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記事ID : 17683
研究用

カコジル酸ナトリウムフリーCell Meter™ TUNEL アポトーシスアッセイキット

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Cell Meter™ TUNEL アポトーシスアッセイキットは、アポトーシスで形成されるDNA断片の 3'OH 末端に、蛍光色素 TF3 で修飾した TF3-dUTP(deoxyuridine 5'-triphosphates)を結合させることで、細胞のアポトーシスを直接検出するキットです。
本キットは、カコジル酸ナトリウム(強い毒性)を含まない、独自のバッファーを使用しています。

背景

DNA 断片化は、アポトーシス後期に特徴的に認められます。アポトーシス細胞における DNA 断片化は、TUNEL(TdT-mediated dUTP nick end labeling)法によって検出することができます。TUNEL法では、TdT(terminal deoxynucleotidyl transferase)を用いて、二次的にマーカーで標識した dUTP を DNA 中のニック(nick)に付加することで検出します。既存の TUNEL アッセイでは、多くの場合、強い毒性を持つカコジル酸ナトリウム(アポトーシスを誘発し、DNA産生およびDNA鎖を減少させる可能性がある)が用いられています。

特長

  • カコジル酸ナトリウム不含: 特別な廃棄処理が不要です
  • 使いやすい: 必要な試薬が全て含まれています。抗体は使用しません。
  • 各試薬を単品で購入するよりもお得です

構成内容

  • Component A: 100× Tunnelyte™ Red(品番22844)、Tunnelyte™ Green(品番22849)
  • Component B: Reaction Buffer
  • Component C: 1000× Hoechst

 

検出波長

  • 品番22844 : Ex/Em = 550/590 nm
  • 品番22849 : Ex/Em = 490/520 nm

プロトコール概要

  1. 試験化合物で細胞を処理する
  2. 細胞を 4% ホルムアルデヒドで固定する
  3. 反応混合液を添加し、37℃ で1時間インキュベートする
  4. 細胞を洗浄し、品番22844 : Ex/Em = 550/590 nm、品番22849 : Ex/Em = 490/520 nmで解析する。

製品データ

ABD_22844_1.jpg
図1. スタウロスポリン処理したHeLa細胞におけるTUNEL反応の蛍光画像 (品番22844使用)
100 nMもしくは1μM スタウロスポリン (SS) で4時間反応させたHeLa細胞及びコントロール用の未処理細胞に反応ミクスチャーを加え、37℃で1時間インキュベートした。赤色蛍光シグナルを蛍光顕微鏡 (TRITCフィルターセット) で解析した。SS処理した細胞では、蛍光標識したDNA鎖断片が強い蛍光を示す。


ABD_22844_2.jpg
図2. スタウロスポリン処理したHeLa細胞におけるTUNEL反応の蛍光画像 (品番22849使用)
100 nMもしくは1μM スタウロスポリン (SS) で4時間反応させたHeLa細胞及びコントロール用の未処理細胞に 反応ミクスチャーを加え、37℃で1時間インキュベートした。緑色蛍光シグナルを蛍光顕微鏡 (TRITCフィルターセット) で解析した。SS処理した細胞では、蛍光標識したDNA鎖断片が強い蛍光を示す。

Cell Meter™ TUNEL アポトーシスアッセイキット 赤色蛍光

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Cell MeterTM TUNEL Apoptosis Assay Kit *Red Fluorescence*詳細データ ABD 22844 1 KIT
[50 Tests]
¥62,000

Cell Meter™ TUNEL アポトーシスアッセイキット 緑色蛍光

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Cell MeterTM TUNEL Apoptosis Assay Kit *Green Fluorescence*詳細データ ABD 22849 50 TEST
¥62,000

製品使用文献

  1. Axl is required for TGF-β2-induced dormancy of prostate cancer cells in the bone marrow
    Authors: Kenji Yumoto, Matthew R Eber, Jingcheng Wang, Frank C Cackowski, Ann M Decker, Eunsohl Lee, Ana Rita Nobre, Julio A Aguirre-Ghiso, Younghun Jung, Russell S Taichman
    Journal: Scientific Reports (2016)
  2. Growth Arrest-Specific 6 (GAS6) Promotes Prostate Cancer Survival by G1 Arrest/S Phase Delay and Inhibition of Apoptotic Pathway During Chemotherapy in Bone Marrow
    Authors: Eunsohl Lee, Ann M Decker, Frank C Cackowski, Lulia A Kana, Kenji Yumoto, Younghun Jung, Jingcheng Wang, Laura Buttitta, Todd M Morgan, Russell S Taichman
    Journal: Journal of cellular biochemistry (2016)
  3. RFX1--dependent activation of SHP-1 induces autophagy by a novel obatoclax derivative in hepatocellular carcinoma cells
    Authors: Jung-Chen Su, Ping-Hui Tseng, Cheng-Yi Hsu, Wei-Tien Tai, Jui-Wen Huang, Ching-Huai Ko, Mai-Wei Lin, Chun-Yu Liu, Kuen-Feng Chen, Chung-Wai Shiau
    Journal: Oncotarget (2014): 4909

商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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