記事ID ： 47054

脂質滴染色試薬 LipidSpot™

メーカー名：Biotium, Inc.

LipidSpot™は、脂質滴を蛍光で迅速に染色できる試薬です。洗浄工程は不要で、生細胞と固定細胞の両方の脂質滴の染色に使用できます。また、染色後に細胞を固定し、透過処理も可能です。Nile Redとは異なり、細胞膜や他のオルガネラのバックグラウンド染色を最小限に抑えます。

特長

脂肪滴を迅速かつ特異的に染色
生細胞・固定細胞の染色が可能で、染色後の固定・透過処理にも対応
最小限のバックグラウンド、洗浄工程が不要
3次元細胞スフェロイドの脂質滴染色も可能

LipidSpot™	品番	サイズ		検出チャンネル
LipidSpot™ 488	70065-T	20 µL	427/585	FITC, GFP
LipidSpot™ 488	70065	125 µL	427/585	FITC, GFP
LipidSpot™ 610	70069-T	20 µL	610/663 (植物油) ~592/638 (細胞)	Texas Red®, Cy®5
LipidSpot™ 610	70069	125 µL	610/663 (植物油) ~592/638 (細胞)	Texas Red®, Cy®5

プロトコル

生細胞染色

LipidSpot™ 染色液を培養培地または任意のbufferで1Xに希釈。
細胞培養液を染色液と交換し、遮光した状態で37℃ 30分以上インキュベート。
洗浄は任意で、染色後そのまま蛍光観察が可能。

注意事項

染色後、最大24 時間までインキュベートしても明らかな細胞毒性は確認されていない。
染色後のホルムアルデヒド固定や0.1% Triton® X-100による透過処理も可能
グリセロールや有機溶媒を含むマウント剤は非推奨

固定細胞染色

ホルムアルデヒド系固定液で細胞を固定する。
必要に応じて、0.1% Triton® X-100で透過処理。
LipidSpot™ 染色液を PBS で 1X に希釈し、遮光して室温で10分以上インキュベート。
洗浄は不要。染色後そのまま蛍光観察が可能。

注意事項

脂質滴の構造が保持されにくいためアルコール固定は非推奨。
透過処理（0.1% Triton® X-100）は脂質滴の形態が変化する可能性あり。

染色例

図1. 固定・透過処理したHeLa細胞の脂質滴と核の染色像。
脂質滴を LipidSpot™ 610（マゼンタ）、核を NucSpot® 470（緑）で染色。

図2, Oleic acid処理した HeLa 細胞の脂質滴、細胞膜、核の染色像。
0.5 µM オレイン酸-BSAを37°Cで 16 時間処理後、ホルムアルデヒド固定し、LipidSpot™ 488（緑：脂質滴）、CF®594 WGA（赤：細胞表面）、Hoechst 33258（青：核）で染色。

図3 脂肪滴染色試薬の比較
HeLa細胞に対し、無処理またはオレイン酸処理（脂質滴形成誘導）を行った。細胞は、LipidSpot 488またはNile Redを用いて生細胞染色、固定後にLipidTox Deep Red（Thermo Fisher）で染色した。

脂質滴染色試薬 LipidSpot™

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
LipidSpot^TM 488 Lipid Droplet Stain	BTI	70065-T	20 UL	￥24,000
LipidSpot^TM 488 Lipid Droplet Stain	BTI	70065	125 UL	￥129,000
LipidSpot^TM 610 Lipid Droplet Stain	BTI	70069-T	20 UL	￥23,000
LipidSpot^TM 610 Lipid Droplet Stain	BTI	70069	125 UL	￥125,000