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Rockland社ブロッキングバッファー～選択ガイド～

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メーカー名：Rockland Immunochemicals, Inc.

免疫学的アッセイでは、正確で信頼性の高い結果を得るには、適切なブロッキングバッファーを選択することが重要です。
ブロッキングバッファーは、ウェスタンブロッティングなどのアッセイにおけるバックグラウンドノイズの一般的な原因である非特異的結合を低減する上で重要な役割を果たします。この非特異的結合により真のシグナルがわかりにくくなり、不正確な解釈につながります。適切に選択されたブロッキングバッファーは、バックグラウンドの干渉を最小限に抑えてアッセイの感度を高め、それによってシグナル/ノイズ比を改善します。これは、少量のタンパク質を検出するために不可欠です。

Rockland社のブロッキングバッファーは、抗体と抗原を安定化しつつ非特異的相互作用を減らすように設計されており、より正確な結果を得ることができます。
アッセイに最適なブロッキングバッファーの選択を支援するために、ブロッキングバッファーの選択ガイドを作成しました。このガイドでは、最適な結果を得るため最も効果的なブロッキングバッファーを確実に選択できるように、推奨事項と注意事項を説明しています。

ブロッキングバッファーの原理
BSA、カゼイン、ミルクタンパク質などのブロッキング剤は、メンブレン、スライド、ウェルなどの表面上の非特異的結合部位をブロックすることでアッセイのバックグラウンドノイズを低減します。これにより、非特異的抗体の結合を防ぎ、結果の精度を高めます。

