TrueORF® cDNA クローンは、タグ融合タンパク質として発現するように設計されています。全てのTrueORF® cDNA クローンは、TrueClone® の中からシークエンスを確認して精製したプラスミドを鋳型にして、high fidelity のポリメラーゼを用いたPCR により調製しています。
特長
- 便利:タグ融合タンパク質を簡単に発現
タグ抗体を用いて、発現タンパク質を簡単に検出・精製できます。 - タンパク質C 末端側にMyc-DDK*タグまたはGFP タグがついています。
- MCS の上流にCMV プロモーターとコザック配列を有しています。
- 精製済みのプラスミドDNA10μg 注1)をお届けします。
注1)20μg の購入を希望される場合は、別途ご照会ください。 - フレキシブル:TrueORF® タグはPrecisionShuttle™ システムを用いて簡単に変更可能
TrueORF® は、pCMV6-Entryベクターにクローニングされています。PrecisionShuttle™ システムは豊富な品揃えでpCMV-Entryベクターに互換性のあるマルチクローニングサイト(MCS)を有します。制限酵素処理とライゲーション反応を行うだけで、TrueORF® のインサートをトランスファーでき、多様なエピトープタグを有したタンパク質を発現できます。 - 正確:TrueORF® クローンのインサート配列は検証・保証済み
TrueORF® は、high fidelity のポリメラーゼを用いてシークエンスを確認した完全長cDNA 由来のクローンです。 - Transfection ready
サブクローニングやプラスミド精製の必要はありません。TrueORF クローンは、哺乳類細胞でのタンパク質発現に必要とされる全てのエレメント(プロモーター、ポリアデニル化シグナル、薬剤耐性マーカーなど)と共にコンストラクトされています。
*Peptide sequence of the DDK-tag(Flag®): N-DYKDDDDK-C
Flag® is a registered trademark of Sigma-Aldrich

pCMV6-ENTRYベクター
配列はこちら
pcMV6-ENTRY

適用
- 哺乳類細胞でのタグ融合タンパク質の過剰発現
(20種類のタグの組み合わせが可能です) - 過剰発現タンパク質の検出、イメージング
- 過剰発現タンパク質の精製
- タンパク質の相互作用と局在化の解析
- セルフリーシステムでのタンパク質発現
マニュアル
60 種類のタグ付きシャトルベクターに簡単に組換え可
TrueORF® Gold クローンおよびTrueORF® クローンのインサートは、pCMV6 エントリーベクターに組み込まれており、PrecisionShuttle™ システムに組換えできます。
Precision Shuttle™ システムのベクターは、制限酵素処理とライゲーションでインサートを組換えできるようにTrueORF® エントリーベクターと同一のMCS を有しています。TrueORF® エントリーベクターのORF には、5'末端にSgf I、3'末端にMlu I 認識部位があります。この2つの酵素を用いてタグを含まないORF を切り出し、目的のベクターに組み込みます。

PrecisionShuttle™ システムの概略
- EntryベクターをSgfIおよびMluIで酵素消化し、ORF部分を切り出します
- 同様にPrecisionShuttle™システムベクターを酵素消化しライゲーションします
ベクター名 | Tag | 選択マーカー | 品番 | |
---|---|---|---|---|
C末端 | E.coli | Cell | ||
pCMV6-Entry(C-terminal Myc and DDK Tagged) | Myc-DDK | Kanamycin | Neomycin | PS100001 |
pCMV6-Entry2(C-terminal Myc and DDK Tagged) | Myc-DDK | Kanamycin | Neomycin | PS100063 |
ベクター名 | 蛍光 | Tag | 選択マーカー | 品番 | ||
---|---|---|---|---|---|---|
C末端 | N末端 | E.coli | Cell | |||
pCMV6-AC-GFP | Green, dimer | TurboGFP | Ampicillin | Neomycin | PS100010 | |
pCMV6-AN-GFP | Green, dimer | TurboGFP | Ampicillin | Neomycin | PS100019 | |
pCMV6-A-GFP | Green, dimer | Ampicillin | PS100026 | |||
pCMV6-AC-IRES-GFP | Green, dimer | Myc-DDK | Ampicillin | Neomycin | PS100027 | |
pCMV6-AN-RFP | Red, dimer | TurboRFP | Ampicillin | Neomycin | PS100033 | |
pCMV6-AC-RFP | Red, dimer | TurboRFP | Ampicillin | Neomycin | PS100034 | |
pCMV6-AN-YFP | Yellow, dimer | TurboYFP | Ampicillin | Neomycin | PS100035 | |
pCMV6-AC-YFP | Yellow, dimer | TurboYFP | Ampicillin | Neomycin | PS100036 | |
pCMV6-AC-FP602 | Red, dimer | TurboFP602 | Ampicillin | Neomycin | PS100037 | |
