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Q&A

記事ID : 45475

FAQ:MHCモノマー&テトラマーについて

【01】MHCモノマーとテトラマーの違いは何ですか?また、どのように使い分けるべきですか?

MHCモノマーは、単一のMHC-ペプチド複合体で構成されており、通常、ELISA、SPR、または生物物理学的な解析におけるプレートへのコーティングに使用されます。一方、MHCテトラマーは、4つのMHCモノマーをストレプトアビジンに結合させたものです。これにより結合力(avidity)が高まり、フローサイトメトリーによる抗原特異的T細胞の検出が可能になります。機能解析やT細胞の染色には、多価(multivalent)な性質を持つテトラマーが推奨されます。

【02】実験に使用する分子として、MHCクラスIとクラスIIのどちらを選べばよいですか?

MHCクラスI分子は、通常、細胞内ペプチドをCD8+細胞傷害性T細胞に提示するために使用されます。MHCクラスII分子は、細胞外由来のペプチドをCD4+ヘルパーT細胞に提示します。選択は、腫瘍抗原提示(クラスI)や、ワクチン開発およびヘルパーT細胞のプロファイリング(クラスII)など、研究の免疫学的背景に基づいて決定してください。

【03】Peptide-ready MHC(prMHC)とは何ですか?既製のMHC複合体(Pre-loaded)とどのように違いますか?

Peptide-ready MHC(prMHC)は、ペプチドが結合していない状態で供給される安定化されたMHC分子です。ラボ内で独自の抗原ペプチドを簡単にロードできるように設計されており、スクリーニングや実験デザインに柔軟性をもたらします。対照的に、既製のMHC複合体は、特定のペプチドがあらかじめ結合され、検証された状態で供給されます。

【04】MHCテトラマーはフローサイトメトリーやT細胞ソーティングに使用できますか?

はい。蛍光標識MHCテトラマー(PE、APC、FITCなど)は、フローサイトメトリーやFACSアプリケーション用に設計されています。これらの製品は、ヒトまたはマウスのサンプルから抗原特異的T細胞を同定、ソーティングするために検証済みです。ご使用の蛍光色素とサイトメーターの設定が適合しているかをご確認ください。

【05】現在、カタログ品として提供されているアレルにはどのようなものがありますか?

HLA-A02:01、HLA-B07:02、HLA-C*07:02、マウスH-2Kbなど、幅広いヒトおよびマウスのMHCクラスIアレルを提供しています

【06】MHC製品にはどのようなタグや標識が利用可能ですか?

ほとんどのMHC製品は、アッセイとの互換性を保つため、C末端のHisタグ、ビオチン標識、または蛍光標識が利用可能です。これらのタグは、目的の用途に応じて、検出、固定化、またはテトラマーのアッセンブルを容易にします。

【07】MHC製品の生物活性と一貫性はどのように検証されていますか?

各製品は、特定のペプチドとTCRの結合、および構造の完全性を確認するために、ELISA、SPR、および/またはFACSによる検証を受けています。SPRやBLI(バイオレイヤー干渉法)などの技術を用いてEC50値、KD値、およびロット間の再現性を評価し、各種アプリケーションにおけるパフォーマンスを保証しています。

【08】凍結乾燥されたMHC製品の保存方法と溶解(再構成)方法を教えてください。

凍結乾燥されたMHC製品は、−20℃以下で保存してください。溶解は、滅菌されたペプチドに適したバッファーを使用して行ってください。詳細な溶解手順と保存ガイドラインは、製品データシートに記載されています。

【09】MHCモノマーおよびテトラマーはどのようなアプリケーションに対応していますか?

MHC製品は、TCR親和性試験、抗原特異的T細胞検出、ブロッキングアッセイ、薬剤スクリーニング、免疫プロファイリングに使用されています。ELISA、SPR、フローサイトメトリー、およびin vivoモデルに対応したフォーマットをご用意しており、がん免疫や感染症研究における多様なワークフローをサポートします。


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