190報以上の文献使用実績！シグナル増幅／免疫細胞染色に最適、Nano-Boosterシリーズ GFP-Booster®（蛍光標識GFP抗体）

GFP-Booster®（GFPブースター®）は、GFPタンパク質の免疫蛍光染色（IF：Immunofluorescence）実験に最適な蛍光色素標識済みのアルパカ由来GFP抗体です。

蛍光色素には、アルパカ（Alpaca）を宿主動物（免疫動物）として作製された「抗GFP組換えモノクローナルVHH抗体」が結合しています。VHH抗体は、Nanobody® としても知られるラクダ科動物の「重鎖抗体（Heavy chain-only antibody）」由来の抗原結合ドメインであり、高い特異性と親和性を示します。VHH抗体は、一般的の抗体よりもサイズが小さく浸透性が高いため、細胞染色に最適です。

GFPとは?

GFPとは、緑色蛍光タンパク質（Green Fluorescent Protein）を表す略語であり、1962年に下村脩（しもむら おさむ）博士によって初めて単離された「蛍光タンパク質（Fluorescent Protein）」です。蛍光タンパク質とは、特定の波長の光に暴露して励起すると、蛍光を発するタンパク質のことを指します。GFPは、緑色の蛍光を発するという特性を示し、in vitroおよびin vivoで発現させることでほぼ全てのタンパク質のイメージングを実現し、遺伝子の転写研究におけるレポーター遺伝子や生化学的アプリケーションに利用されています。例えば、その蛍光特性を利用して「蛍光タンパク質タグ」として応用することで、GFPを発現させた細胞や、目的タンパク質に融合して発現させたGFPを検出および追跡することが可能になります。また、GFPタグは、生化学的アプリケーション（免疫沈降（IP）、タンパク質精製）における抗体認識部位としても利用されます。

• ［参考ブログ記事］GFP（緑色蛍光タンパク質）：特性、由来、構造、配列、ヒント  

■ VHH抗体とは?

VHH抗体は、Nanobody® としても知られるラクダ科動物の「重鎖抗体（Heavy chain-only antibody）」由来の抗原結合ドメインです。一般的な抗体と比べて、10分の1程度とサイズが小さく、高い特異性と親和性を示すことで知られます。

図. ラクダ科動物のユニークな重鎖抗体・VHH

図. 従来の1/10ほどの分子量

■ NanoBooster®/NanoLabel®とは?

Nano-Booster（ナノブースター）およびNano-Label（ナノラベル）は、蛍光タンパク質や細胞内タンパク質を標識する蛍光プローブです。蛍光色素（Alexa Fluor®またはAtto色素）に共有結合したVHH抗体で構成されます。抗体サイズが小さいため、高浸透性かつ高解像なイメージングに寄与し、免疫蛍光染色（IF）を中心としたアプリケーションに利用できます。

• IF（免疫蛍光染色）/ ICC（免疫細胞化学）
• IHC（免疫組織化学）
• 超解像顕微鏡観察（SRM：Super-resolution microscopy）

図. Nano-Boosterの概要。
GFP/RFP融合タンパク質の蛍光シグナルは、細胞固定後に減少します。蛍光シグナルの増幅にGFP/RFP-Booster®を利用できます。

• NanoBooster®/NanoLabel®（ナノブースター&ナノラベル）

■ Proteintech Group（プロテインテック）とは?

Proteintech Group, Inc.（プロテインテック）社は、2001年に設立された抗体製造メーカーです。現在までに、米国本社の他、英国、中国、ドイツ、フランス、シンガポール等で支社を展開し、各国で様々なマーカー抗体、タンパク質研究用試薬を供給しています。国内におけるテクニカルサポート等は、2016年より株式会社プロテインテック・ジャパン（www.ptglab.co.jp ）が担当しています。

• 全てオリジナル商品：自社ラボで製造、検証済み（購入後1年間の交換保証付き）
• 数多くの評判：国内・海外における累計106,100報以上の論文使用実績（2024年5月現在）
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プロテインテックは「日本で成長している抗体サプライヤー」

