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青/緑/赤の蛍光を利用した測定キット Amplite™ カスパーゼ 3/7 蛍光アッセイ

メーカー名：AAT Bioquest, Inc. (Former ABD Bioquest, Inc.)

Amplite™ カスパーゼ 3/7 蛍光アッセイは、細胞抽出液や精製酵素調製液中のカスパーゼ3/7の活性を、蛍光マイクロプレートリーダーやフルオロメーターで測定することができます。青色・緑色・赤色の３種類の蛍光アッセイキットをご用意しています。

背景

カスパーゼはアポトーシスとシグナル伝達における重要な役割を果たします。カスパーゼ3/7(CPP32/apopain)活性はアポトーシスの開始にとって重要です。また、Caspase3/7は薬剤スクリーニングターゲットとしても認知されています。カスパーゼ阻害剤は抗癌と他の臨床学での可能性も持っています。 Caspase3/7には、ペプチド配列Asp-Glu-Val-Asp(DEVD)での基質選択性があると立証されました。

Amplite™ カスパーゼ 3/7 蛍光(青色)アッセイキット

本キットは、Caspase3/7活性の蛍光発光インディケータとしてAc-DEVD-AMCを使用します。 AMCペプチドはほとんどが非蛍光となります。カスパーゼ3/7によりAMCペプチドが切断されると、非常に強い蛍光のAMCが発生し、Ex=340-350nmの励振で440-460nmの蛍光発光でモニターできます。蛍光マイクロプレートリーダーや蛍光光度計で連続的にカスパーゼ3/7活性を測定することができます。

【構成内容】
● AMCカスパーゼ基質
● Ac-DEVE-CHOカスパーゼインヒビター
● DTT
● バッファー

図1. Jurkat細胞におけるカスパーゼ3/7活性の検出を行った。 Jurkat細胞は、黒色96wellコスタープレートを用い、同日に8万セル/well/90μLで細胞を蒔いた。細胞は、5時間のカンプトテシン20μM処理の有無、または、10分間のカスパーゼ阻害剤 AC-DEVD-CHO 5μM処理有無にかかわらず使用。測定条件は、室温で1時間後インキュベートし、蛍光強度をEx/Em=350/450nmとして測定を行った。

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
Amplite^(R) Fluorimetric Caspase 3/7 Assay Kit Blue Fluorescence	ABD	13502	1 KIT [500 Tests]	￥72,000

Amplite™ カスパーゼ 3/7 蛍光(緑色)アッセイキット

本キットは、カスパーゼ3/7活性の蛍光インディケーターとして(Z-DEVD)2 R110を使用しています。R110基質由来のカスパーゼ基質は、様々なカスパーゼ活性の蛍光検出に使用される基質の中で最も鋭敏な指標となります。R110ペプチドは、無色で非蛍光です。カスパーゼにより分裂したR110ペプチドは、488nmの励振で510-530nmの蛍光発光でモニターできる最も一般的な励振光源を発生させます。R110加水分解の誘発により蛍光増加したカスパーゼは、カスパーゼ活性に比例します。
蛍光マイクロプレートリーダーや蛍光光度計で連続的にカスパーゼ3/7活性を測定することができます。多くの研究室でカスパーゼ3/7インヒビターのスクリーニングにこのキットが使用されています。

【構成内容】
• 110（Z-DEVD）₂カスパーゼ基質
• Ac-DEVE-CHOカスパーゼインヒビター
• DTT
• バッファー

図2. Jurkat細胞におけるカスパーゼ3/7活性の検出した。 Jurkat細胞は、黒色96wellコ-スタープレートを用い、同日に8万セル/well/90μLで細胞を蒔いた。細胞は、5時間のカンプトテシン20μM処理の有無、または、10分間のカスパーゼ阻害剤 AC-DEVD-CHO 5μM処理有無にかかわらず使用。測定条件は、室温で1時間後インキュベートし、蛍光強度をEx/Em=490/525nmとして測定を行った。

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
Amplite^(R) Fluorimetric Caspase 3/7 Assay Kit Green Fluorescence	ABD	13503	1 KIT [500 Tests]	￥72,000

Amplite™ カスパーゼ 3/7 蛍光(赤色)アッセイキット

【インディケーター】　 Z-DEVD-ProRed™

【測定波長（Ex（nm）/Em（nm））】　　535/620

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
Amplite^(R) Fluorimetric Caspase 3/7 Assay Kit Red Fluorescence	ABD	13504	100 TEST	￥84,000

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
Cell Meter^TM Caspase 3/7 Activity Apoptosis Assay Kit Blue Fluorescence	ABD	22795	200 TEST	￥48,000
Cell Meter^TM Caspase 3/7 Activity Apoptosis Assay Kit Green Fluorescence	ABD	22796	200 TEST	￥48,000
Ac-DEVD-AFC	ABD	13401	5 MG	￥24,000
Ac-DEVD-AMC	ABD	13402	5 MG	￥24,000
FITC-C6-DEVD-FMK	ABD	13406	1 MG	￥120,000
(Ac-ANW)2R110	ABD	13455	1 MG	￥48,000
(Ac-IETD)2-R110	ABD	13431	1 MG	￥24,000
(Z-DEVD)2-R110	ABD	13430	1 MG	￥24,000
Suc-LLVY-Aminoluciferin	ABD	13452	1 MG	￥48,000