FAQ：デキストラン硫酸ナトリウム塩（DSS）

下記の文献をご参考ください。
Gastroenterology, 2002, 123(1):256-270; J Immunol, 2004, 172(9): 5664-5675; Journal of Gastroenterology and Hepatology 2013, 22(12): 1221-1224; Inflammatory.

DSS溶液投与初日に腫瘍壊死因子、インターロイキン（IL）、インターフェロン（IFN）、IL-10、IL-12の発現が増加し、投与時間と共に増加します。急性DSS大腸炎モデルでは、IL-および IL-mrna の発現が増加します。Th2 細胞が媒介するサイトカインである、 IL-4 および IL-10 も、慢性 DSS 大腸炎モデルでも重要な役割を果たしています。

DSS溶液は、自由に飲むなどの経口投与と胃内投与があります。

DSSの分子量、DSS溶液の濃度、動物の種類および系統、動物に与える食事の種類が重要なパラメータです。

DSSモデルに影響を与える要因は多く、動物の飼育環境も重要な要素です。

1.DSS溶液は滅菌水で調製し、w/v濃度についてはアプリケーションガイドを参照してください。
また、使用前に0.22 µmの濾過を行うことを推奨します。
APPLICATION NOTES-Dextran Sodium Sulfate for Colitis Animal Model Research-
2.DSS溶液は1-2日ごとに新しいものと交換してください。
3.モデルの進行状況を明確に観察するために、適切な飼育環境を提供してください。1ケージあたり2-3匹、最大でも5匹を推奨します。
4.すべての動物で一貫した環境条件を維持してください。

DSSはポリマーであり、分子量は平均値で示されます。ロットごとに分子量が異なることがありますが、最適な範囲内には収まっています。同一ロットのDSSを十分に購入し、実験全体に使用することを推奨します。もしそれが不可能な場合は、ロットを切り替える前に予備試験を行うことをお勧めします。

文献によると、マウスは、体重が16-18g以上であるべきで、週齢に基づいて選択する必要があります。8-12週齢が推奨され、体重は約22g程度です。

毎日の水分摂取量は、マウスは7-10ml/日、ラットは体重100gあたり11ml/日です。

毎日10:00、14:00、18:00に2%のDSS溶液をそれぞれ30ml/kgで与え、飲水は追加しません。最後のDSS溶液投与後に混合式の顆粒飼料を与え、翌朝8:00に餌を取り上げます。モデル作成のサイクルタイムは9日間です。
参考文献：Gastroenterology 2009, 14(1), 27-30。

新しいDSS溶液を1-2日ごとに交換することをお勧めします。急性モデルのサイクルタイムは5-7日です。

DSS溶液濃度2-5%は、過去の文献に基づいて設定された範囲です。この範囲内で研究者による結果が得られています。

はい、一般的に2日目で上皮バリアが損傷し、3日目、5日目、7日目に観察できます。病理学的検査を実施することをお勧めします。

一部の動物は反応が遅く、DSS溶液を摂取して5日目に体重が減少することがあります。7日間症状が現れない場合は、DSS溶液濃度を0.5-1%増加させることをお勧めします。

DSS摂取が一定の閾値に達することで大腸炎が誘導されます。閾値に達していない場合、体重減少は見られますが、病理学的には炎症が見られません。

体重やDAI（疾患活動指数）は摂取閾値と関係していないため、血便は病理学的所見とは一致しません。

毎日の水分摂取量に顕著な差がないか確認し、すべての動物が体重の変動を繰り返しているのか、あるいは一部の動物だけであるかを確認してください。これは動物個体差に関係しています。

高濃度のDSS溶液は腸内出血を引き起こします。軽度の出血は問題ありませんが、過度の出血が見られる場合は、DSS溶液の濃度を下げることをお勧めします。

肛門付近の1-2cmの部分をサンプルとして採取することをお勧めします。

DSSは動物が時間をかけて耐性を持つため、2サイクル目では症状が軽減します。

DSS残留物がPCRを阻害している可能性があります。スペルミンを使用してDSSを除去することをお勧めします。
参考文献：Journal of Microbiological Methods, 2018 Jan, 144:1-7.
また、糞便中の抑制因子が原因である可能性もありますので、PCRの前にテンプレート濃度を希釈することをお勧めします。希釈がうまくいった場合は、糞便DNAの抽出手順を最適化し、阻害物質を除去することをお勧めいたします。

違いがあります。C57マウスは純粋な背景を持ち、腸炎誘導が安定しています。Babl/Cマウスを使用する場合、予備実験を行うことをお勧めします。

はい、使用できます。
参考文献：YAP triggers the Wnt/ -catenin signaling pathway and prime enterocyte self-renewal, regeneration and tumorigenesis after DSS-induced injury. Cell death and Disease, 2018(9):153.

はい、使用できます。

DSSの他の機能として、抗凝固作用、血中脂質の低下、抗ウイルス作用、いくつかの酵素への抑制、核酸ハイブリダイゼーションの改善、化粧品添加剤としての使用例があります。

DSSは潰瘍性大腸炎を誘発し、TNBSはクローン病を誘発します。
TNBS: 炎症の経過が長く、個人差が大きい。潰瘍性大腸炎との類似性が低い。

他にもモデルはありますが、それぞれ異なる目的に使用されます。DSSは腸がんを誘導することができますが、誘導には時間がかかります。
参考文献：Nature Protocols; 2007, 2 (8): 1998-2004.