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NGSライブラリ作製が簡単に！ Tn5 Transposase for Tagmentation

メーカー名：Applied Biological Materials Inc.

Applied Biological Materials社のTn5 Transposase for Tagmentationは、次世代シーケンス（NGS）ライブラリの生成に使用される、超活性プロテインAタグ付きTn5トランスポザーゼです。この酵素は、DNA（ゲノムDNA、プラスミドDNA、PCRアンプリコン）を断片化し、Illumina社製品と互換性のある配列決定アダプターを付加するというユニークな機能を持っています。本技術は高い再現性を示し、少ないDNAインプット量で、幹細胞、腫瘍、エピジェネティクスなど様々な研究用途に応用することが可能です。

特長

One-Stepで切断とタグの挿入が可能
gDNA、プラスミドDNA、PCR増幅物からNGS用ライブラリを簡単に作製
合理化されたプロセス
8分でタグメンテーションが可能
Illumina社製品で使用可能
ATAC-Seq、ChIPmentation、CHANGE-seqのために
効率的
わずか50 ngのDNAで使用可能
高い再現性

構成内容

Hyperactive pA-Tn5 Transposase (500 ng/µl)
Annealing Buffer
Coupling Buffer
5X Tagmentation Buffer

ワークフロー

	オリゴヌクレオチドアダプターがTn5トランスポザーゼと複合体化し、活性型トランスポゾームとなる。活性型トランスポゾームがgDNAに結合する。
	トランスポゾームがgDNAにランダムに挿入され、断片化およびアダプターライゲーションが生じる。
	ライゲーションされたアダプター領域に相補的なプライマーによってフラグメントは増幅され、ライブラリーが生成される。

製品データ

図. 長期間にわたって一貫した再現性の高い結果を得られた
ロードしたトランスポゾームを-20°Cで保存し、1日目、14日目、28日目に50 ngのpShuttle plasmidを用いて55°Cで8分間消化反応を行った。DNAの切断パターンが一定であるため、Fragment Analyzer Traceによって300bp～500bpの範囲で再現性のあるスメアが検出された。500 bp程度のスメアはシークエンスに理想的である。