プロテインテックとChromoTek（クロモテック、ドイツ）は、引用数ランキング付の抗体検索サイトを運営する英国「CiteAb 」が主催の「2022 CiteAb Awards」において「Researchers' choice（研究者の選択）」部門と「Environmental Initiative of the Year（今年の環境イニシアチブ）」部門でそれぞれ受賞者として選出されました。優れた品質およびカスタマーサービス、環境への取り組みが高く評価されています。

また「Which suppliers should you watch in the Japanese antibody market?（日本の抗体市場で注目すべきサプライヤーは?）」のブログ記事で、近年発表された論文中の製品引用数を根拠にプロテインテックが「日本で成長している抗体サプライヤー」として「注目に値するシェアの拡大・急上昇」を見せていると言及されています。以下のリンクから、プロテインテックの主なカテゴリー製品をご覧いただけます。

抗体&免疫アッセイ サイトカイン・増殖因子 ChromoTek 試薬 

 

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■ アルパカ由来GFP抗体の高い親和性

アルパカ由来の組換えVHH抗体は、高い親和性、特異性、安定性を発揮します。実績多数のGFP-Trap®（IP用）やGFP-Booster®（IF用）に使用されているVHH抗体は、ピコモラー（pM）レベルのKD値であり、特に高い親和性を示します。

図. 抗GFP抗体（アルパカ由来VHH抗体）の解離定数（KD）［Molar］

■ GFP-Booster® アプリケーション参考資料

• ［プロトコール］GFP-Booster®（Alexa Fluor® 488標識）
• ［プロトコール］GFP-Booster®（Alexa Fluor®568標識）
• ［プロトコール］GFP-Booster®（Alexa Fluor®647標識）
• ［プロトコール］GFP-Booster®（ATTO488標識）
• ［プロトコール］GFP-Booster®（ATTO594標識）
• ［プロトコール］GFP-Booster®（ATTO647N標識）

■ GFP-Booster®（蛍光標識GFP抗体）

図1
STED microscopy of Vimentin filaments. Vero cells expressing Vimentine-Citrine were immunostained with GFP-Booster (image kindly provided by F. Winter, dept. NanoBiophotonics, MPI-bpc, Goettingen).

図2
Confocal image of HeLa cells transiently transfected with Tom70-eGFP and immunostained with GFP-Booster Alexa Fluor 488 (green). Nuclei were stained with DAPI (blue). Scale bar, 10 µm. Images were recorded at the Core Facility Bioimaging at the Biomedical Center, LMU Munich

図3
Tissue penetration rate: The comparison of conventional anti-GFP antibody and GFP-Booster shows the superior tissue penetration rate of GFP-Booster. Fluorescent images of transgenic mouse tissue expressing Cx3Cr1-EGFP. EGFP signal was enhanced either with conventional anti-GFP antibody (top image) or with the GFP-Booster (bottom image).

図4
Confocal images of HeLa cells transiently transfected with MannosidaseII-GFP (green) and immunostained with GFP-Booster Alexa Fluor 568 (red). Nuclei were stained with DAPI (blue). Scale bar, 10 µm. Images were recorded at the Core Facility Bioimaging at the Biomedical Center, LMU Munich.

図5
Immunostaining of Tubulin-GFP: HeLa cells low expressing Tubulin-GFP. Top: GFP signal of Tubulin-GFP (green) and DAPI stain (blue); Bottom: Tubulin-GFP detection by GFP-Booster coupled to Alexa Fluor 647

図6
Central nervous system of a 3-day-old Drosophila larvae. GFP-Booster was used to enhance the signal of dopamine neurons expressing GFP. (Image kindly provided by Kayvan Forouhesh Tehrani, the Kner Lab, University of Georgia; the Drosophila sample was supplied by the Shen lab, University of Georgia, Athens.)

図7
Enhancement of GFP signal with GFP-Booster Atto488: Comparison of signal intensity of a cell line stably expressing a nuclear GFP-fusion protein before and after GFP-Booster treatment.

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