本キットは、少量の全血に抗原となるウイルス断片ペプチド等を添加し、専用のプレートを組み合わせることで、刺激を受けた特異的T細胞中の遺伝子発現変動を定量PCRにより細胞性免疫応答として評価する独自の研究用検査キットです。
本商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。
本キットは、少量の全血に抗原となるウイルス断片ペプチド等を添加し、専用のプレートを組み合わせることで、刺激を受けた特異的T細胞中の遺伝子発現変動を定量PCRにより細胞性免疫応答として評価する独自の研究用検査キットです。
本商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。
本キットは、全血が使用可能であり、Antigen-Coated Plate for SARS-CoV-2 (オプション製品)を用いた場合、4時間の抗原刺激で免疫応答を検出することができます。また、刺激後の全血は凍結保管することができます。
Leukocyte Isolation Plateは、全血中の白血球を独自のフィルター素材で捕捉します。高い白血球親和性と多孔性により、白血球を高収率で再現性よく分離することができます。
分離された白血球は、溶解バッファーに含まれるグアニジンチオシアネートの存在下で、Leukocyte Isolation Plate上で直接溶解され、即座にリボヌクレアーゼを不活性化し、インタクトなRNAの単離を確実にします。
白血球溶解液をmRNA Capture Plateに移した後、各ウェルに固定化された一本鎖オリゴ(dT)とのハイブリダイゼーションにより、ポリ(A)+ RNAが単離されます。この方法の利点は、従来の磁気ビーズやグラスファイバー法よりもサンプル間の再現性が高く、取り扱いが容易なことです。
mRNA Capture Plateにハイブリダイズされたポリ(A)+ RNAは、同じウェル内で逆転写酵素及び、ランダムヘキサマーによりcDNAを合成することが可能です。合成されたcDNAは、溶液中に置換、放出され、リアルタイムPCRによりターゲット遺伝子の発現レベルの変動測定に利用することが可能です。
・LeukoComplete™ Plate Kit (品番:11110)
・LeukoComplete™ Plate Kit (with Antigen Coated Plate for SARS-CoV-2) (品番:11111)※1
構成品 | 容量 |
---|---|
Antigen-Coated Plate for SARS-CoV-2 ※1 | 1 plate |
Leukocyte Isolation Plate (filter plate) | 1 plate |
mRNA Capture Plate | 1 plate |
Lysis Buffer | 6 mL × 1本 |
Proteinase K | 30 µL × 1本 |
TCEP | 300 µL × 1本 |
Wash Buffer A | 30 mL × 1本 |
Wash Buffer B | 50 mL × 1本 |
PT Buffer | 15 mL × 1本 |
Deep Well Plate | 1 plate |
Aluminum Seal | 1枚 |
※1 LeukoComplete™ Plate Kit (with Antigen Coated Plate for SARS-CoV-2)に含まれます。
・LeukoComplete™ RT and PCR Kit (品番:11120)
構成品 | 容量 |
---|---|
RT Buffer | 1.5 mL × 2本 |
M-MLV Reverse Transcriptase | 40 µL × 1本 |
RNase Inhibitor | 10 µL × 1本 |
ACTB Primer Mix | 100 µL × 1本 |
IFNG Primer Mix | 100 µL × 1本 |
※2 PCR酵素は別途購入ください。
[SsoAdvanced™ Universal qPCR Supermix (Bio-Rad社 品番:1725270)を推奨]
図2. 全血量と遺伝子量の直線性
全血を50 µLから1/2量ずつ減らしながらフィルタープレートに添加しLeukoComplete™により、コントロール遺伝子を検出。血液量に依存した良好な直線性が得られることを確認しました。
図3. 全血への抗原刺激時間とレスポンスの関係
全血にSARS-CoV-2由来ペプチドプールで刺激を行い、刺激時間による標的遺伝子(IFNG)の発現量を検討。4時間の抗原刺激で測定が可能であることを確認しました。
図4. 従来法 (ELISpot法)との性能比較
LeukoComplete™を用いて新型コロナウイルスに対する獲得免疫を調べる検出法としての適性を評価。全血によるLeukoComplete™を用いた検出法は、白血球を用いたELISpot法と同等の性能であることを確認しました。
図5. 新型コロナワクチン接種後の獲得免疫モニタリング
3回ワクチン接種後3〜9か月後の獲得免疫の推移を検討。ワクチン接種後9か月でも細胞性免疫が維持される傾向であることを確認しました。
品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
---|---|---|---|---|
LeukoCompleteTM Plate Kit, Human | MIN | 11110 | 1 KIT [for 1 plate] |
¥78,000 |
LeukoCompleteTM Plate Kit(with Antigen Coated Plate for SARS-CoV-2), Human | MIN | 11111 | 1 KIT [for 1 plate] |
¥192,000 |
LeukoCompleteTM RT and PCR Kit, Human | MIN | 11120 | 1 KIT [for 1 plate] |
¥48,000 |
本キットは今後の検討によりその仕様、設計、内容等を変更する場合があります。
商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。
※ 表示価格について
© COSMO BIO