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血球分離をシンプルかつ短時間で！ MONO-POLY® RESOLVING MEDIUM

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メーカー名：MP Biomedicals, LLC

Mono-Poly™ Resolving Medium（M-PRM, Polysucrose 400）は、密度勾配を利用して、抗凝固処理されたヒト全血から単核白血球と多核白血球を1ステップで2層に分離可能です。M-PRMは非常に汎用性が高く、組織適合性試験、リンパ球研究、in vitro 細胞性免疫アッセイ、または純粋な白血球調製を必要とする任意の手順などの様々な研究および臨床用途に使用することができます。

特長

単核球と多形核白血球を2つの異なる層で分離
95％以上の細胞生存率
1ステップの簡単な手順
希釈なしで使用でき、赤血球の溶解が不要

仕様

形状：滅菌済み溶液
組成：多糖類(Ficoll 400)とX線不透過造影剤(Hypaque)の混合溶液
密度：1.114± 0.002 g/mL
保存条件：暗所で、室温（15～30℃）

※ Mono-Poly™ Resolving Mediumは使用前によく混和してからお使いください。

プロトコール

Mono-Poly™ Resolving Medium（M-PRM） 3mLを滅菌済みの13 x 100 mmテストチューブに移します。
抗凝固剤^*1で処理した新鮮なヒト血液^*23.5mLをM-PRM層の上に注意深く重層します。
室温（15～30℃）、スイングローターで300 x g、30分間遠心分離^*3します。
遠心分離後、赤血球が沈殿し、その上層にM-PRM層、多核白血球層、M-PRM層、単核白血球層、血漿層が形成されます。
最上層の血漿を抜き取り、単核白血球層を界面で乱さずに残します。清潔なパスツールピペットを使用して単核白血球層と多核白血球層を個別のチューブに移します。
細胞を平衡塩類溶液または培養培地で洗浄し、室温で250 x g、10分間遠心分離します。
遠心分離後、上清を除去し、使用する目的に適した培地に再懸濁します。

*1 抗凝固剤として、ヘパリン、EDTA、クエン酸塩、クエン酸デキストロース（ACD）、クエン酸リン酸デキストロース（CPD）が使用できます(MPB社ではEDTAを推奨いたします）。
*2 血液は採取後6時間以内のものを推奨いたします。
*3 一部の血液サンプルでは、800 x gで45分間遠心するとより良好な分離が得られます。

参考文献

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Davis et al. Resistance to Mucosal Lysozyme Compensates for the Fitness Deficit of Peptidoglycan Modifications by Streptococcus pneumoniae. Public Library Of Science Pathogens 20084, NA
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