優れた形質転換効率を発揮するよう設計されたSMOBIO 社のBL21(DE3)株のケミカルコンピテントセルです。T7 ベースのベクターを用いたタンパク質発現に適しています。用途に合わせて、標準的な形質転換プロトコールの他に、時間短縮版の簡易プロトコールもご利用いただけます。
構成内容
- Champion™ コンピテントセル
- pUC19 コントロールプラスミド(5 µL, 10-4 µg/µL)
遺伝子型と最大形質転換効率遺伝子型と最大形質転換効率
- F' ompT hsdSaβ (rβ-mβ-) dcm gal λ (DE3)
- 最大形質変換効率 : 107 cfu/µg
プロトコール
プロトコールの選択方法
- 単純で迅速な形質転換の場合…時間短縮版簡易プロトコール
- 大きなプラスミド(>6 kb)またはアンピシリン以外のセレクション使用の場合…標準プロトコール
時間短縮版簡易プロトコール
- −70℃で保存したコンピテントセルを手(体温)で10 〜20 秒間すばやく解凍し、解凍したコンピテントセルを氷上に置く。
- DNA(ライゲーション産物など)を1に加える。この時、DNA の量がコンピテントセルの体積の10% 未満になるよう注意する。
- 1 秒間ボルテックスするか、指でチューブを軽くたたいてよく撹拌する。
- 氷上で0 〜10 分間インキュベートする。(氷上でのインキュベーションにより、形質転換効率がわずかに向上する。)※
- コンピテントセル / DNA 混合物を予熱した(室温から37℃)選択的LB 寒天プレート (LB + 抗生物質)にプレーティングする。
- コロニーが分析に適した状態になるまで、プレートを37℃でインキュベートする。
標準プロトコール
※標準プロトコールの場合には上記プロトコールに加えて、手順4と5の間に下記の追加操作が必要となります。
- コンピテントセルに45℃のヒートショックを45〜90秒加える。
- 氷上で1〜5分間インキュベートする。
- コンピテントセルに900µlのLBかSOCを加え、37℃、200 rpmで攪拌しながら30〜60分間インキュベートする。
Champion™ 21 BL21(DE3) コンピテントセル
品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
---|---|---|---|---|
BL21(DE3) competent cell, ChampionTM21, Escherichia coli ![]() |
SMO | CC2104 | 24 RXN |
¥16,000 |
BL21(DE3) competent cell, ChampionTM21, Escherichia coli ![]() |
SMO | CC2102 | 80 RXN |
¥41,000 |
【関連商品】Champion™ E. coli Transformation Kit
形質転換効率の高いケミカルコンピテントセルを短時間で、作製を可能とする培地やバッファーのセット品です。
コンピテントセルは、対数増殖期の培養液、静止期の培養液、ならびにプレート上で培養したコロニーからでも作製可能です。本キットでは洗浄に要する時間を短縮し、様々な培養段階の大腸菌から調製可能なことでクローニング実験に幅を持たせています。調製したコンピテントセルは即使用可能で、マイナス70℃で1 年保存可能です。
簡略化され短時間で調製可能なうえ、その形質転換効率は108 〜109 cfu/µg transformants/µg of pUC19 プラスミドDNA です(大腸菌の種類に依存します)。
特長
- 対数増殖期の培養液、静止期の培養液、ならびに寒天培地等、様々な培養段階の大腸菌から調製可能
- わずか数ステップで調製可能
- 高効率 : 〜109 cfu/µg
- 多くの大腸菌株に適応(DH5α、BL21、JM109 等)
構成品
- Champion™ CC バッファー
- SMO-Broth™
- pUC19 コントロールプラスミド
品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
---|---|---|---|---|
ChampionTM E. coli Transformation Kit![]() |
SMO | CK1000 | 200 RXN |
¥20,000 |
【関連商品】Champion™ コンピテントセル
品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
---|---|---|---|---|
DH5α competent cell, ChampionTMDH5α high, Escherichia coli ![]() |
SMO | CC5202 | 80 RXN |
¥27,000 |
DH5α competent cell, ChampionTMDH5α high, Escherichia coli ![]() |
SMO | CC5204 | 24 RXN |
¥9,200 |
JM109 competent cell, ChampionTM109 high, Escherichia coli ![]() |
SMO | CC0202 | 80 RXN |
¥27,000 |
JM109 competent cell, ChampionTM109 high, Escherichia coli ![]() |
SMO | CC0204 | 24 RXN |
¥9,200 |
BL21(DE3) competent cell, ChampionTM21, Escherichia coli ![]() |
SMO | CC2102 | 80 RXN |
¥41,000 |
BL21(DE3) competent cell, ChampionTM21, Escherichia coli ![]() |
SMO | CC2104 | 24 RXN |
¥16,000 |
商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。
※ 表示価格について