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死細胞、固定細胞の核染色に NucSpot® 細胞膜非透過性核染色試薬

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メーカー名：Biotium, Inc.

NucSpot(R) 核染色試薬

NucSpot® 核染色試薬は、細胞膜非透過性で、死細胞や透過処理した固定細胞の核を特異的に染色します。Biotium社では、緑色から近赤外までのさまざまな色のNucSpot® 核染色試薬を取り揃えています。

NucSpot® 核染色試薬は、DNA に結合するまでは最小限の蛍光を発するため、洗浄不要の核染色に使用できます。ヨウ化プロピジウム (PI)等の色素や核と細胞質の両方を染色する類似の色素など他の核染色色素とは異なり、RNase 処理を必要とせずに、固定および透過処理された細胞の核を選択的に染色します。また、フローサイトメトリー（FC：Flow Cytometry）または蛍光イメージングにおいて、未固定細胞培養中の死細胞の選択的染色にも使用できます。いくつかの色素は、数日間のイメージングのために細胞と継続的にインキュベートできます。

特長

固定細胞の核特異的対比染色
培養中の死細胞を選択的に染色
洗浄不要
幅広い検出チャネルに対応した商品ラインアップ
FC解析による固定/透過処理細胞の細胞周期プロファイリングが可能 (NucSpot®470, Far-Red)
長期の細胞イメージングが可能　(24 ～ 72 時間) [NucSpot®500/515, 568/580, 594/615,750/780]

仕様
プローブターゲット	核
染色細胞(生細胞or固定細胞)	固定細胞
アッセイの種類/オプション	フローサイトメトリーによる DNA 含有量/細胞周期プロファイリング、生死判別、長期染色 (24 ～ 72 時間)、非洗浄染色、リアルタイムイメージング、組織染色
検出方法	蛍光顕微鏡、フローサイトメトリー
細胞透過性	膜不透過性
アポトーシス/生存率マーカー	死細胞染色
固定オプション	染色前に透過処理、染色前に固定（メタノール、ホルムアルデヒド）
色	緑、オレンジ、赤、遠赤、近赤外

商品ラインアップ

品名	品番	Ex/Em	Detection Channel	個別の特性
NucSpot® 470	40083	461/547 nm	FITC	励起最大値が約 460 nmであるため青色LEDでも観察可能透過処理した酵母、グラム陰性菌の死細胞も染色可能（グラム陽性菌では生細胞を染色する場合がある） FC解析による固定/透過処理細胞の細胞周期プロファイリングが可能
NucSpot® 500/515	41040	497/513 nm	FITC*	長期の細胞イメージングが可能　(24 ～ 72 時間)
NucSpot® 555/570	41033	559/566 nm	Cy®3 or PE*	-
NucSpot® 568/580	41036	572/583 nm	Cy®3 or PE*	長期の細胞イメージングが可能　(24 ～ 72 時間)
NucSpot® 594/615	41037	603/613 nm	Texas Red® or PE-Texas Red®*	長期の細胞イメージングが可能　(24 ～ 72 時間)
NucSpot® 650/665	41034	653/671 nm	Cy®5 or APC*	-
NucSpot® Far-Red	40085	597/667 nm	PE-Cy®5 or APC**	7-AADに比べ、PE-Texas Red® channelへの蛍光の漏れ込みが少ない FC解析による固定/透過処理細胞の細胞周期プロファイリングが可能
NucSpot® 680/700	41035	683/707 nm	Cy®5.5*	-
NucSpot® 750/780	41038	757/780 nm	Cy®7 or APC-Cy®7*	長期の細胞イメージングが可能　(24 ～ 72 時間)

* より低い波長の検出チャンネルでクロストークが発生する可能性があります。他のプローブと組み合わせる前に、単一染色コントロールを実行してください。

** NucSpot® Far-Red はフローサイトメトリー用に設計されており、蛍光顕微鏡には推奨されていません。

商品データ

用途に適した色素がきっと見つかる

図1. NucSpot® 核染色試薬で核染色したHela細胞の画像
PFA 固定および Triton® X-100 透過処理 HeLa 細胞を、PBS 中の NucSpot® 核染色試薬で染色し、洗浄ステップなしで共焦点顕微鏡で画像化した。 NucSpot® 750/780 を除き、すべての染色液を 1X 濃度で使用した。NucSpot® 750/780 は、640 nm 励起を使用して画像化するために 5X 濃度で使用した。