pCMV6-AC-FP635 | Far-red, dimer | TurboFP635 | Ampicillin | Neomycin | PS100038 | |
pCMV6-AC-mKate | Far-red, monomer | mKate | Ampicillin | Neomycin | PS100039 | |
pCMV6-AC-mGFP | Green, monomer | mGFP | Ampicillin | Neomycin | PS100040 | |
pCMV6-AC-mRFP | Red, monomer | mRFP | Ampicillin | Neomycin | PS100041 | |
pCMV6-AC-mYFP | Yellow, monomer | mYFP | Ampicillin | Neomycin | PS100042 | |
pCMV6-AC-mBFP | Blue, monomer | mBFP | Ampicillin | Neomycin | PS100043 | |
pCMV6-AC-mCFP | Cyan, monomer | mCFP | Ampicillin | Neomycin | PS100044 | |
pCMV6-AN-FP602 | Red, dimer | TurboFP602 | Ampicillin | Neomycin | PS100045 | |
pCMV6-AN-FP635 | Far-red, dimer | TurboFP635 | Ampicillin | Neomycin | PS100046 | |
pCMV6-AN-mKate | Far-red, monomer | mKate | Ampicillin | Neomycin | PS100047 | |
pCMV6-AN-mGFP | Green, monomer | mGFP | Ampicillin | Neomycin | PS100048 | |
pCMV6-AN-mRFP | Red, monomer | mRFP | Ampicillin | Neomycin | PS100049 | |
pCMV6-AN-mYFP | Yellow, monomer | mYFP | Ampicillin | Neomycin | PS100050 | |
pCMV6-AN-mBFP | Blue, monomer | mBFP | Ampicillin | Neomycin | PS100051 | |
pCMV6-AN-mCFP | Cyan, monomer | mCFP | Ampicillin | Neomycin | PS100052 | |
pCMV6-AC-IRES-GFP-Puro | Green, dimer | Myc-DDK | Ampicillin | Puromycin | PS100059 | |
pTUNE-GFP | Green, dimer | Ampicillin | Neomycin | PS100060 | ||
pCMV6-AN-GFP-C-His | Green, dimer | His | tGFP | Ampicillin | Neomycin | PS100061 |
ベクター名 | 選択マーカー | 品番 | |
---|---|---|---|
E.coli | Cell | ||
pCMV6-AC | Ampicillin | Neomycin | PS100020 |
pCMV6-A-BSD | Ampicillin | Blasticidin | PS100022 |
pCMV6-A-EM7-BSD | Ampicillin/Blasticidin | Blasticidin | PS100023 |
pCMV6-A-Hygro | Ampicillin | Hygromycin | PS100024 |
pCMV6-A-Puro | Ampicillin | Puromycin | PS100025 |
ベクター名 | Tag | 選択マーカー | 品番 | |
---|---|---|---|---|
C末端 | E.coli | Cell | ||
pTUNE Inducible | Myc-DDK | Ampicillin | Neomycin | PS100021 |
pTUNE-GFP | Ampicillin | Neomycin | PS100060 |
ベクター名 | Tag | 選択マーカー | 品番 | ||
---|---|---|---|---|---|
C末端 | N末端 | E.coli | Cell | ||
pCMV6-AC-His | His | Ampicillin | Neomycin | PS100002 | |
pCMV6-AC-Myc | Myc | Ampicillin | Neomycin | PS100003 | |
pCMV6-AC-HA | HA | Ampicillin | Neomycin | PS100004 | |
pCMV6-AC-DDK | DDK | Ampicillin | Neomycin | PS100005 | |
pCMV6-AC-Myc-His | Myc-His | Ampicillin | Neomycin | PS100006 | |
pCMV6-AC-Myc-DDK | Myc-DDK | Ampicillin | Neomycin | PS100007 | |
pCMV6-AC-HA-His | HA-His | Ampicillin | Neomycin | PS100008 | |
pCMV6-AC-DDK-His | DDK-His | Ampicillin | Neomycin | PS100009 | |
pCMV6-AN-His | His | Ampicillin | Neomycin | PS100011 | |
pCMV6-AN-Myc | Myc | Ampicillin | Neomycin | PS100012 | |
pCMV6-AN-HA | HA | Ampicillin | Neomycin | PS100013 | |
