記事ID ： 11037

リン酸化セリン、スレオニン、チロシンに活性 λプロテインホスファターゼ酵素

メーカー名：Santa Cruz Biotechnology, Inc.

λプロテインホスファターゼは、Mn²⁺依存性タンパク質脱リン酸化酵素で、リン酸化されたセリン（Ser）、スレオニン（Thr）、チロシン（Tyr）に対して活性を持ちます（一部のリン酸化ヒスチジンにも活性を持ちます）。

バクテリオファージλのORF221 オープンリーディングフレームによる221アミノ酸の製品です。この酵素はバナジウム酸塩イオンにより阻害され、50mM EDTA存在下で65℃で1時間過熱することでも失活します。

特長

リコンビナントバクテリオファージλ（E.coliで発現）
純度95%以上（SDS-PAGE）プロテアーゼ、DNase、RNaseフリー
約400,000ユニットタンパク質/mL
品番：SC-200312（100,000ユニット/0.25mL）
品番：SC-200312A（20,000ユニット/0.05mL）
※ 1ユニットは、30℃、pH7.5で、1分間あたり1nmolのp-ニトロフェニルリン酸を加水分解する単位

構成内容

λプロテインホスファターゼ（50 mM Tris-HCl、pH7.5、0.1mM EGTA、0.01% BRIJ 35、50% グリセロール溶液入り）
λプロテインホスファターゼバッファー（10×）（500mM HEPES、pH7.5、1mM EGTA、50mMジチオスレイトール、0.1％ BRIJ 35）
MnCl₂溶液（20×）

使用例

図1　ウェスタンブロットによるFAKのリン酸化解析
サンプル：
レーンA、D：コントロール（293T細胞ライセート、品番sc-117752）
レーンB、E：ヒトFAKをトランスフェクトした293T細胞ライセート（品番sc-114600）
レーンC、F：λホスファターゼ処理したヒトFAKをトランスフェクトした293T細胞ライセート
抗体：
レーンA、B、C：p-FAK（Tyr-577）-R抗体（品番sc-16665-R）
レーンD、E、F：FAK（C-903）抗体（品番sc-932）