoea agglomerans IG1 株) / Extracellular Vesicles derived from Pantoea agglomerans IG1 strain |
CSR | LPSEV01 | 200 UL [>1 x 10^10 particles/mL] |
￥50,000 |
粒子数はロットごとに異なります。商品に添付のCoAをご参照ください。
図9. NanoSightによるPantoea agglomerans IG1株由来EVsの粒度分布測定例
商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。
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