品名	推奨用途	アプリケーションノート	注意事項
Blocking Buffer for Fluorescent Western Blotting	蛍光ウェスタンブロッティング ELISA, IF, IHC, マイクロアレイ, マルチプレックス	Ready-to-use 溶液です。蛍光ウェスタンブロッティングで使用するために設計されていますが、蛍光標識を使用する他のイムノアッセイでも役立ちます。	チメロサールが含まれています。チメロサールフリーのオプションについては、Blocking Buffer (10X) for Fluorescent Western Blotting (Thimerosal Free) を参照してください。
Blocking Buffer (2X) for Fluorescent Western Blotting	蛍光ウェスタンブロッティング ELISA, IF, IHC, マイクロアレイ, マルチプレックス	2倍濃縮溶液です。蛍光ウェスタンブロッティングで使用するために設計されていますが、蛍光標識を使用する他のイムノアッセイでも役立ちます。	チメロサールが含まれています。チメロサールフリーのオプションについては、Blocking Buffer (10X) for Fluorescent Western Blotting (Thimerosal Free) を参照してください。
Blocking Buffer for Fluorescent Western Blotting (Thimerosal Free) 10-Pack	蛍光ウェスタンブロッティング ELISA, IF, IHC, マイクロアレイ, マルチプレックス	Ready-to-use 溶液です (10 pack)。安全性と環境への影響が重要視される施設では、チメロサールフリーのブロッキングバッファーが好まれることが多いです。
Blocking Buffer (10X) for Fluorescent Western Blotting (Thimerosal Free)	蛍光ウェスタンブロッティング ELISA, IF, IHC, マイクロアレイ, マルチプレックス	10倍濃縮溶液です。安全性と環境への影響が重要視される施設では、チメロサールフリーのブロッキングバッファーが好まれることが多いです。
BlockOut® Universal Blocking Buffer for Western Blotting	WB	ウェスタンブロッティング用のユニバーサルブロッキングバッファーです。発色ラベル、化学発光ラベル、蛍光ラベル用に特別に設計されています。リン酸特異的抗体を使用する場合に推奨されます。
BlockOut® (2X) Universal Blocking Buffer for Western Blotting	WB	2倍濃縮溶液であり、ウェスタンブロッティング用のユニバーサルブロッキングバッファーです。発色ラベル、化学発光ラベル、蛍光ラベル用に特別に設計されています。リン酸特異的抗体を使用する場合に推奨されます。
Blocking Buffer for Immunohistochemistry (Serum and Azide Free)	IHC	基質との免疫酵素反応を使用して検出が行われる免疫組織化学染色用に設計されています。この製品は、IHC 検出試薬の非特異的染色を特異的に阻害します。
Normal Goat Serum (NGS)	WB, ELISA, IF, IHC	ヤギで生成された一次抗体を用いるイムノアッセイで使用します。
Normal Horse Serum (NHS)	WB, ELISA, IF, IHC	ウマで生成された一次抗体を用いるイムノアッセイで使用します。
Normal Mouse Serum (NMS)	WB, ELISA, IF, IHC	マウスで生成された一次抗体を用いるイムノアッセイで使用します。
Normal Rabbit Serum (NRS)	WB, ELISA, IF, IHC	ウサギで生成された一次抗体を用いるイムノアッセイで使用します。
Normal Rat Serum (NRS)	WB, ELISA, IF, IHC	ラットで生成された一次抗体を用いるイムノアッセイで使用します。
Normal Sheep Serum (NSS)	WB, ELISA, IF, IHC	ヒツジで生成された一次抗体を用いるイムノアッセイで使用します。
Bovine Serum Albumin 30% Solution	ELISA, WB, IHC	BSA ブロッキング溶液では、抗体がビオチンおよび AP で標識されていることが好ましいです。
Bovine Serum Albumin - Fraction V	ELISA, WB, IHC	BSA ブロッキング溶液では、抗体がビオチンおよび AP で標識されていることが好ましいです。	BSA は溶解が難しいことで知られているため、Rockland 社のBovine Serum Albumin 30% Solution を使用し、さらに希釈することで時間を節約することができます。
ELISA Microwell Blocking Buffer with Stabilizer	ELISA	抗原、抗体、またはその他のリガンドでコーティングされたマイクロウェルをブロックします。乾燥を防ぎ、プレートを安定させるように設計されています。
Blotto A Pre-Mixed	WB, ELISA	汎用ブロッキング試薬です。
Blotto B Pre-Mixed	WB, ELISA	リン酸特異的抗体が使用される場合の汎用ブロッキング試薬です。
10X BBS Fish Gel Concentrate	WB, ELISA, IHC, IF, マルチプレックス	Fish gel は、脱脂粉乳や BSA などの従来のブロッキング試薬よりも哺乳動物由来の抗体と交差反応する可能性が低いです。	AP標識抗体の場合は、代わりに 10X TBS Fish Gel Concentrate または 10X BBS Fish Gel Concentrate バッファーを使用してください。
10X PBS Fish Gel Concentrate	WB, ELISA, IHC, IF, マルチプレックス	Fish gel は、脱脂粉乳や BSA などの従来のブロッキング試薬よりも哺乳動物由来の抗体と交差反応する可能性が低いです。	AP標識抗体の場合は、代わりに 10X TBS Fish Gel Concentrate または 10X BBS Fish Gel Concentrate バッファーを使用してください。
10X TBS Fish Gel Concentrate	WB, ELISA, IHC, IF, マルチプレックス	Fish gel は、脱脂粉乳や BSA などの従来のブロッキング試薬よりも哺乳動物由来の抗体と交差反応する可能性が低いです。
1X PBS, pH 7.2 Buffer with 1% Casein	WB	カゼインを含むブロッキングバッファーは、無脂肪乳や BSA を含むバッファーよりもバックグラウンドが低い場合があります。カゼインは、ビオチン-アビジン複合体を使用するアプリケーションに推奨されます。	AP 標識抗体の場合は、代わりに 1X TBS, pH 7.8 Buffer with 1% Casein を使用してください。
1X TBS, pH 7.8 Buffer with 1% Casein	WB	カゼインを含むブロッキングバッファーは、無脂肪乳や BSA を含むバッファーよりもバックグラウンドが低い場合があります。カゼインは、ビオチン-アビジン複合体を使用するアプリケーションに推奨されます。
Blocking Buffer Sampler Kit	蛍光ウェスタンブロッティング ELISA, IF, IHC, マイクロアレイ, マルチプレックス	様々な種類のイムノアッセイ用のブロッキングバッファーのセットです。

ブロッキングバッファーFAQ

免疫検出アッセイにおけるブロッキングバッファーの主な目的は何ですか?

