記事ID ： 44007

説得力のあるBDNF WBデータの為に BDNF/proBDNF ウェスタンブロット用コントロール

メーカー名：Alomone Labs

#PCP-B250(BDNF)、及び#PCP-B257(proBDNF)は、大腸菌由来の精製済みリコンビナントタンパク質で、すぐにウェスタンブロットのポジティブコントロールとして使用することができます。本製品は、ウェスタンブロットの抗体が期待通りワークしているかを確認することができ、且つターゲットタンパク質の予想分子量を可視化することができます。

背景

脳由来神経栄養因子(BDNF)は、神経成長因子(NGF)、ニューロトロフィン-3(NT-3)およびニューロトロフィン-4/5(NT-4/5)を含むニューロトロフィンファミリーのメンバーです。すべてのニューロトロフィンは、プロニューロトロフィン前駆体として合成され、その後、細胞内輸送経路内でプロセシングされてプロニューロトロフィンとなり、さらにプロセシングを受けて成熟型となります。BDNFの成熟型は分泌可能な、非共有結合の安定したホモダイマーです。
最近まで、ニューロトロフィンのプロドメインの機能的役割は、成熟タンパク質の正しい折り畳みと、ニューロトロフィンを構成的または制御的な分泌経路に振り分けることであると考えられていました。しかし、未切断のプロニューロトロフィン前駆体が細胞から分泌される可能性が示唆されたことから、それらが様々な生物学的機能を媒介している可能性があると考えられています。
BDNFのプロドメインの機能的重要性は、プロドメインの66位のバリンがメチオニンに置換された多型が、ヒトの記憶障害や海馬の機能異常と関連していることを示唆した研究で示されました。また別の最近の研究では、海馬のシナプスの構造と機能に長期的な変化をもたらすプロセスである後期長期増強 (L-LTP) の確立には、プラスミンによるproBDNFの成熟BDNFへの細胞外切断の制御が必要であることが示され、またアルツハイマー病患者の脳ではproBDNFが減少していることが示されています。

特長

商品名	BDNFウェスタンブロット用コントロール(品番：PCP-B250) proBDNF ウェスタンブロット用コントロール(品番：PCP-B257)
形態	凍結乾燥粉末。DDWで溶解後の溶媒は(Laemmli Bufferx1)となります。
溶解方法	20 µLのDDWで溶解。
溶解後の濃度	いずれも5 ng/µL。トータルでは100 ngが含まれています。これはSDS-PAGE2レーン分に十分な量です。

適用例

ウエスタンブロット

図1. BDNF Positive Controlを用いたウエスタンブロット解析
レーン 1, 2：BDNF Positive Control for Western Blot(#PCP-B250) を各レーン10 µL（50 ng に相当）アプライしSDS-PAGE後、Anti-BDNF Antibody (#ANT-010)(1:200) を用いてウェスタンブロットを行った。

図2. proBDNF Positive Controlを用いたウエスタンブロット解析
レーン 1, 2：proBDNF Positive Control for Western Blot(#PCP-B257) を各レーン10 µL（50 ngに相当）アプライしSDS-PAGE後、Anti-proBDNF Antibody (#ANT-006)(1:200) を用いてウェスタンブロットを行った。

参考文献

Lee R. et al. (2001) Science 294,1945.
Egan, M.F. et al. (2003) Cell 112, 257.
Pang, P.T. et al. (2004) Science 306, 487.
Michalski, B. et al. (2003) Mol. Brain Res. 111, 148.

BDNF/proBDNF ウェスタンブロット用コントロール

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
BDNF Positive Control for Western Blot	ALO	PCP-B250	1 UNIT	￥61,000
proBDNF Positive Control for Western Blot	ALO	PCP-B257	1 UNIT	￥61,000

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