全血から高品質のDNAを迅速に抽出可 血液ゲノムDNA抽出キット

ノルジェン（Norgen）社の血液ゲノムDNA抽出キットは、全血からゲノムDNAの抽出を行うキットです。

DNAの精製はスピンカラムのクロマトグラフィーにより行います。このカラムは至適な塩条件下でDNAを吸着させ、低塩の弱アルカリ条件でDNAを溶出させます。精製されたDNAにはRNAのコンタミがなく高品質であるため、PCR、qPCR、ジェノタイピングなど、あらゆる下流アプリケーションに用いることが可能です。またこのキットは、ヒト以外にも様々な種の動物血液中からゲノムDNAを精製することができます。DNAの回収率に関しては、血液サンプル中の細胞密度により変化します。

• 迅速で簡単なスピンカラムによる精製 
• 幅広いサンプル量（20µL〜10mL）に対応
  （仕様から目的のサンプル量にあった品番をお選びください）
• 高いコストパフォーマンス 
• DNA精製時にフェノール不要 
• RNAのコンタミなし 
• PCR、qPCR、シークエンシング、サザンブロットにそのまま使用可能

• 溶解溶液 
• Proteinase K 
• 洗浄液（Solution WN, Wash Solution A）
• 溶出バッファー 
• スピンカラム 
• コレクションチューブ 
• 溶出チューブ 
• 説明書

図1： 異なる抗凝固剤（クエン酸塩、EDTA、ヘパリン）で採取した血液から単離したDNAを用いた、Taqman® qPCR反応におけるCt値の比較
GAPDHプライマーを用いた20 µLのqPCR反応に、それぞれの溶液を3 µLおよび9 µL使用し検証した。いずれの抗凝固剤においてもCt値は同等であり、各抗凝固剤によって得られたDNAは同等の収量および品質を示した。

図2： 異なる全血インプット容量から単離したDNA収量の比較
Norgen社の本Miniキットと競合他社のキットを用いて、20、50、100、200µLの全血からDNAを分離した。分離後、200µLの溶出液からそれぞれ15µLを1% TAEアガロースゲルにロードした。Norgen社の本Miniキットは、競合他社のキットよりも優れたDNA収量を示した。最左端のレーンはNorgen社のUltraRanger 1kb DNA Ladderを示す。

図3： Norgen社と競合他社のキットを用いた、リアルタイム PCR (TaqMan) 反応における増幅反応の比較
Norgen社の本Miniキット（青）と競合他社のキット（赤）を用いて、20、50、100、200 µLのヒト全血からDNA を分離した。各200 µLの溶出液から9 µLのDNAを、GAPDH TaqManプローブとプライマーを用いたリアルタイムPCR(総反応容量 20 µL) に使用した。 リアルタイムPCRではGAPDH遺伝子の増幅に成功し、血液のインプット量が増加するにつれてCt値が直線的に低下したことから、抽出されたDNAは高品質であり、感度の高い下流アプリケーションにも適していることが示唆された。 さらに、Norgen社のキットで抽出したDNAは、すべての血液インプット条件において、他社のキットよりも低いCt値で増幅された。以上より、Norgen社キットを用いて分離された DNA の収量と純度が高いことが示された。

*収量は処理する血液の種類によって異なります。

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