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AAT Bioquest NEWS 2021年 6月号_4 高感度なゲル中のタンパク質染色剤： ProLite™ Orange

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メーカー名：AAT Bioquest, Inc. (Former ABD Bioquest, Inc.)

図．ProLite™OrangeとCoomassieの比較。
BSAスタンダードを3倍ずつ段階希釈したものを、NuPAGE? 4-12% BisTrisゲルで分離し、標準プロトコールに従い、以下の方法で染色した。
A) Prolite™ Orange (品番：18000, 18001)、または
B) Coomassie brilliant blue (CBB)で染色した。
ProLite™ Orangeで染色したゲルは、SYPRO Orangeフィルターを用いて写真撮影した。CBBで染色したゲルは、光学フィルターなしの透過白色光で撮影した。

ゲル中のタンパク質を検出する一般的な方法には、クーマシー染色、銀染色、亜鉛染色、蛍光色素染色などがあります。
全タンパク質のプロファイリングにはクーマシー色素と銀染色が主流ですが、蛍光染色法はより高い感度があります。

Prolite™ Orange (品番：18000, 18001) は、ゲルでの全タンパク質検出用の、高感度な蛍光染色剤で、すぐに使用することができます。これは従来の銀染色と同等以上の感度を有しています。

染色されたタンパク質は、一般的なUVまたはブルーライトのトランスイルミネーター、または適切なフィルターやレーザーを備えたイメージング機器で観察することができます。

Resources & Information

表．各染色法の特徴
染色法	感度	互換性のあるダウンストリームアプリケーション
CBB染色	5-25ng	質量分析ウェスタンブロットシーケンシング
銀染色	0.25-0.5ng	質量分析
亜鉛染色	0.25-0.5ng	質量分析ウェスタンブロット
蛍光色素を用いた染色	0.25-0.5ng	質量分析ウェスタンブロット