検出対象
睾丸ヒアルロニダーゼ: ヒアルロン酸、コンドロイチン硫酸(A・C)、ケラト硫酸
細菌(肺炎双球菌、ブドウ球菌)ヒアルロニダーゼ:ヒアルロン酸
原理
ヒアルロニダーゼを作用させてヒアルロン酸を消化した後、酸性粘性多糖類を染色することで、ヒアルロン酸と一部のコンドロイチン硫酸(A・C)を他の酸性粘性多糖類と区別する方法です(ヒアルロニダーゼの起源により、消化されるものが異なります)。
プロトコール
- サンプル、コントロール切片を2つずつ準備し、蒸留水に浸します。
- サンプル、コントロール切片1つずつをヒアルロニダーゼ液中でインキュベーションします(37℃、1時間)。
- 流水で10分間洗浄します。
- 続いて蒸留水で洗浄します。
- 4つの切片に酸性粘液多糖類染色(コロイド鉄やアルシアンブルー染色)を施します。ヒアルロニダーゼ処理により消失した部分がヒアルロン酸です。