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ハイブリドーマを作製する際のHATセレクションとクローニングを同時に行うための専用培地(カルボキシメチルセルロースベースの半固形培地)です。 従来の方法ではHATセレクションとクローニングに約1ヵ月ほどかかるところ、HDO-01を使用すると14日間に短縮できます。
使用方法
図1. HDO-01培地使用方法の概略
【使用方法】
1) 細胞融合後、回復培地でovernight 培養したハイブリドーマを回収して10 mL の細胞懸濁液を調製する。
細胞数は1×107〜5×107の範囲にする。
2) 90 mLのHDO-01に10 mL の細胞懸濁液を添加し、キャップを閉めて数回転倒撹拌する。
3) 気泡を除去するために、37℃の CO2 インキュベータ内で 10 分間静置する。
4) 16G のブラント針を装着した10mLのシリンジでハイブリドーマ懸濁HDO-01を10mL分取し、
100mm細胞培養ディッシュに気泡が入らないようにアプライする。
5) ハイブリドーマのコロニーが目視できるまで 14 日間培養する。
6) シングルコロニーを10〜20µLの培地ごとピペットで吸い取り、ハイブリドーマ培養用の培地を入れた96 穴プレートに
移して培養する。
図2．培養 14 日目のコロニー形成の様子
60mm 細胞培養ディッシュで 14 日間培養した。
目視でハイブリドーマのシングルコロニーが見えるようになる。
ハイブリドーマ用半固形培地(HAT 添加) HDO-01
| 品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
|---|---|---|---|---|
HDO-01 (Semi-solid Medium for Hybridoma with HAT) |
BAM | 80-002 | 90 ML |
￥75,000 |
商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。
※ 表示価格について
