記事ID ： 45281

引用文献多数! 光合成研究用抗体 RbcL抗体 (Rubisco large subunit, form I)

研究分野から探す > 植物科学 > 植物タンパク質の抽出・検出

メーカー名：Agrisera AB

Agrisera社では、さまざまな植物にて交差性を確認済みのRbcL抗体を提供しています。本抗体と Rubisco タンパク質スタンダード(Agrisera社)の使用は、植物および藻類サンプル中のRubisco(ルビスコ)定量に適しています。

背景

Rubisco(Ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenase) は、光合成生物における CO₂ 固定の律速段階を触媒します。これは、紫色細菌から開花植物まで明らかに相同であり、それぞれ 8 コピー存在する 2 つのタンパク質サブユニットで構成されています。植物および緑藻類では、大サブユニット (約 55 kDa) は葉緑体 rbcL 遺伝子によってコードされ、小サブユニット (15 kDa) は核 rbcS 遺伝子ファミリーによってコードされます。

特長

仕様
品番	AS03 037
免疫動物	Rabbit
Clonality	Polyclonal
免疫原	KLH 結合合成ペプチド。すべての既知の植物、藻類およびシアノバクテリアにわたって保存されている RbcL タンパク質配列 (form I L8S8 and form II L2) Arabidopsis thaliana O03042, Hordeum vulgare P05698, Oryza sativa P0C510, Chlamydomonas reinhardtii P00877, Synechococcus PCC 7920 A5CKC5を含む
適用	Immunofluorescence/confocal Immunolocalization (IL) (IF), Immunogold (IG), Tissue Printing (TP), Western blot (WB) Immunofluorescence/confocal microscopy (IF), 1: 1000 (IG), 1: 250 (推奨プロトコル等についてはお問い合わせください。) 1: 800 (TP), 1: 5000 - 10 000 (WB) ＊免疫沈降での使用には適していません。
分子量 (予想 \|見かけ)	52.7 kDa (Arabidopsis thaliana), 52.5 kDa (cyanobacteria), 52.3 (Chlamydomonas reinhardtii)
交差性 (確認済み)	Agostis stolonifera cv. Penncross, Arabidopsis thaliana, Apium graveolens, Artemisia annua, Atrichum undulatum, Attheya longicornis, Baculogypsina sphaerulata (benthic foraminifer), Beta vulgaris, Begonia sp., Bienertia sinuspersici, Brassica napus, Kandelia candel, Cannabis sativa L., Chaetoceros furcellatus, Chlorococcum dorsiventrale, Colobanthus quitensis, Cicer arietinum, Chenopodium quinoa, Chlamydomonas raudensis, Chlamydomonas reinhardtii, Colobanthus quitensis Kunt Bartl, Chlorella sorokiniana, Chlorella vulgaris, Coscinodiscus concinnus, Cyanophora paradoxa, Cylindrospermopsis raciborskii CS-505, Cynara cardunculus, Emiliana huxleyi, Euglena gracilis, Ficus carica, Fortunella margarita Swingle, Fraxinus mandshurica, Fucus vesiculosus, Gladieria sulphuraria, Glycine max, Gonyaulax polyedra, Guzmania hybrid, Heterosigma akashiwo, Hevea, Hordeum vulgare, Hypnum cupressiforme, Jatropha curcas, Karenia brevis (C.C.Davis) s) G.Hansen & Ø.Moestrup (Wilson isolate), Kochia prostrata, Lathyrus sativus, Liquidambar formosana, Malus domestica, Medicago truncatula, Micromonas pusila, Nicotiana benthamiana, Nicotiana tabacum, Panicum virgatum, Petunia hybrida cv. Mitchell, Phaeodactylum tricornutum, Physcomitrium patens, Pisum sativum, olytrichum formosum, Porosira glacialis,, Porphyra sp., Ricinus communis, Robinia pseudoacacia, Rhytidiadelphus squarrosus, Saccharum sp., Schima superba, Skeletonema costatum (diatom), Skeletonema marinoi (diatom), Solanum lycopersicum, Spinacia oleracea, lichens, Stanleya pinnata, Symbiodinium sp., Synechococcus PCC 7942, Synechococcus elongatus UTEX 2973, Rhoeo discolor, Thalassiosira pseudonana, Thermosynechococcus elongatus, Triticum aestivum, Prochlorococcus sp. (surface and deep water ecotype), Triticum aestivum, dinoflagellate endosymbionts (genus Symbiodinium), extreme acidophilic verrucomicrobial methanotroph Methylacidiphilum fumariolicum strain SolV, Thalassiosira punctigera, Tisochrysis lutea, Verbascum lychnitis, Vitis vinifera, Quercus ilex Chlorococcum dorsiventrale
交差性 (予想)	Alpha proteobacteria, Algae (brown and red) including Galdieria sulphuraria, Dicots, Benincasa hispida, Kalanchoe fedtschenkoi; Beta-proteobacteria, Conifers, Cryptomonads, Cyanobacteria (prochlorophytes), Gamma-proeobacteria, Liverworts, Manihot esculenta, Monocots, Mosses, Suaeda glauca, Welwitschia; Nannochloropsis sp., Picochlorum sp., Zosteria marina Rhodospirillaceaeでの検出には品番： AS15 2955をご使用ください。
非交差性	現在のところ、予測された反応性からの例外は確認されていません。

