記事ID ： 45345

選択用抗生物質：エンドトキシン試験済み滅菌試薬
Puromycin

メーカー名：InvivoGen

Puromycinは、Streptomyces albonigerによって産生されるアミノヌクレオシド系抗生物質です。原核生物と真核生物の両方のリボソーム上のペプチジル転移を特異的に阻害します。この抗生物質は、グラム陽性菌やさまざまな動物細胞や昆虫細胞の増殖を阻害します。

Puromycinは、特定の条件下で大腸菌形質転換体の選択に使用することもできます。ピューロマイシンに対する耐性は、ピューロマイシンN-アセチルトランスフェラーゼをコードするpac遺伝子によって与えられます¹。

通常、動物細胞は1～10μg/mlの濃度で感受性があります。

仕様

濃度	10 mg/mL
CAS RN 番号	58-58-2
品質管理	各ロット、ロット間差がないことを確認するために徹底的に試験
純度	≥ 98% (HPLC)
エンドトキシンレベル	< 5 EU/mg
物理化学的特性	pH、外観
細胞培養試験	puromycin感受性およびpuromycin耐性の哺乳類細胞株で有効性を評価
微量汚染物質の非細胞毒性	puromycin耐性細胞で長期的に影響がないことを確認
組成式	C₂₂H₂₂₉N₇O₅・2HCl
分子量	544.3
構造式

哺乳類細胞株に対するPuromycinのワーキング濃度は1～10μg/mlの範囲です。はじめの実験では、宿主細胞株を死滅させるのに必要な抗生物質の最適濃度を決定することをおすすめします。

Puromycinは、pac遺伝子をもたない真核細胞を速やかに死滅させます。死滅させた細胞はプレートから剥がれるため、形質転換体クローンを容易かつ早期に同定することができます。

一部の哺乳動物細胞での選択に推奨される作業条件を以下に示します。

細胞	培地	濃度	文献情報
B16 (Mouse melanocytes)	RPMI	1-2 μg/ml	1,2
HEK293 (Human embryonic kidney cells)	DMEM	0.5-10 μg/ml	3,4,5
HeLa (Human uterine cells)	DMEM	1-10 μg/ml	5,6
MEF (Mouse fibroblasts)	DMEM	1-5 μg/ml	5

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
Puromycin (solution)	ING	ANT-PR-1	100 MG [10 x 1 ml]	￥26,000
Puromycin (solution)	ING	ANT-PR-5	500 MG [50 x 1 ml]	￥117,000
Puromycin (solution)	ING	ANT-PR-5B	500 MG [1 x 50 ml]	￥80,000

Lacalle R. et al., 1989. Molecular analysis of the pac gene encoding a puromycin N-acetyl transferase from Streptomyces alboniger. Gene. 79:375-80.

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2023 DNA Repair (Amst). DOI: 10.1016/j.dnarep.2023.103566 Live cell transcription-coupled nucleotide excision repair dynamics revisited. Llerena Schiffmacher D.A. et al.