記事ID ： 37183

シグナル伝達カスケードとエフェクター機能を結びつける翻訳後機構の研究に SUBE1 リコンビナントタンパク質

カテゴリから探す > シグナル伝達 > リン酸化／ユビキチン化／SUMO化

メーカー名：SignalChem Pharmaceuticals,Inc.

SUBE1は、低分子ユビキチン様修飾因子（small ubiquitin-like modifier；SUMO）相互作用モチーフが可動性のリンカーで連結され、タンデムに配置された構造を含む、リコンビナントタンパク質です。N-末端のGST-タグとHis-タグおよびC-末端のSV5タグを用いてE.coli細胞で発現させたものです。

背景

SUMOは、タンパク質局在化、転写、DNA修復、または細胞周期進行を制御する重要な細胞因子の翻訳後修飾に関与するユビキチン様タンパク質です ⁽¹⁾。哺乳類では、SUMO1、SUMO2、およびSUMO3といった3種のSUMO分子がタンパク質のSUMO化に関与します ⁽²⁾。熱ショック、酸化ストレス、またはプロテアソーム阻害剤といった一般的な細胞傷害に応答して、タンパク質のSUMO化レベルが著しく上昇します ⁽³⁾。SUMO相互作用モチーフ（SUMO interacting motif ；SIM）は、非共有結合的にSUMOと相互作用します。通常SIM単独ではSUMOへの親和性が低く、クラスターを形成したSIMsがSUMOへの結合能を増大させて、ポリSUMO鎖と効率よく相互作用すると考えられます。

SUBE1は、RNF4のSIM2とSIM3モチーフのタンデム反復配列をもつGST-融合タンパク質であり、細胞/組織由来のSUMO化タンパク質を捕捉するために高い親和性を示すように設計されており ⁽¹⁾、エフェクター機能をもつシグナルカスケードにつながる翻訳後修飾のメカニズムの研究を促進します。バイオマーカーの新規スクリーニング開発での有用の可能性があります。

図1 SUBE1

製品データ

図2 熱ショック誘導したHeLa細胞由来のSUMO化タンパク質をウェスタンブロット

インプット (Input)、フロースルー画分（FT）、および結合サンプル（Bound）において、SUBE1に捕捉されたSUMO化タンパク質を抗-SUMO-2/-3抗体を用いてウェスタンブロットで分析。GSTコントロール (品番：G52-30H) はバックグラウンドレベルを示す。
アッセイ設定と実行方法はアッセイプロトコールに記載の通り。

参考文献

Silva-Ferrada E. et al. Analysis of SUMOylated proteins using SUMO-traps. Sci Rep 3. 2013,1690.
Sarge K. D. et al. SUMO and its role in human diseases. Int Rev Cell Mol Biol. 2011, 288:167-183.
Golebiowski F. et al. System-wide changes to SUMO modifications in response to heat shock. Science signaling. 2009, 2（72）ra24.