商品データ

図1. さまざまな植物から抽出した葉緑素サンプルにおけるRbcLの検出(WB)
Spinacia oleracea (1), Synechococcus PCC 7942 (2), Cyanophora paradoxa (3), Heterosigma akashiwo (4), Thalassiosira pseudonana (5),
Euglena gracilis (6), Micromonas pusilla (7), Chlamydomonas reinhardtii (8), Porphyra sp (9), Gonyaulax polyedra (10), Emiliania huxleyi (11) , 0.25 µg /lane

各植物サンプルはPEB (protein extraction buffer, 品番：AS08 300) で抽出し、70℃で10分間変性後、NuPage (Invitrogen社) LDS-PAGEにアプライし、ニトロセルロース膜に転写した。

ブロッキング：2% low-fat milk powder in TBS-T (0.1% TWEEN 20)、1時間
1次抗体：抗RbcL抗体 (品番：AS03 037、1:50,000、1 時間)
2次抗体：抗ウサギ二次抗体HRP標識 (推奨二次抗体品番：AS09 602、1:20,000、1 時間)

図2.葉緑素サンプルにおけるRbcLの検出(WB)
Cryptophyte 由来の葉緑素サンプル, 1 µg (1,2)
Arabidopsis thaliana 由来の葉緑素サンプル, 1 µg (3), 10 µg (4)

サンプル抽出液にて調製後、70℃で10分間変性後、PAGEゲルにアプライし、PVDF膜に転写後した。

ブロッキング： 2% Amersham ECL Blocking Agent, 1h
1次抗体：抗RbcL抗体 (品番：AS03 037、1:10,000, 1.5h)
2次抗体：抗ウサギIgG抗体DyLight® 550(品番：AS11 1782, 1:2000, 1h)

ご提供者：Ma?gorzata Wessels博士, (Agrisera）

図3. WB検出によるRbcL定量
さまざまな植物抽出物 (1 ～ 5) からの総タンパク質 2 µg をPEB (protein extraction buffer, 品番：AS08 300)で抽出し、4 ～12% NuPage LDS-PAGE(Invitrogen社) で分離し、PVDF膜に転写した。
マーカー MagicMarks (Invitrogen社) (M)
Rubisco タンパク質スタンダード (品番：AS01 017S): 0.0625 pmol, 0.125 pmol, 0.25 pmol/lane

標準的なWB手順に従って、この画像は CCD イメージャー (FluorSMax、Bio-Rad) および Quantity One ソフトウェア (Bio-Rad) を使用し取得された。ソフトウェアの等高線ツールを定量領域に使用し、値からバックグラウンドを差し引いて、各標準およびサンプルのカウントで調整された体積が得られる。