pCMV6-AN-DDK | DDK | Ampicillin | Neomycin | PS100014 | |
pCMV6-AN-His-Myc | His-Myc | Ampicillin | Neomycin | PS100015 | |
pCMV6-AN-Myc-DDK | Myc-DDK | Ampicillin | Neomycin | PS100016 | |
pCMV6-AN-His-HA | His-HA | Ampicillin | Neomycin | PS100017 | |
pCMV6-AN-His-DDK | His-DDK | Ampicillin | Neomycin | PS100018 | |
pCMV6-AC-FC | FC | Ampicillin | Neomycin | PS100053 | |
pCMV6-AC-FC-S | FC | Ampicillin | Neomycin | PS100054 | |
pCMV6-AN-FC | FC | Ampicillin | Neomycin | PS100055 | |
pCMV6-AN-FC-S | FC | Ampicillin | Neomycin | PS100056 | |
pCMV6-AC-3DDK | 3DDK | Ampicillin | Neomycin | PS100057 | |
pCMV6-AN-3DDK | 3DDK | Ampicillin | Neomycin | PS100058 | |
pCMV6-AN-GFP-C-His | His | tGFP | Ampicillin | Neomycin | PS100061 |
pCMV6-AN-3HA | 3HA | Ampicillin | Neomycin | PS100066 | |
pCMV6-AC-3HA | 3HA | Ampicillin | Neomycin | PS100067 | |
pCMV6-XL5-DDK-His | DDK-His | Ampicillin | PS100068 |
ベクター名 | Tag(N末端) | 選択マーカー(E.coli) | 品番 |
---|---|---|---|
pEX-N-His-GST | His-GST | Ampicillin | PS100028 |
pEX-N-GST | GST | Ampicillin | PS100029 |
pEX-N-His | His | Ampicillin | PS100030 |
ベクター名 | Tag(C末端) | 選択マーカー(E.coli) | 品番 |
---|---|---|---|
pLenti-C-Myc-DDK | Myc-DDK | chloramphenicol | PS100064 |
pLenti-C-GFP | GFP | chloramphenicol | PS100065 |
■PrecisionShuttle™ RapidShuttling キット
30 分以内にPrecisionShuttle™ ベクターにORF インサートを挿入
様々なディスティネーションベクターに簡単にサブクローニングできるキットです。
<構成内容>
● Shuttle-ready destination vector (pre-digested & dephosphorylated)
● Sgf I (Asis I) and MluI (20 uL at 1U/uL each)、または、Sgf I (Asis I) and RsrII (20 uL at 1U/ uL each)
● 10X Rapid Digestion Buffer
● 10X Rapid Digestion Buffer
● T4 DNA Ligase
● 5X Rapid Ligation Buffer
● Water, nuclease-free
ベクター | 品番 | |
---|---|---|
制限酵素サイト:SgfI-MluI (品名:RapidShuttling Kit(SgfI/MluI)) | 制限酵素サイト:SgfI -RsrII (品名:RapidShuttling Kit(SgfI/RsrII)) |
|
pCMV6-ENTRY | PS200001 | PS300001 |
pCMV6-AC-His | PS200002 | PS300002 |
pCMV6-AC-HA | PS200004 | PS300004 |
pCMV6-AC-DDK | PS200005 | PS300005 |
pCMV6-AC-Myc-His | PS200006 | PS300006 |
pCMV6-AC-HA-His | PS200008 | PS300008 |
pCMV6-AC-DDK-His | PS200009 | PS300009 |
pCMV6-AC-GFP | PS200010 | PS300010 |
pCMV6-AN-His | PS200011 | PS300011 |
pCMV6-AN-Myc | PS200012 | PS300012 |
pCMV6-AN-HA | PS200013 | PS300013 |
pCMV6-AN-DDK | PS200014 | PS300014 |
pCMV6-AN-His-Myc | PS200015 | PS300015 |
pCMV6-AN-His-DDK | PS200018 | PS300018 |
pCMV6-AN-GFP | PS200019 | PS300019 |
pCMV6-AC | PS200020 | PS300020 |
pCMV6-AC-IRES-GFP | PS200027 | PS300027 |
pCMV6-AN-RFP | PS200033 | PS300033 |
pCMV6-AC-RFP | PS200034 | PS300034 |
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