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記事ID : 12087
研究用

赤色蛍光タンパク質(RFP;Red Fluorescent Protein)抗体

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Rockland(RKL)社では、全てのRFPバリアントフォームを認識すると予測される、RFP(赤色蛍光タンパク質)ポリクローナル抗体を販売しています。野生型RFPタンパク質全体を免疫原として、ウサギまたはニワトリをホストとして産出されたRFP抗体は、アフィニティ精製されており、高い親和性及び特異性が保証されています

背景

緑色蛍光タンパク質(GFP;green fluorescent protein)やDiscosoma赤色蛍光タンパク質(DsRed)のような蛍光タンパク質は、研究実験に広く用いられており、融合RFP及びGFPは、遺伝子発現やタンパク質の局在のマーカーとして一般的に使用されています。

GFPはオワンクラゲ由来、DsRedは、イソギンチャクDiscosoma sp. mushroom由来です。GFPとDsRedの相同性が19%しかないことから、一般的にGFP抗体はDsRedタンパク質を認識することはなく、逆もまた同様です。構造的には、DsRedタンパク質は、その全体的な折り畳み方(β-can)及び発色団の構造の化学的性質という点でオワンクラゲのGFPと似ています。しかし、DsRedは発色団の成熟課程でにおいていくすかのステップを経て、4量体構造を形成します。

部位特異的変異誘発を用いて、DsRedタンパク質の多数のバリアントが作製され、単量体成熟した赤色蛍光タンパク質も存在しています。DsRed単量体バリアントには、単量体ミュータント mRFP1、mBanana、mCherry、mHoneydew、mPlum、mOrange、mStrawberry、mTangerineなどがあり、幅広い蛍光色を呈します。

Rockland(RKL)社のRFPポリクローナル抗体は、野生型RFPタンパク質全体を免疫原として、ウサギ及びニワトリをホストとして産出され、全てのRFPバリアントフォームを認識すると予測されます。これらのRFP抗体は、アフィニティ精製されており、高い親和性及び特異性が保証されています。マウスモノクローナル抗体及びRFPリコンビナントコントロールタンパク質も取り扱っております。全てのRFP抗体は、ヒト・マウス・ラットの血清タンパク質との交差性の可能性を除去するために予め吸収しています。GFPタンパク質とも交差性がないことを確認しています。加えて、RFPタンパク質検出・定量を更に簡単にするため、標識RFP抗体(蛍光色素、ビオチン、HRP)も取り扱っております。

一般的なアッセイに推奨の製品

  • ELISA
    ビオチン標識RFP(ニワトリ)抗体(品番600-906-379):サンドイッチ又は力価ELISAフォーマットにご利用いただけます。アフィニティ精製されており、ストレプトアビジンペルオキシダーゼと組み合わせて使用することで優れたシグナルノイズ比が得られます。
  • ウェスタンブロット
    ペルオキシダーゼ標識RFP(ウサギ)抗体(品番600-403-379):比色基質、化学発光基質検出にご利用いただけます。バックグランドと低減し、感度を上げるためにブロッキングバッファーとご利用ください。
  • 免疫蛍光顕微鏡法(IF)
    蛍光標識RFP(ウサギ)抗体(品番600-402-379):RFPの全てのバリアントフォームを認識します。RFP抗体の蛍光ベースの免疫アッセイ(FLISAを含む)の一般的な使用に最適です。
  • 免疫組織化学(IHC)
    ペルオキシダーゼ標識RFP(ウサギ)抗体(品番600-403-379):MaxTag™ DABタブレットと組み合わせてご使用いただけます。

使用例

RFP抗体(品番600-901-379)を用いたウェスタンブロット
図1 RFP抗体(品番600-901-379)を用いたウェスタンブロット
0.1μgのRFPを4-20%アガロースゲルにロードして分離し、ニトロセルロース膜に転写した。RFP抗体1.0μg/mLを加え、室温で2時間インキュベートし、IRDye800®抗ニワトリ(品番603-132-126)を1:20000希釈して加え、室温で45分間インキュベートした。

ポリクローナルRFP抗体(品番600-401-379)を用いたウェスタンブロット
図2 ポリクローナルRFP抗体(品番600-401-379)を用いたウェスタンブロット
レーン1:GFPリコンビナントタンパク質を含むHeLa細胞抽出物10μg。反応は見られなかった。
レーン2:RFPリコンビナントタンパク質を含むHeLa細胞ライセート10μg。27kDaにシングルバンドが確認できた。

赤色蛍光タンパク質(RFP;Red Fluorescent Protein)抗体

■ 非標識抗体
  ・ポリクローナル抗体(免疫動物:Rabbit or Chicken)
  ・モノクローナル抗体(免疫動物:Mouse)

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Anti RFP (Rabbit) Unlabeled詳細データ RKL 600-401-379 100 UG
[1.0 mg/mL]
¥46,000
Anti RFP (Chicken) Unlabeled詳細データ RKL 600-901-379 100 UG
[1.0 mg/mL]
¥46,000
Anti RFP,  (Mouse) Unlabeled, 8E5.G7詳細データ RKL 200-301-379 100 UG
[1 mg/ml]
¥71,000

■ 標識抗体(Horseradish Peroxidase/Biotin/Fluorescein Isothiocyanate)

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Anti RFP (Rabbit) Horseradish Peroxidase詳細データ RKL 600-403-379 100 UG
[1.0 mg/mL]
¥71,000
Anti RFP (Rabbit) Biotin詳細データ RKL 600-406-379 100 UG
[1.0 mg/mL]
¥71,000
Anti RFP (Chicken) Biotin詳細データ RKL 600-906-379 100 UG
[1.0 mg/mL]
¥71,000
Anti RFP (Rabbit) Fluorescein Isothiocyanate詳細データ RKL 600-402-379 100 UG
[1.0 mg/mL]
¥71,000

[関連]RFP ウェスタンブロットキット

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
RFP Western Blot Kit: for RFP Chemiluminescent Western Blotting詳細データ RKL KCA379 1 EACH
¥73,000

商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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