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記事ID : 35293
研究用

溶液除去や分離操作不要で高感度に検出Amplite™ 蛍光NADアッセイ

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Amplite™ 蛍光NADアッセイは、生体サンプル中のNAD+を高感度かつ迅速に検出します。

背景

原理

このアッセイでは、ABD社独自のQuest Fluor™NADプローブを利用してNA+を直接測定します。 NAD+と結合すると、Quest Fluor™NADは、蛍光マイクロプレートリーダー(Ex / Em = 420/480 nm)で測定される蛍光シグナルを生成します。

特長

  • HTSアプリケーションに最適な「mix and read」フォーマット
  • 96ウェルまたは384ウェルのマイクロタイタープレートに対応
  • NADHに対する反応が最小
  • 高感度:30 nMのNADを検出

構成内容

  • Component A: Quest Fluor™ NAD Probe, 1 bottle (5 mL)
  • Component B: Assay Solution, 1 bottle (5 mL)
  • Component C: Enhancer Solution, 1 bottle (3.5 mL)
  • Component D: NAD Standard, 1 vial (332 µg)

プロトコール概要

  1. NADスタンダード及びテストサンプルの調整
  2. Quest Fluor™ NAD プローブの添加
  3. アッセイ試薬の添加
  4. 室温で10-20分インキュベート
  5. エンハンサー試薬の添加
  6. 室温で10-20分インキュベート
  7. 蛍光強度を420/480 nm で測定

製品データ

NAD用量反応の測定
図1. Amplite™ 蛍光NADアッセイキットを用いたNAD用量反応の測定
96ウェルブラック/ソリッドボトムプレート使用
分析機器Germiniマイクロプレートリーダー(Molecular devices)
A:NAD標準曲線(インキュベーション:20分/検出限界:30 nM), (n=3)
B:NAD応答とNADH応答の比較
C:100 µM NADH存在下でのNAD標準曲線(インキュベーション:20分)
0.3%(〜300 nM)のNAD(NADHから還元された)を検出(n=3)

Amplite™ 蛍光NADアッセイ

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
AmpliteTM Fluorimetric NAD Assay Kit *Blue Fluorescence*詳細データ ABD 15280 200 TEST
¥72,000

商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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