[注:最適な定量は、ターゲットタンパク質の量に応じて、ゲルレーンあたり中程度のサンプルロード (一般に総タンパク質量 0.5 ～ 2.5µg) を使用して得られます。]

RbcL抗体 ( Rubisco large subunit, form I)

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
Anti RbcL, Arabidopsis thaliana (Rabbit) Unlabeled	AGR	AS03 037	50 UL	￥104,000
Anti RbcL, Plant (Rabbit)	AGR	AS03 037	2*50 UL	￥155,000
Anti RbcL, Arabidopsis thaliana (Rabbit)	AGR	AS03 037	3*50 UL	￥211,000
Anti RbcL, Arabidopsis thaliana (Rabbit)	AGR	AS03 037A	50 UG	￥104,000
Anti RbcL, Arabidopsis thaliana (Rabbit)	AGR	AS03 037A	2*50 UG	￥155,000
Anti RbcL, Arabidopsis thaliana (Rabbit)	AGR	AS03 037A	3*50 UG	￥211,000
Anti RbcL, Arabidopsis thaliana (Rabbit) Horseradish Peroxidase	AGR	AS03 037-HRP	40 UG	￥159,000
Anti RbcL, Arabidopsis thaliana (Rabbit) Biotin	AGR	AS03 037B	40 UG	￥159,000
Anti RbcL, Arabidopsis thaliana (Rabbit) Alkaline Phosphatase	AGR	AS03 037-ALP	40 UG	￥159,000

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
Anti RbcL II (Rabbit)	AGR	AS15 2955	50 UL	￥104,000
Anti RbcL II (Rabbit)	AGR	AS15 2955	2*50 UL	￥155,000
Anti RbcL II (Rabbit)	AGR	AS15 2955	3*50 UL	￥211,000

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
RbcL (Rubisco), Plant, Unlabeled	AGR	AS01 017S	100 UL	￥67,000
Protein extraction buffer (PEB), 4x	AGR	AS08 300	5*2 ML	￥39,000
Anti IgG (H&L), Rabbit (Goat) Horseradish Peroxidase	AGR	AS09 602	1 MG	￥70,000
Anti IgG (H&L), trial sample, Rabbit (Goat) Horseradish Peroxidase	AGR	AS09 602-TRIAL	10 UL	￥8,000

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
Rubisco quantitation kit	AGR	AS09 409SET	1 SET	￥215,000
Rubisco ELISA quantitation kit, Plant	AGR	AS15 2994	1 KIT	￥331,000

製品使用文献(一部)

Chen et al. (2023) Producing fast and active Rubisco in tobacco to enhance photosynthesis. Plant Cell. 2023;35(2):795-807. doi:10.1093/plcell/koac348
Garcia et al. (2023) Effects of RuBisCO and CO2 concentration on cyanobacterial growth and carbon isotope fractionation [published online ahead of print, 2023 Jan 5]. Geobiology. 2023;10.1111/gbi.12543. doi:10.1111/gbi.12543
Minagawa, Dann. (2023) Extracellular CahB1 from Sodaline magerasimenkoae IPPAS B-353 Acts as a Functional Carboxysomal beta-Carbonic Anhydrase in Synechocystis sp. PCC6803. Plants (Basel). 2023;12(2):265. Published 2023 Jan 6. doi:10.3390/plants12020265
Vidal-Meireles, et al. (2023)The lifetime of the oxygen-evolving complex subunit PSBO depends on light intensity and carbon availability in Chlamydomonas. Plant Cell Environ. 2023;46(2):422-439. doi:10.1111/pce.14488
Capo-Bauca et al. (2023). Carbon assimilation in upper subtidal macroalgae is determined by an inverse correlation between Rubisco carboxylation efficiency and CO2 concentrating mechanism effectiveness. New Phytol. 2023;237(6):2027-2038. doi:10.1111/nph.18623