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記事ID : 44573
研究用

使用文献多数!ネクロプトーシス(ネクロトーシス)研究に。 RIP3(RIPK3) 抗体

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背景

ASK1、RIP、DAP、ZIP キナーゼなどの特定のセリン/スレオニン プロテイン キナーゼは、アポトーシスのメディエーターです。RIP および RIP2/RICK を含む受容体相互作用タンパク質は、デスレセプター(death receptor)ファミリーの 2 つのプロトタイプメンバーである TNFR1 および Fas によって誘導されるアポトーシスを媒介します。最近、RIP キナーゼファミリーの新規メンバーが同定され、RIP3 と命名されました。RIP3 には N 末端キナーゼ ドメインが含まれていますが、RIP や RIP2 とは異なり、C 末端デスドメインまたは CARD ドメインがありません。RIP3 は RIP および TNFR1 に結合し、TNFR1 誘導性のアポトーシスを媒介し、RIP および TNFR1 誘導性の NF-κB 活性化を減弱します。また、RIP3 の過剰発現はアポトーシスと NF-κB 活性化を誘導します。RIP3 のmRNA は、成人組織の一部で発現しています。

特長

品番 2283
免疫動物 ウサギポリクローナル
交差種 ヒト、マウス、ラット
免疫原 Anti-RIP3 antibody (2283) was raised against a peptide corresponding to 14 amino acids near the carboxy terminus of murine RIP3. The immunogen is located within the last 50 amino acids of RIP3.
標識 非標識
アプリケーション ELISA, IF, IHC-P, IP, WB
推奨コントロール 品番:1202 - A431 Cell Lysate
品番:1282 - 3T3/NIH Cell Lysate
品番:1285 - C2C12 Cell Lysate
品番:1212 - 3T3/Balb Cell Lysate
PREDICTED MOLECULAR WEIGHT
Predicted: 53kD for mouse RIP3 and 57kD for human RIP3
Observed: 53kD for mouse RIP3 and 57kD for human RIP3
精製 immunoaffinity chromatography purified IgG
バッファー PBS containing 0.02% sodium azide
NCBI OFFICIAL SYMBOL Ripk3
別名 Rip3, AW107945, 2610528K09Rik, Rip3, RIP-like protein kinase 3, RIP-3
Protein Accession Number AAF03133
NCBI GENE ID NUMBER 56532

商品データ

PSC_2283_RIP3Ab_WB_fig1.gif
図1. ヒト細胞株におけるRIP3抗体の検証(WB)
サンプル:ヒト細胞ライセート(15µg/lane)
0.5 µg/mLのRIP3抗体(品番:2283)を用い、5% NFDM/TBST 中で1 時間インキュベートし(室温)、二次抗体: ヤギ抗ウサギ IgG HRP標識(1:10000希釈)で検出した。

PSC_2283_RIP3Ab_WB_fig2.gif
図2. マウスC2C12細胞におけるRIP3抗体の検証(WB)
サンプル:マウスC2C12細胞ライセート(15µg/lane)
RIP3抗体(品番:2283)を用い、5% NFDM/TBST 中で1 時間インキュベートし(室温)、二次抗体: ヤギ抗ウサギ IgG HRP標識(1:10000希釈)で検出した。
レーン1: 品番:2283(抗体濃度0.1 µg/mL+ブロッキングペプチド)
レーン2: 品番:2283(抗体濃度0.1 µg/mL)
レーン3: 品番:2283(抗体濃度0.2 µg/mL)
レーン4: 品番:2283(抗体濃度0.5 µg/mL)

 

 

PSC_2283_RIP3Ab_WB_fig3.gif
図3. マウス細胞株におけるRIP3抗体の検証(WB)
サンプル:マウス細胞ライセート(15µg/lane)
0.5 µg/mLのRIP3抗体(品番:2283)を用い、5% NFDM/TBST 中で1 時間インキュベートし(室温)、二次抗体: ヤギ抗ウサギ IgG HRP標識(1:10000希釈)で検出した。

PSC_2283_RIP3Ab_IHC_fig4.jpg
図4. マウス腎臓組織におけるRIP3抗体の検証(IHC)
2.5 µg/mLのRIP3抗体(品番:2283)を用い、パラフィン包埋マウス腎臓組織におけるIHC分析を行った。 組織をホルムアルデヒドで固定し、10% 血清で 1 時間ブロックした(室温)。 抗原の賦活化は、クエン酸バッファー(pH6)を用いた熱処理によって行われた。 サンプルを一次抗体とともに 4℃で一晩インキュベートし、 1/250 のヤギ抗ウサギ IgG H&L (HRP標識) を二次抗体としてRIP3を検出した。 対比染色にはヘマトキシリンを使用した。

参考文献
  1. Yu et al. Curr Biol. 1999;9(10):539-42.
  2. Sun et al. J Biol Chem. 1999;274(24):16871-5.
  3. Pazdernik et al. Mol Cell Bio. 1999; 19(10):6500-8 (WD0102).

