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記事ID ： 42785
研究用

収量最大3mg/mL!　工業用スケールまで対応可能! ALiCE®無細胞タンパク質発現キット

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メーカー名：LenioBio GmbH

ALiCE®は、真核生物系無細胞タンパク質発現キットです。 ALiCE®はFraunhofer社およびDow AgroSciences社にて活用されていた特許技術を組み合わせたものであり、小麦胚芽、CHO細胞、HeLa細胞、大腸菌等を用いた既存の無細胞タンパク質発現方法よりも高い発現量が得られます。

使用目的

ALiCE®は、液胞が枯渇したタバコ細胞溶解物を利用した無細胞タンパク質合成キットです。 本キットには、in vitroでの転写に必要なRNAポリメラーゼ、NTPといったすべての因子および翻訳反応に必要なリボソーム、翻訳開始/伸長因子、tRNAなどが含まれています。 単一のチューブ内でプラスミドDNAをALiCE®反応ミックスと混合するだけでRNA転写と翻訳の両方が行われ、約48時間で最大3 mg/mLの目的タンパク質を回収することが可能です。
本キットには、目的タンパク質に応じて使用できる2つの発現ベクターpALiCE01およびpALiCE02が付属しています。これらは、ALiCE®発現システムと組み合わせて使用すると、優れたタンパク質収量が得られるように特別に調整されています。

    【付属の発現ベクター】
  • pALiCE01…ALiCE®サイトゾル画分での発現に使用できます。
  • pALiCE02…シグナルペプチドによりオルガネラ様構造のミクロソームへ移行して、フォールディングや翻訳後修飾されます。

ALiCE®の使用用途としては次のようなものが挙げられます。

  • 標的タンパク質の大規模な発現
  • 標的タンパク質の特性評価
  • タンパク質の最適化
  • 変異スクリーニング
  • タンパク質間相互作用
  • 発現分析
  • タンパク質局在解析
  • タンパク質構造解析
  • 翻訳後修飾アッセイ
  • メタボロミクス
  • 除草剤のスクリーニング　　など

特長

  • 高収量：最大3 mg/mLのタンパク質を合成できます。
  • 高コストパフォーマンス：同程度の価格で最大30倍のタンパク質収量を得られます。 *1
  • 迅速・簡便：48時間、ワンステップの反応工程で目的のタンパク質の合成が可能です。
  • 柔軟：細胞毒性タンパク質や構造が複雑な「生産が難しい」タンパク質を発現することが可能です。
  • アクティブなミトコンドリアによるエネルギー供給
  • 500種類を超えるタンパク質を発現評価済み

    *1：既存の無細胞タンパク質発現系と比較して

LNO_AL0103200_01

 

発現タンパク質

フルサイズのM12抗体の発現

LNO_AL0103200_02

  • タンパク質発現量：0.14 mg/mL
    （ *ALiCE®旧バージョン使用時）
    （フォールディングのためにミクロソームへ誘導）
  • タンパク質の構造：ジスルフィド結合を含むヘテロ四量体
  • 機能性：ELISAテストで検証済み
 

グルコースオキシダーゼの発現

LNO_AL0103200_03

  • タンパク質発現量：1 mg/mLのタンパク質
    （フォールディングのためにミクロソームへ誘導）
  • タンパク質の構造：ジスルフィド結合を含むホモダイマー
  • 機能性：比色アッセイで活性を確認済み
 

増強黄色蛍光タンパク質（eYFP）の発現

LNO_AL0103200_04

  • タンパク質発現量：3 mg/mL
  • タンパク質の構造：ジスルフィド結合を含まないモノマー分子
  • 機能性：活性を蛍光アッセイで確認済み
 

eYFPタグ付き膜タンパク質HB-EGFの発現

LNO_AL0103200_05

  • タンパク質の特徴：
    ヘパリン結合性上皮成長因子-eYFP
    断片化のわずかな兆候を伴うもののフルサイズのタンパク質を発現
    ミクロソーム膜に組み込まれたタンパク質（左図矢印参照）を確認済み
 

ALiCE® Cell-Free Protein Expression Mini Kit

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
ALiCE(R) Cell-Free Protein Expression Mini Kit詳細データ LNO AL0103050 1 KIT
[6×50UL] 		￥108,000

ALiCE® Cell-Free Protein Expression Midi Kit

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
ALiCE(R) Cell-Free Protein Expression Midi Kit詳細データ LNO AL0103200 1 KIT
[6×200UL] 		￥407,000

ALiCE® Cell-Free Protein Expression Maxi Kit

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
ALiCE(R) Cell-Free Protein Expression Maxi Kit詳細データ LNO AL0103500 1 KIT
[6×500UL] 		お問い合わせ

商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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