Buccutite™ Rapid APC-iFluor™ 700 タンデム抗体標識キットは、APC-iFluor™ 700 を一次抗体に共有結合で標識するための迅速で便利なキットです。プロセスを合理化するために、これらのキットで提供される APC-iFluor™ 700 は Buccutite™FOL で事前に活性化させているので、抗体結合に直接使用できます。目的の抗体またはタンパク質を Buccutite™MTA で標識したら、Buccutite™FOL活性化APC-iFluor™ 700 と混合するだけです。ロット間のばらつきが最小限で、分離ステップがなく、回収率100 %で、完了するまでに2時間以内とロバストなキットです。Buccutite™ Rapid APC-iFluor™ 700 抗体標識キットは、標識したい抗体量別にご用意しています。
特長
- 25 µg 〜 100 µg の抗体に APC-iFluor™ 700 を共有結合的に標識するための効率的な方法
- 標識結合体は、pH5.0 〜 9.0 の範囲で使用可能
- 優れたロット間の再現性
- カラム精製ステップは不要
- 回収率 100 %
- 長期保存 (4℃、12ヶ月) に対して安定した標識結合体
- ソーティング、マルチカラーフローサイトメトリー、イムノフェノタイピングに使用可能
構成内容
- Buccutite™ FOL-Activated APC-iFluor™ 700
- Buccutite™ MTA
- Buccutite™ 反応バッファー
- プロトコール
APC-iFluor™ 700
APC-iFluor™ 700 は分子量 105 kDa の、アロフィコシアニン (APC) と iFluor™ 700 からなるタンデム蛍光色素です。651 nm および 625 nm で励起し、713 nm で最大蛍光を示します。APC-iFluor™ 700 は、赤色のレーザーラインで励起し、Cy5.5フィルターセット (695/40 nm および 730/45 nm) を使用して検出できます。APC-iFluor™ 700は APC-Cy5.5 と近いスペクトルプロファイルのため、同時に使用しないことをお勧めします。単一の励起源を使用したマルチカラーフローサイトメトリー分析には、APC-iFluor™700 を iFluor™647 または AlexaFluor®647 および APC-Cy7結合体と組み合わせて使用します。
赤色レーザーほど最適ではありませんが、APC-iFluor™ 700 は 561 nmレーザーでも励起できます。ただし、APC-iFluor™ 700 とPE-Cy5.5結合体で同時に染色された細胞では、561 nmレーザーによる励起により、PE-Cy5.5チャネルにかなりの波及効果が生じます。このようなアーチファクトのため、PE-Cy5.5シグナルからAPC-iFluor™ 700 蛍光を差し引くためにかなりのクロスビーム補正を実行する必要があります。
明るさ | Dim |
---|---|
分子量 | ~105,000 daltons |
Ex (最大) | 651 m |
Em (最大) | 713 nm |
吸光係数 | 700,000 cm-1M-1 |
ストークシフト | 62 nm |
レーザーライン | 633-647 nm |
フィルターセット | 720/30 nm |
APC-iFluor™ 700スペクトル
図1. APC-iFluor™ 700 の励起 (赤色の点線) と吸収プロファイル (赤色の影付きの領域)
APC-iFluor™ 700 は、フローサイトメーターに装備された赤色レーザー (633-640 nm) で励起し、695/40 nmフィルターセットで検出できます。
実験データ
PBMC染色
図2. CD4 PBMC集団のフローサイトメトリー分析
抗ヒトCD4モノクローナル抗体を Buccutite™Rapid APC-iFluor™ 700 抗体標識キット (品番1319) で標識した後、CD4 PBMC集団を抗体で染色し、APC-Cy7チャネルを使用した ACEANovoCyteフローサイトメーターで蛍光シグナルをモニターした。
図3. CD45 PBMC集団のフローサイトメトリー分析
抗ヒトCD45モノクローナル抗体およびマウスIgGアイソタイプを Buccutite™ Rapid APC-iFluor™ 700 抗体標識キット (品番1319) で標識した後、CD45 PBMC集団を各抗体で染色し、APC-Cy7を使用した ACEANovoCyteフローサイトメーターで蛍光シグナルをモニターした。
Buccutite™ Rapid APC-iFluor™ 700 タンデム抗体標識キット
品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
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BuccutiteTM Rapid APC-iFluor(R) 700 Tandem Antibody Labeling Kit *Microscale Optimized for Labeling 25 ug Antibody Per Reaction* | ABD | 1347 | 1 KIT [2 Labelings] |
¥72,000 |
BuccutiteTM Rapid APC-iFluor(R) 700 Tandem Antibody Labeling Kit *Microscale Optimized for Labeling 100 ug Antibody Per Reaction* | ABD | 1319 | 1 KIT [2 Labelings] |
¥120,000 |
商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。
※ 表示価格について
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