記事ID ： 41455

Buccutite™ AP 抗体標識キット

メーカー名：AAT Bioquest, Inc. (Former ABD Bioquest, Inc.)

Buccutite™ アルカリホスファターゼ (AP) 抗体標識キットは、検出酵素であるアルカリホスファターゼ (AP) を一次抗体に共有結合で標識するための迅速で便利なキットです。プロセスを合理化するために、これらのキットで提供される AP は Buccutite™ FOL で事前に活性化させているので、抗体結合に直接使用できます。目的の抗体またはタンパク質を Buccutite™ MTA で標識したら、Buccutite™ FOL活性化APと混合するだけです。ロット間のばらつきが最小限で、分離ステップがなく、回収率100 %で、完了するまでに2時間以内とロバストなキットです。Buccutite™ アルカリホスファターゼ (AP) 抗体標識キットは、標識したい抗体量別にご用意しています。

【関連商品】

Buccutite™ 抗体標識キット

特長

標識結合体は、pH5.0 ～ 9.0 の範囲で使用可能
優れたロット間の再現性
カラム精製ステップは不要
回収率 100 %
長期保存 (4℃、12ヶ月) に対して安定した標識結合体
ELISA、IHC、ブロッティングに使用可能

構成内容

Buccutite™ FOL-Activated AP
Buccutite™ MTA
Buccutite™ 反応バッファー
プロトコール

Alkaline Phosphatase (アルカリホスファターゼ)

アルカリホスファターゼは、有機化合物の脱リン酸化において重要な役割を果たす 86 kDaのホモ二量体酵素です。モノマーごとにその触媒機能に不可欠な2つの亜鉛原子が存在し、アルカリ性の pHレベルで最適に活性化されます。AP は ELISAなどのイムノアッセイ、免疫組織化学 (IHC)、ノーザン、サザン、ウエスタンブロットアプリケーションで高感度のレポーター酵素として用いられています。これらのアプリケーションでは、通常、APを一次抗体もしくは二次抗体に結合し、その活性は、比色、蛍光、または化学発光基質と反応して生じるシグナルで検出されます。

基質一覧

AP 基質	Abs (nm)	Ex (nm)	Em (nm)	ノート
FDP [Fluorescein diphosphate, tetraammonium salt]CAS 217305-49-2	487	498	517	最も感度の高い蛍光生成ホスファターゼ基質熱的に不安定発色検出に適しています
MUP [4-Methylumbelliferyl phosphate, free acid]CAS 3368-04-5	N/A	360	448	pH> 10での最大シグナル発生生細胞や連続アッセイには適していません
MUP, disodium salt [4-Methylumbelliferyl phosphate, disodium salt]CAS 22919-26-2	N/A	360	448	pH> 10での最大シグナル発生生細胞や連続アッセイには適していません
DiFMUP	N/A	354	450	MUPよりも低いpKa 低pHでの酸性ホスファターゼの分析に適しています
pNPP [4-Nitrophenyl phosphate, disodium salt]CAS 4264-83-9	405	N/A	N/A	発色基質酸性ホスファターゼとアルカリホスファターゼの両方に適しています
PhosLite™ Green	N/A	345	520	水溶性迅速なシグナル生成非常に光安定性
SunRed™ Phosphate	N/A	653	661	最も感度の高いNIRホスファターゼ基質
D-Luciferin phosphate CAS 145613-12-3	N/A	N/A	410	高感度化学発光基質

* Absorption (Abs), fluorescence excitation (Ex) and fluorescence emission maxima (Em), in nanometers (nm).
N/A = not applicable.

実験データ

図1. AP標識ヤギ抗マウス抗体を使用したマウスIgG の検出
標準的なELISA法を用いて、Buccutite™AP抗体標識キット (品番5513) 標識したヤギ抗マウスIgG抗体を使い、マウスIgGを検出した。3倍段階希したマウスIgG抗体を 96ウェルプレート (白色壁/透明底) にコートし、AP標識ヤギ抗マウスIgG抗体 100 µL (1 µg / mL) を添加した。次にpNPP基質溶液 (品番11619) 100 µL を各ウェルに添加し、30分間反応させた後、405 nmで測定した。

図2. AP標識ヤギ抗マウス抗体を使用したマウスIgG の検出
標準的なELISA法を用いて、Buccutite™AP抗体標識キット (品番5513) 標識したヤギ抗マウスIgG抗体を使い、マウスIgGを検出した。マウスIgG抗体100 ng を 96ウェルプレート (白色壁/透明底) にコートし、3倍段階希したAP標識ヤギ抗マウスIgG抗体を添加した。次にpNPP基質溶液 (品番11619) 100 µL を各ウェルに添加し、30分間反応させた後、405 nmで測定した。

Buccutite™ AP 抗体標識キット

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
Buccutite^TM ALP (Alkaline Phosphatase) Antibody Conjugation Kit Optimized for Labeling 25 ug Protein	ABD	5512	1 KIT [2 Labelings]	￥66,000
Buccutite^TM ALP (Alkaline Phosphatase) Antibody Conjugation Kit Optimized for Labeling 100 ug Protein	ABD	5513	1 KIT [2 Labelings]	￥88,000
Buccutite^TM ALP (Alkaline Phosphatase) Antibody Conjugation Kit Optimized for Labeling 1 mg Protein	ABD	5514	1 KIT [1 Labeling]	￥111,000
DiFMUP	ABD	11627	5 MG	￥24,000
D-Luciferin phosphate	ABD	12512	1 MG	￥48,000
FDP [Fluorescein diphosphate, tetraammonium salt]	ABD	11600	5 MG	￥88,000
MUP [4-Methylumbelliferyl phosphate, free acid]	ABD	11614	25 MG	￥18,000
MUP [4-Methylumbelliferyl phosphate, free acid]	ABD	11617	5 G	￥120,000
MUP, disodium salt [4-Methylumbelliferyl phosphate, disodium salt]	ABD	11610	25 MG	￥18,000
MUP, disodium salt [4-Methylumbelliferyl phosphate, disodium salt]	ABD	11612	10 G	￥235,000
PhosLite^TM Green	ABD	11630	1 MG	￥48,000
pNPP [4-Nitrophenyl phosphate, disodium salt]	ABD	11619	25 MG	￥18,000
Signal Guard^TM phosphatase reaction stopping solution	ABD	11622	100 ML	￥24,000
SunRed^TM Phosphate	ABD	11629	5 MG	￥48,000