培養中の死細胞を染色

図2. NucSpot® 核染色試薬を使用したフローサイトメトリーによる生死細胞の識別
未処理の Jurkat 細胞と熱死滅させた Jurkat 細胞の混合物を各 NucSpot® Nuclear Stain で染色し、フローサイトメーター(BD CytoFLEX)にて分析した。実線のピークは染色された細胞を表す。白抜きの灰色のピークは染色されていない細胞を表す。
使用した各色素の濃度
1X NucSpot® 470、0.1X NucSpot® 500/515、0.5X NucSpot® 555/565、1X NucSpot® 568/580; 0.5X NucSpot® 594/615、0.05X NucSpot® 650/665、0.2X NucSpot® 680/700、0.5X NucSpot® 750/780

優れた光安定性

NucSpot® 核染色剤は、一般的に使用されているシアニンベースの核染色剤よりも光安定性が向上しています。下の図は、NucSpot® 650/665 がThiazole Red Homodimer (TRhD) よりも大幅に光安定性が高いことを示しています。

図3.Thiazole Red Homodimerと比較したNucSpot® 650/665の光安定性
PFA 固定および透過処理された HeLa 細胞を1X NucSpot® 650/665 または 200 nM Thiazole Red Homodimer (TRhD)で染色した。 Cy®5 フィルターセットを介した落射蛍光顕微鏡法により細胞を 120 秒間連続的に画像化し、10 秒ごとに画像を取得した。各画像の時間 0 に正規化された平均蛍光が右側にプロットされている。 NucSpot® 650/665 蛍光はよく保存されていたが、TRhDの蛍光は急速に光退色した。さらに、NucSpot® 650/665 は細胞核を特異的に染色したが、RNase 前処理がない場合、TRhD は細胞質と核の両方を染色した。

※CYはCytiva社の登録商標です。

NucSpot® 470

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
NucSpot^(R) 470, 1000X in DMSO	BTI	40083	200 UL	￥89,000
NucSpot^(R) 470, 1000X in DMSO	BTI	40083-T	20 UL	￥15,000

NucSpot® 500

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
NucSpot^(R) 500/515, 1000X in DMSO	BTI	41040	100 UL	￥102,000
NucSpot^(R) 500/515, 1000X in DMSO (trial size)	BTI	41040-T	20 UL	￥23,000

NucSpot® 555

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
NucSpot^(R) 555/570, 1000X in DMSO	BTI	41033	100 UL	￥102,000
NucSpot^(R) 555/570, 1000X in DMSO (trial size)	BTI	41033-T	20 UL	￥23,000

NucSpot® 568

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
NucSpot^(R) 568/580, 1000X in DMSO	BTI	41036	100 UL	￥102,000
NucSpot^(R) 568/580, 1000X in DMSO (trial size)	BTI	41036-T	20 UL	￥23,000

NucSpot® 594

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
NucSpot^(R) 594/615, 1000X in DMSO	BTI	41037	100 UL	￥102,000
NucSpot^(R) 594/615, 1000X in DMSO (trial size)	BTI	41037-T	20 UL	￥23,000

NucSpot® 650

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
NucSpot^(R) 650/665, 1000X in DMSO	BTI	41034	100 UL	￥102,000
NucSpot^(R) 650/665, 1000X in DMSO (trial size)	BTI	41034-T	20 UL	￥23,000

NucSpot® Far-Red

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
NucSpot^(R) Far-Red, 1000X in DMSO	BTI	40085	0.5 ML	￥137,000
NucSpot^(R) Far-Red, 1000X in DMSO	BTI	40085-T	50 UL	￥21,000

NucSpot® 680

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
NucSpot^(R) 680/700, 1000X in DMSO	BTI	41035	100 UL	￥115,000
NucSpot^(R) 680/700, 1000X in DMSO (trial size)	BTI	41035-T	20 UL	￥26,000

NucSpot® 750

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
NucSpot^(R) 750/780, 1000X in DMSO	BTI	41038	100 UL	￥115,000
NucSpot^(R) 750/780, 1000X in DMSO (trial size)	BTI	41038-T	20 UL	￥26,000

死細胞、固定細胞の核染色に NucSpot® 細胞膜非透過性核染色試薬

特長

商品ラインアップ