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CRISPR-Cas9 sgRNA プラスミドや不安定なウイルス配列のクローニングに最適！ Lucigen社 Endura™ コンピテントセル

メーカー名：Lucigen Corporation.

Endura™ コンピテントセルは、不安定なDNA配列や組換えを起こしやすい配列のクローニングに最適なコンピテントセルです。レトロウイルス遺伝子、逆位を含む反復配列, CRISPR-Cas9 sgRNA プラスミド等のクローニングにご利用頂けます。本製品は、エレクトロコンピテントセルとケミカルコンピテントセルからお選び頂けます。

【有償サンプルについて】
新規購入の場合は、有償サンプルとして小カタログサイズを半額でご提供しています。

<ご提供条件>
· 新規にご購入であること
· メーカーアンケートにご回答していただける方
· 1研究室当たり1点まで

ご希望がございましたら弊社またはご利用代理店様までお問い合わせくださいませ。

背景

レトロウイルスDNA等に見られる不安定なインサート配列は、従来クローニングに用いられてきた大腸菌株では単離と増幅が困難でした。Lucigen（ルシジェン/LUC）社のEndura™ コンピテントセルは、逆位を含む反復配列（Inverted Repeats）などの不安定な配列や組換えを起こしやすい配列を含むプラスミドDNAを維持した安定的なクローニングが可能です。

特長

CRISPR/Cas9 sgRNA ライブラリー作製およびレンチウイルスベクターに最適
逆位を含む反復配列（Inverted Repeat）や不安定な配列のクローニングに有用
エレクトロコンピテントセルとケミカルコンピテントセルから選択可能
高い形質転換効率
- エレクトロコンピテントセル >1×10¹⁰cfu/µg (pUC19)
- ケミカルコンピテントセル >1×10⁷cfu/µg (pUC19)

FAQ

【01】 Endura™ コンピテントセルのアプリケーションにはどのようなものがありますか？

Endura™ コンピテントセルは、従来の大腸菌株では組換えを起こしやすい配列をクローニングする場合に有用です。

【02】 CRISPR/Cas9 sgRNA ライブラリーを作製する場合は、どの製品を使用すれば良いですか？

より形質転換効率の高いEndura™ エレクトロコンピテントセル（品番60242, >1×10¹⁰ cfu/µg）が適しています。

Endura™ と CRISPR-Cas9 ゲノム編集

Endura™ エレクトロコンピテントセルは、レンチウイルスベクターのクローニングおよび増殖に最適です。CRISPR（Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats）クローンのレンチウイルスライブラリー（GeCKO v2.0 plasmid libraries：下記文献参照）に推奨されています。

＜特長＞
■ GeCKO（Genome-scale CRISPR Knock-Out）ライブラリ構築のための高い形質転換効率
■ レンチウイルスCRISPRプロトコル推奨

図. GeCKOライブラリーの構築に使用されているEndura™ コンピテントセルの安定性。
レーン1/レーン2：別々のライブラリーを Endura™ コンピテントセル中で37℃の条件で調製した。
レーン3：ライブラリー1を Endura™ コンピテントセル中で32℃の条件で調製した。
組換えは37℃で顕著に表れている。

参考文献:
Science. 2014 Jan 3;343(6166):84-7. doi: 10.1126/science.1247005. Epub 2013 Dec 12. Genome-scale CRISPR-Cas9 knockout screening in human cells.［PMID:24336571］

Endura™ エレクトロコンピテントセル（ >1×10¹⁰cfu/µg）

Endura™ エレクトロコンピテントセルの包装形態はDUOのみの取扱となります。

<構成内容>

Endura™ エレクトロコンピテントセル
DUO: 50µL / 1バイアル（enough for two 25-µL reactions）
回復培地
Supercoiled pUC19 DNA（10pg/µl ）：ポジティブコントロール

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
Endura^TM ElectroCompetent Cells (DUOs)	LUC	60242-1	12 RXN	￥44,000
Endura^TM ElectroCompetent Cells (DUOs)	LUC	60242-2	24 RXN	￥77,000

遺伝子型

recA13 supE44 ara-14 galK2 lacY1 proA2 rpsL20(StrR) xyl-5 λ– leu mtl-1 F– mcrB mrr hsdS20(rB–, mB–)

Endura™ ケミカルコンピテントセル（ >1×10⁷cfu/µg）

Endura™ ケミカルコンピテントセルは、2種類の包装形態（DUOまたはSOLO）からお選び頂けます。
<構成内容>

Endura™ ケミカルコンピテントセル
DUO: 80 µL / 1バイアル（enough for two 40-µL reactions）
SOLO: 40 µL / 1バイアル（enough for one reaction）
回復培地
Supercoiled pUC19 DNA（10pg/µl ）：ポジティブコントロール

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
Endura^TM Chemically Competent Cells (DUOs)	LUC	60240-1	12 RXN	￥37,000
Endura^TM Chemically Competent Cells (DUOs)	LUC	60240-2	24 RXN	￥66,000
Endura^TM Chemically Competent Cells (SOLOs)	LUC	60241-1	12 RXN	￥41,000
Endura^TM Chemically Competent Cells (SOLOs)	LUC	60241-2	24 RXN [2 x 12 RXN]	お問い合わせ

<関連商品>回復培地

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
Recovery Medium	LUC	80026-1	8*12 ML	￥27,000

商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

※ 表示価格について

「Lucigen社 Endura™ コンピテントセル」は、下記のカテゴリーに属しています。

CRISPR-Cas9 sgRNA プラスミドや不安定なウイルス配列のクローニングに最適！ Lucigen社 Endura™ コンピテントセル

背景

特長

FAQ

【01】 Endura™ コンピテントセルのアプリケーションにはどのようなものがありますか？

【02】 CRISPR/Cas9 sgRNA ライブラリーを作製する場合は、どの製品を使用すれば良いですか？