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第二世代、第三世代のパッケージングシステムをご用意レンチウイルスパッケージングミックス

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メーカー名：Applied Biological Materials Inc.

本製品は、レンチウイルス粒子を作製するために必要なレンチウイルスベクターのミックス品です。
レンチウイルス粒子を作製する際には、下記3種類のコンポーネントが必要です。

目的のインサート配列（cDNA、shRNA、miRNA）を含むレンチウイルスベクター
必須ウイルス構造タンパク質をすべて含むパッケージングベクター（1もしくは2種類）
水疱性口内炎ウイルスGタンパク質（Vesicular Stomatitis Virus Glycoprotein：VSV-G）を発現するエンベロープベクター

本ベクターミックスと目的のインサート配列を含むレンチウイルスベクターを、トランスフェクション試薬と併せて培養細胞の培地に加えることで、目的のウイルス粒子を作製することができます。

※第二世代のレンチウイルスベクター（TAT依存性）では、第三世代のパッケージングシステムにはご使用いただけません。Applied Biological Materials社で販売されているレンチウイルス発現ベクターはすべてTAT非依存性であり、5’LTR上流にRSVプロモーターのキメラ型を持つ第三世代のベクターです。

APB社レンチウイルスシステムについて FAQ

特長

	第二世代ウイルスパッケージングミックス	第三世代ウイルスパッケージングミックス
TAT依存性	有	無
構成内容	pLenti-P2Aベクター pLenti-P2Bベクター	pLenti-P3Aベクター pLenti-P3Bベクター pLenti-P3Cベクター
ベクターマップ
その他	タイター：高	安全性：高

第二世代レンチウイルスパッケージングシステム

一般的に、野生型の5’LTRを持つレンチウイルスベクターはTAT依存的に活性化するため、第二世代パッケージングシステムが必要です。その一方で第二世代レンチウイルスパッケージングミックスは、キメラ型の5‘LTRを持つ第三世代のレンチウイルス発現ベクターの作製にもご使用いただけます。

第二世代パッケージングシステムでは、HIV gag、pol、rev、tat遺伝子を一つのパッケージングベクターで発現し、エンベロープタンパク質であるVSV-Gを別のパッケージングベクターで発現します。通常、大きなインサートの場合には第三世代パッケージングミックスと比較して第二世代パッケージングミックスがより高タイターになります。品番：LV003のベクターは、ウイルスの補助遺伝子（vpr、vif、vpu、nefなど）の配列をすべて取り除いており、エンベロープ遺伝子もまたウイルスゲノムから欠損しています。欠損部にはパッケージングプラスミドから供給された偽型VSV-Gエンベロープ遺伝子が組み込まれます。パッケージングウイルスにはVSV-G遺伝子の産生に関する遺伝子情報は含まれません。

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
2nd Generation Packaging System Mix	APB	LV003	200 UL	￥82,000

第三世代レンチウイルスパッケージングシステム

第三世代パッケージングシステムでは、レンチウイルスrev遺伝子を他の構造遺伝子とは独立したベクターでご用意しており、さらに複製能を持つウイルス粒子にベクターの逆組換えが起こらないよう設計することで、安全性を最大限に高めています。第三世代レンチウイルスパッケージングミックスでは、キメラ型の5’LTRを持つレンチウイルス発現ベクターを使っており、HIVプロモーターをCMVまたはRSVに置換することでTAT依存性をなくしています。

第三世代パッケージングシステムでは、gag/pol、rev、エンベロープタンパク質がそれぞれ異なるパッケージングベクターで発現します。またtatは発現しません。第三世代レンチウイルスシステムは第二世代よりも安全性が高いとされていますが、機能的なレンチウイルス粒子を作製するためには4つの異なるベクターをすべて導入する必要があり、扱いが難しい一面があります。