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DNAのGC含量測定用試薬キット

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メーカー名：ヤマサ醤油株式会社

微生物の分類、同定において、DNA中のGC含量は不可欠な指標の一つです。

これまでこの測定は浮遊密度法、融解温度法などの間接法によって行われてきました。これらの方法に対し、供試DNAを酵素的に4種のデオキシヌクレオチドに分解した後、高速液体クロマトグラフィーにより直接GC含量を測定する方法が、日本の三研究グループによってほぼ同時に発表されました。この方法は、対象としてこれまでの生菌体だけにとどまらず、加熱乾燥した死菌体についても応用が可能である上、高価な装置や熟練した技術を必要としない等、多くの利点をもっています。

本キットは、供試DNAを4種デオキシヌクレオチドに分解するヌクレアーゼP1と高速液体クロマトグラフィー分析の為の標準デオキシヌクレオチド混合物（等モル混合物）からなり、どなたにも簡便にDNA中のGC含量を測定できる製品です。

構成内容

GC Analysis Sta：3tubes
Nuclease P1：400units

操作方法

DNA（EDTAを含まないもの）を調製します。
DNA濃度 : 1mg/ml 蒸留水
100℃、5分間熱処理
氷水中で急冷
DNA溶液100μl（100μg DNA）
＋
＊酵素溶液 100μl（0.2unit）（＊：ヌクレアーゼP1 2unit/mlに調製したもの）
50℃で1時間インキュベーション
HPLCで等モル混合標準液を分析後、上記酵素分解液を分析する。

参考文献

1. M.Kumagai et al. : Nucleic Acids Research Symposium series, No.19, 65,1988 2. T.Noguchi et al. : Agric. Biol Chem., 52, 2355,1988 3. T.Kaneda et al. : J.Microbiol Methods, 4, 229,1986