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研究用

AAT Bioquest NEWS 2021年 7月号_2 TUNELアッセイによる後期アポトーシスの解析

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図1.TUNEL染色によって定義された骨髄中のアポトーシス前立腺癌(PCa)細胞。
PCa細胞はパンサイトケラチン(緑) で示されている。TUNELシグナルはCell Meter™ Live Cell TUNEL Apoptosis Assay Kit (品番:22844)を用いて赤色で示されている。(Yumoto et al., Sci Rep . 2016 Nov 7;6:36520. doi: 10.1038/srep36520.)

活性化されたエンドヌクレアーゼによって引き起こされる核内DNAの断片化は、アポトーシスの生化学的な特徴であると一般に考えられています。
これらのDNA鎖切断を含む細胞は、Terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling (TUNEL) アッセイで識別することができます。
AAT Bioquest社のCell Meter™ では、細胞内のアポトーシスによるDNA断片化を検出・定量するための必要な試薬とプロトコルが含まれています。標識方法は、独自の蛍光色素修飾デオキシウリジン5'-三リン酸ヌクレオチドを、TdTを用いてDNAの3'OH端に触媒的に組み込みます。標識されたDNA断片は、フローサイトメトリーで定量したり、蛍光顕微鏡で直接可視化したりすることができ、ライブセルアッセイでは蛍光マイクロプレートリーダーも使用することができます。

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aat-bioquest-news-202107-2-abd_02.png図2.ホルマリン固定パラフィン包埋(FFPE)組織を用いたTUNELアッセイ。
ヒト肺腺癌の切片をDNAseで処理し、その結果生じたDNA鎖切断をCell Meter™ Fixed Cell and Tissue TUNEL Apoptosis Assay Kit(緑)(品番:22851)で画像化したもの。
細胞核はNuclear Blue™ DCS1(青)(品番:17548)で染色された。

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商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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