ブロッキングバッファーの主な目的は、アッセイ表面への抗体の非特異的結合を防ぐことです。それによってバックグラウンドノイズを低減し、アッセイ結果の特異性と精度を高めることができます。

ブロッキングバッファーの一般的な成分は何ですか?

ブロッキングバッファーの一般的な成分には、ウシ血清アルブミン (BSA)、カゼイン、正常血清、または無脂肪乳タンパク質などのタンパク質が含まれます。これらの物質は、アッセイ表面の非特異的結合部位を効果的にカバーします。

ブロッキングバッファーはELISAの精度にどのように役立ちますか?

ELISA において、ブロッキングバッファーはウェル表面への抗体の非特異的結合を最小限に抑え、バックグラウンドノイズを低減します。これによりシグナル/ノイズ比が向上し、ターゲット抗原のより正確で信頼性の高い定量が可能になります。

ブロッキングバッファーは抗体と抗原の結合に影響を与える可能性がありますか?

いいえ、正しく使用すれば、ブロッキングバッファーはターゲット抗原への抗体の特異的結合を妨げません。代わりに、ブロッキングバッファーは抗体が無関係な部位に結合するのを防ぎ、観察されるシグナルが特定の抗原抗体相互作用によるものであることを確実にします。

すべての種類のイムノアッセイでブロッキングバッファーを使用する必要がありますか

強く推奨されますが、ブロッキングバッファーの必要性は、特定のアッセイとバックグラウンドノイズに対する感度によって異なります。高感度 ELISA やウェスタンブロットなど、特異性と低いバックグラウンドが重要なアッセイでは、ブロッキングバッファーの使用が不可欠です。

タンパク質ベースのブロッキングバッファーの代替品はありますか?

はい、タンパク質ベースのブロッキングバッファーの代替品には、ポリエチレングリコール (PEG)、ポリビニルアルコール (PVA)、ポリビニルピロリドン (PVP) などの合成ポリマーや界面活性剤があります。これらは、タンパク質ベースのバッファーがアッセイにおいて抗体または抗原と交差反応する可能性がある場合に使用できます。

イムノアッセイにおけるブロッキングの工程はどのくらいの時間行う必要がありますか?

ブロッキングの工程時間はアッセイによって異なりますが、通常は30分から数時間です。最適なブロッキング時間は、特定のアッセイごとに経験的に決定しなければならない場合がございます。

