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Transfectamine™ シリーズ Transfectamine™ 6000 CRISPR

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メーカー名：AAT Bioquest, Inc. (Former ABD Bioquest, Inc.)

Transfectamine™ 6000 CRISPRは、CRISPR/Cas9導入に特化した非リポソーム型トランスフェクション試薬です。
プラスミド、リボ核タンパク質（RNP）、mRNAなど、様々なCRISPR/Cas9システムに対応可能です。遺伝子ノックアウト／ノックインや機能ゲノミクス、治療用遺伝子編集の研究など、さまざまな用途で幅広く活用できます。

特長

細胞腫	HeLa細胞初代培養細胞幹細胞神経細胞がん細胞
接着性/浮遊性	接着性　浮遊性
ペイロード	プラスミドDNA mRNA リボ核タンパク質(RNPs)
導入方法	In vitro

プロトコル

プロトコルの例

約90％のコンフルエントまで細胞を培養し、培地交換を行う。
Transfectamine™ 6000 CRISPR-DNA混合物※を用意し、細胞に加える。
1晩分化させ、適切な方法でトランスフェクション効率を分析する。

Transfectamine™ 6000 CRISPR-DNA混合物調製方法※

2.5 µg のDNA を無血清培地 200 µLと混合する。
手順1にTransfectamine™ 6000 CRISPR を7.5 µLを加える。
よく混合し、室温で20分間インキュベートする。

※　Transfectamine™ 6000 CRISPRとDNAの比率は、異なる細胞株ごとに最適化する必要があります。一般的に、推奨される比率は、Transfectamine™ 6000 CRISPR 3～5 µLに対して、DNA 1 µg です。

**表. 6ウェルプレートおよび10 cmプレートのサンプルプロトコル詳細**
成分	6ウェルプレート(1ウェルあたり)	10 cmプレート
新鮮な培養培地	2 mL	6 mL
プラスミド	～ 2.5 µg	～7.5-10 µg
無血清培地	200 µL	600 µL
Transfectamine™ 6000 CRISPR	～ 7.5 µL	～22.5 µL

製品使用例

図1. CRISPR-Cas9-GFPプラスミドを用いたHeLa細胞におけるトランスフェクション効率の比較
Transfectamine™ 6000 CRISPRと他社製品を使用した。
両試薬は96ウェルプレート形式でHeLa細胞にトランスフェクションされ、トランスフェクション後48時間および72時間後にGFP発現が解析された。Transfectamine™ 6000 CRISPRは、他社製品よりも高いGFPトランスフェクション効率を示した。

Transfectamine™ 6000 CRISPR

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
Transfectamine^TM 6000 CRISPR Transfection Reagent	ABD	60028	50 UL	￥9,000
Transfectamine^TM 6000 CRISPR Transfection Reagent	ABD	60023	1 ML [60023]	￥72,000
Transfectamine^TM 6000 CRISPR Transfection Reagent	ABD	60024	5 ML [60024]	￥200,000