MMP阻害剤のスクリーニングに最適！MMP Drug Discovery キット（比色／蛍光）

マトリックスメタロプロテイナーゼ（MMP）はその広基質特異性により、様々な疾患と関連します。

MMP Drug Discovery キットは、MMPの阻害剤をスクリーニングするのに用いるキットです。測定は96穴マイクロプレートフォーマットです。
発色による検出、蛍光による検出の2 種類をご用意しています。発色タイプは基質の分解物を412nm で、蛍光タイプはEx/Em＝328/420nm、494/521nm（GREEN）、またはEx/Em＝545nm/576nm（RED）で検出します。

• MMP酵素（ヒト、リコンビナント）
• コントロール阻害剤（NNGH）
• アッセイバッファー
• 黒色96穴マイクロプレート
• キャリブレーションスタンダード（蛍光のみ）
• 基質（キットにより異なります）
  • 比色：Ac-PLG-[2-mercapto-4-methyl-pentanoyl]-LG-OC₂H₅
  • 蛍光：Mca-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa-Ala-Arg-NH₂
  • 蛍光, RED： TQ3-GABA-Pro-Cha-Abu-Smc-His-Ala-Dab（6-TAMRA）-Ala-Lys-NH₂^＊1
  • 蛍光, GREEN： 5-FAM-Arg-Pro-Lys-Pro-Val-Glu-Nva-Trp-Arg-Lys（TQ2W）-NH₂^＊2
    ＊1　 TQ3＝quencher, GABA＝4-aminobutyric acid, Cha＝L-cyclohexylalanine, Abu＝2-aminobutyric acid, Smc＝S-methyl-L-cysteine, Dab＝2,4-diaminobutyric acid, 6-TAMRA＝6-tetramethylrhodamine
    ＊2　 5-FAM ＝ 5-carboxyfluorescein, Nva＝norvaline, TQ2W＝quencher

図1　阻害剤容量依存曲線の例
NNGHを反応前にMMP-1とプレインキュベートし、基質を添加して反応を開始した。試薬の最終濃度は153mU/μL MMP-1、500nM OmniMMP™ Red、0.5% DMSOである。IC₅₀＝300nM。容量依存曲線は最低値を0に固定し、Graphpad Prismソフトウェアを用いて4パラメーターのHill-Slopeモデルにフィッティングして算出した。データは平均値と標準誤差を示す。

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