ブロッキングバッファー

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
Blocking Buffer for Fluorescent Western Blotting	RKL	MB-070S	125 ML	￥29,000
Blocking Buffer for Fluorescent Western Blotting	RKL	MB-070	500 ML	￥56,000
Blocking Buffer for Fluorescent Western Blotting	RKL	MB-070-003	3*500 ML	￥142,000
Blocking Buffer for Fluorescent Western Blotting	RKL	MB-070-010	10*500 ML	￥392,000
Blocking Buffer (2X) for Fluorescent Western Blotting	RKL	MB-070-0050	50 ML	￥17,000
Blocking Buffer for Fluorescent Western Blotting THIMERISOL FREE	RKL	MB-070-010TF	10*500 ML	お問い合わせ
Blocking Buffer (10X) for THIMEROSAL FREE, Unlabeled	RKL	MB-070-050TF	50 ML	￥49,000
BlockOut^(R) - Universal Blocking Buffer, Unlabeled	RKL	MB-073	500 ML	￥56,000
BlockOut^(R) - Universal Blocking Buffer, Unlabeled	RKL	MB-073-003	1 EACH [3-PACK (3x500mL)]	￥142,000
BlockOut^(R) - Universal Blocking Buffer, Unlabeled	RKL	MB-073-010	1 EACH [10-PACK (10x500mL)]	￥392,000
BlockOut^(R) (2X) - Universal Blocking Buffer for Western Blotting, Unlabeled	RKL	MB-073-050	50 ML	￥17,000
Blocking Buffer for Immunohistochemistry - Serum and Azide Free	RKL	MB-071-0100	100 ML	￥43,000
Normal Serum, Goat	RKL	B304	10 ML	￥44,000
Normal Serum, Equine	RKL	B307	10 ML	￥65,000
Normal Serum, Mouse	RKL	B308	10 ML	￥106,000
Normal Serum, Rabbit	RKL	B309	10 ML	￥65,000
Normal Serum, Rat	RKL	B310	10 ML	￥148,000
Normal Serum, Sheep	RKL	B311	10 ML	￥43,000
Bovine Serum Albumin 30% Solution, Bovine	RKL	BSA-30-0010	10 ML	￥15,000
Bovine Serum Albumin 30% Solution, Bovine	RKL	BSA-30-0050	50 ML	￥35,000
Bovine Serum Albumin 30% Solution, Bovine	RKL	BSA-30	500 ML	￥176,000
Bovine Serum Albumin 30% Solution, Bovine	RKL	BSA-30-1000	1 L	￥306,000
Bovine Serum Albumin - Fraction V (Immunoglobulin And Protease Free), Bovine	RKL	BSA-10	10 G	￥29,000
Bovine Serum Albumin - Fraction V (Immunoglobulin And Protease Free), Bovine	RKL	BSA-50	50 G	￥41,000
Bovine Serum Albumin - Fraction V (Immunoglobulin And Protease Free), Bovine	RKL	BSA-1000	1 KG	￥383,000
Bovine Serum Albumin - Fraction V (Immunoglobulin And Protease Free), Bovine	RKL	BSA-5KG	5 KG	お問い合わせ
ELISA Microwell Blocking Buffer with Stabilizer (Azide and Mercury Free)	RKL	MB-064-0100	100 ML	￥28,000
ELISA Microwell Blocking Buffer with Stabilizer (Azide and Mercury Free)	RKL	MB-064-1000	1000 ML	￥75,000
10X BBS Fish Gel Concentrate (Azide and Mercury free)	RKL	MB-065-0100	100 ML	￥28,000
10X BBS Fish Gel Concentrate (Azide and Mercury free)	RKL	MB-065-1000	1 PACK [10×100 ml]	￥109,000
10X PBS Fish Gel Concentrate (Azide and Mercury free)	RKL	MB-066-0100	100 ML	￥28,000
10X PBS Fish Gel Concentrate (Azide and Mercury free)	RKL	MB-066-1000	1 EACH [10×100 ml]	￥109,000
10X TBS Fish Gel Concentrate (Azide and Mercury free)	RKL	MB-067-0100	100 ML	￥28,000
10X TBS Fish Gel Concentrate (Azide and Mercury free)	RKL	MB-067-1000	1 EACH [10×100 ml]	￥106,000
1X PBS Buffer with 1% Casein, Unlabeled	RKL	MB-081-0100	100 ML	￥19,000
1X PBS Buffer with 1% Casein, Unlabeled	RKL	MB-081-1000	1 L	￥34,000
1X TBS Buffer with 1% Casein, Unlabeled	RKL	MB-082-0100	100 ML	￥18,000
1X TBS Buffer with 1% Casein, Unlabeled	RKL	MB-082-1000	1 L	￥34,000
Blocking Buffer Sampler Kit	RKL	K505	1 KIT	￥70,000