記事ID ： 2164

赤血球のファゴサイトーシスをハイスループット解析 CytoSelect™ 赤血球ファゴサイトーシスアッセイ

メーカー名：Cell Biolabs, Inc.

これまでの赤血球を用いたファゴサイトーシスアッセイでは細胞数を計測する必要がありました。本キットは独自の赤血球基質を用いてプレートリーダーで検出するため、細胞数計測の必要がなく、定量的かつ肺スループットの方法を提供します。TRLリガンドやファゴサイトーシス活性化剤、阻害剤のスクリーニングにお使いいただけます。

CytoSelect™ ファゴサイトーシスアッセイシリーズ

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特長

赤血球に特異的なファゴサイトーシスアッセイ
手作業による細胞数計測は不要
96 wellプレートでのハイスループットアッセイ
フローサイトメトリーなどの大型機器は不要

検出波長

比色検出 : OD450 nm

構成内容

オプソニン化試薬（ウサギ抗ヒツジ赤血球細胞IgG）：20 μL
洗浄バッファー（10 ×）：10 mL
溶解バッファーA：20 mL
溶解バッファーB：150 mL
基質試薬（100 ×）：150 mL
食細胞阻害剤（Cytochalasin D）

測定原理

図1 測定原理

使用例

図2　Cytochalasin D によるマクロファージ（Raw264.7）細胞のファゴサイトーシス阻害
マクロファージ Raw264.7 (20,000 cell/well) を 96 wellプレートに播種し、一晩培養した。Raw264.7 を Cytochalasin D で 37 ℃、1時間反応させた後、50：1 の割合で IgGオプソニン化ヒツジ赤血球を加えた。30 分後にファゴサイトーシスを停止し、プロトコールに従って貪食された赤血球を測定した。
（A）非オプソニン化RBC + Raw264.7細胞
（B）オプソニン化RBC + Raw264.7 細胞
（C）オプソニン化RBC + Cytochalasin D（2μM）処理 Raw264.7 細胞