記事ID ： 35077

ご自身でPDEアッセイを構築する際に有用 Phosphodiesterase (PDE) Assay

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メーカー名：AAT Bioquest, Inc. (Former ABD Bioquest, Inc.)

ホスホジエステラーゼ (PDE) は、環状ヌクレオチドであるcAMPやcGMPといったセカンドメッセンジャー分子を分解する酵素群です。PDEはセカンドメッセンジャー分子が介在するシグナル伝達の重要な制御因子です。FAM-cAMP PDE IV (品番13602) および TAMRA-cAMP PDE IV (品番13603) 基質はPDE IV活性の分析に使用でき、FAM-cGMP PDE V (品番13604) および TAMRA cGMP PDE V (品番13605) 基質はPDE V活性の分析に使用できます。これらの基質はFRETアッセイやFPアッセイにおいて抗cAMP/cGMP抗体と組み合わせて使用できます。

特長

FAM (Green fluorescence)：Ex / Em =493 / 517 nm
TAMRA (Red fluorescence)：Ex / Em =552 / 578 nm

サンプルプロトコール　(#13602)

0.5 µmoLのFAM-cAMP PDE IV基質に500 µLのDMSOを加えて1 mMの基質ストック溶液を調製する。
1mM の基質ストック溶液をPDE緩衝液（例: 10 mM Tris-HCl, pH 7.4, 10 mM Mg Cl2, 1 mM MnCl2）で希釈し、2X基質アッセイ溶液（濃度目安：200～400 nM）を調製する。※アッセイに必要な量だけを調製ください。
同量のPDE IVスタンダードまたはサンプルを2X基質アッセイ溶液と混合し、室温で少なくとも1時間インキュベートする。
Ex / Em = 490 / 525 nmでの蛍光偏光をモニターする。

商品リスト

Phosphodiesterase (PDE) Assay

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
FAM-cAMP PDE IV substrate Green Fluorescence	ABD	13602	0.5 UMOL	￥72,000
FAM-cGMP PDE V substrate Green Fluorescence	ABD	13604	0.5 UMOL	￥72,000
TAMRA-cAMP PDE IV substrate Red Fluorescence	ABD	13603	0.5 UMOL	￥72,000
TAMRA-cGMP PDE V substrate Red Fluorescence	ABD	13605	0.5 UMOL	￥72,000