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Q&A

記事ID : 45476

AAV Titration ELISA Kit について

【01】 これらのELISAキットの検出対象は何ですか?

サンドイッチELISA法を用いて、インタクトなAAVカプシドタンパク質を定量します。検出は完全に組み立てられたカプシドに特異的であり、変性あるいは空のカプシド断片は含まれません。

【02】 使用されている抗体は血清型特異的ですか?

各キットは、AAV2、AAV5、AAV6、AAV8、またはAAV9といった特定のAAV血清型に対して高い特異性を持つモノクローナル抗体を使用しています。他の血清型との交差反応性は、ほとんどないか、あるいは全くありません。

【03】 これらの抗体は変性したカプシドタンパク質に結合しますか?

抗体はインタクトなカプシドタンパク質の天然の立体構造に特異的であり、変性または分解されたカプシドには結合しません。

【04】 これらのキットの定量検出範囲はどのくらいですか?

キットは、通常約 2.03x107 から 1.3x109 capsids/mLにわたる直線検出範囲を持っており、バッチ間での高い再現性(R2 > 0.99)を備えています。

【05】 キット構成品には何が含まれていますか?

各キットには、プレコート済み96ウェルプレート、AAV標準品、捕捉抗体および検出抗体、ストレプトアビジン-HRP、アッセイバッファー、洗浄バッファー、TMB基質、および反応停止液が含まれています。

【06】 テスト用のサンプルはどのように準備すべきですか?

サンプルはアッセイバッファーで希釈し、デュプリケートでテストする必要があります。スタンダードカーブの直線範囲内で正確性を確保するために、1サンプルにつき、最低2段階の希釈を行うことが推奨されます。

【07】 異なるキットやロットの構成品を混ぜてもいいですか?

異なるバッチの試薬を混ぜて使用しないでください。結果の正確性や再現性に影響を及ぼす可能性があります。

【08】 複数のプレートでスタンダードカーブを再利用してもよいですか?

プレート間のばらつき(変動)を考慮し、正確な定量を行うために、各プレートごとに新しくスタンダードカーブを作成する必要があります。

【09】 データ分析にはどの曲線適合法(カーブフィッティング)が推奨されますか?

スタンダードカーブの適合方法は、使用するラボ用ソフトウェアによって異なる場合があります。ELISAデータでは一般的に4パラメーターロジスティック(4PL)曲線適合が用いられますが、得られた曲線によっては線形モデルや多項式モデルが許容される場合もあります。実際のデータに最も適合する方法を使用してください。

【10】 これらのキットを臨床診断に使用することはできますか?

AAV Titration ELISA Kitは研究用(Research Use Only)として提供されており、ヒトの臨床診断に使用することはできません。


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