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NFκB p65 (Total/Phospho) ELISA kit

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メーカー名：Enzo Life Sciences,Inc.

本商品は、独自メカニズムを採用した、活性型NFκB p65 (Ser65) もしくはトータル NFκB を別々に検出できる高感度ELISAキットです。

背景

古典的NFκB経路が刺激されると、IκBのリン酸化とそれに続く分解が誘導されます。リン酸化は、IKKαやIKKβを含むIκキナーゼ（IKK）と呼ばれる特異的なタンパク質セットにより制御されています。正常な条件下では、IκB は p65 または Rel Aを細胞室内に隔離するという重要な制御分子として働き、これにより NFκB依存性転写が遮断されます。IKKにより IκBがリン酸化されると、p65 が遊離し、p50サブユニットと自由に結合します。p50 は DNA結合活性を保持し、p65はトランス活性化因子として作用しています。この複合体形成によりNFκB複合体が核へ移行し、これに伴ったNFκB依存性遺伝子の上方制御が誘導されます。炎症、感染、がんといった数々のヒト病理条件において、このシグナル伝達ネクサスが破壊されることが報告されています。

特長

迅速：活性化型NFκB p65をわずか～1.5時間で迅速に検出
ハイスループット：EMSAやウェスタンブロットより迅速な96ウェルプレートベースの手法
測定方法：比色法 (HRP)
交差種：ヒト、マウス、ラット
検出波長：450 nm

構成内容

96ウェルマイクロプレート
細胞溶解バッファー (5X)
洗浄バッファー (10X)
リン酸化 NFkB p65 (Ser536) キャプチャー抗体
リン酸化 NFkB p65 (Ser536) 検出抗体
NFkB p65 (Total) キャプチャー抗体
NFkB p65 (Total) 検出抗体
エンハンサー溶液
TMB基質
停止溶液
ポジティブコントロール (HeLa細胞ライセート)
プレートシーラー

アッセイ原理

本キットはサンドイッチELISAフォーマットをベースに独自メカニズムを取り入れた、従来よりも柔軟かつ使いやすく、アッセイ時間を短縮したキットです。従来のようなキャプチャー抗体が固相されたプレート上に対象物を補足するのではなく、溶液中でキャプチャー抗体及び検出抗体が対象物に結合し、その後、独自メカニズムによりプレートに固相され、検出します。