RIP3 抗体

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Anti RIP3, Murine (Rabbit) Unlabeled詳細データ PSC 2283 20 UG
¥25,000
Anti RIP 3, Murine (Rabbit) Unlabeled詳細データ PSC 2283 100 UG
¥110,000

関連商品

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
RIP3, Blocking Peptide, Mouse詳細データ PSC 2283P 50 UG
[200 ug/mL]
¥30,000
A431 Whole Cell Lysate, Human詳細データ PSC 1202 100 UG
[2 mg/mL]
販売終了
3T3 (NIH) Cell Lysate, Mouse詳細データ PSC 1282 100 UG
[2 mg/mL]
販売終了
C2C12 Cell Lysate, Human詳細データ PSC 1285 100 UG
[2 mg/mL]
販売終了
3T3 Whole Cell Lysate, Mouse詳細データ PSC 1212 100 UG
[2 mg/mL]
販売終了

製品使用文献(一部)

  1. He et al. Receptor interacting protein kinase-3 determines cellular necrotic response to TNF-alpha. Cell. 2009;137(6):1100-11. PMID:19524512
  2. Zhang et al. Functional complementation between FADD and RIP1 in embryos and lymphocytes. Nature. 2011;471(7338):373-6. PMID:21368761
  3. Narayan et al. The NAD-dependent deacetylase SIRT2 is required for programmed necrosis. Nature. 2012;492(7428):199-204. PMID:23201684
  4. Li et al. Tissue damage negatively regulates LPS-induced macrophage necroptosis. Cell Death Differ. 2016;23(9):1428-47. doi:10.1038/cdd.2016.21. Epub 2016. PMID:26943325
  5. Yang et al. Regulation of RIP3 by the transcription factor Sp1 and the epigenetic regulator UHRF1 modulates cancer cell necroptosis. Cell Death Dis. 2017;8(10):e3084. doi:10.1038/cddis.2017.483. PMID:28981102
  6. Ramachandran et al. Receptor interacting protein kinase 3 is a critical early mediator of acetaminophen-induced hepatocyte necrosis in mice. Hepatology. 2013;58(6):2099-108. PMID:23744808
  7. Li et al. The RIP1/RIP3 necrosome forms a functional amyloid signaling complex required for programmed necrosis. Cell. 2012 ;150(2):339-50. PMID:22817896
  8. Vitner et al. RIPK3 as a potential therapeutic target for Gaucher's disease. Nat Med. 2014;20(2):204-8. PMID:24441827
  9. Wang et al. RNA viruses promote activation of the NLRP3 inflammasome through a RIP1-RIP3-DRP1 signaling pathway. Nat Immunol. 2014;15(12):1126-33. PMID:25326752
  10. Onizawa et al. The ubiquitin-modifying enzyme A20 restricts ubiquitination of the kinase RIPK3 and protects cells from necroptosis. Nat Immunol. 2015;16(6):618-27. PMID:25939025
  11. Murphy et al. The pseudokinase MLKL mediates necroptosis via a molecular switch mechanism. Immunity. 2013;39(3):443-53. PMID:24012422
  12. Nogusa et al. RIPK3 Activates Parallel Pathways of MLKL-Driven Necroptosis and FADD-Mediated Apoptosis to Protect against Influenza A Virus. Cell Host Microbe 2016;20(1):13-24. PMID:27321907
  13. Pearson et al. EspL is a bacterial cysteine protease effector that cleaves RHIM proteins to block necroptosis and inflammation. Nat Microbiol. 2017 ;2:16258. PMID:28085133
  14. Yang et al. The end of RIPK1-RIPK3-MLKL-mediated necroptosis in acetaminophen-induced hepatotoxicity? Hepatology. 2016;64(1):311-2PMID:26418225
  15. Qu et al. Graphene oxide induces toll-like receptor 4 (TLR4)-dependent necrosisin macrophages. ACS Nano. 2013;7(7):5732-45.PMID:23734789
  16. Gandhirajan et al. Blockade of NOX2 and STIM1 signaling limits Lipo polysaccharide-induced vascular inflammation. J Clin Invest. 2013;123(2):887-902. PMID:23348743
  17. Fortes et al. Heme induces programmed necrosis on macrophages through autocrine TNF and ROS production. Blood. 2012;119(10):2368-75. PMID:22262768
  18. Xu et al. The cytoplasmic nuclear receptor RARγ controls RIP1 initiated cell death when cIAP activity is inhibited. Nat Commun. 2017;8(1):425. PMID:28871172
  19. Karunakaran et al. Targeting macrophage necroptosis for therapeutic and diagnostic interventions in atherosclerosis. Sci Adv. 2016 ;2(7):e1600224. PMID:27532042
  20. Chen et al. Mechanisms of necroptosis in T cells. J Exp Med. 2011 Apr 11;208(4):633-41.PMID:21402742

商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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