商品情報

記事ID : 41449
研究用

Buccutite™ Rapid APC-iFluor™ 700 タンデム抗体標識キット

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Buccutite™ Rapid APC-iFluor™ 700 タンデム抗体標識キットは、APC-iFluor™ 700 を一次抗体に共有結合で標識するための迅速で便利なキットです。プロセスを合理化するために、これらのキットで提供される APC-iFluor™ 700 は Buccutite™FOL で事前に活性化させているので、抗体結合に直接使用できます。目的の抗体またはタンパク質を Buccutite™MTA で標識したら、Buccutite™FOL活性化APC-iFluor™ 700 と混合するだけです。ロット間のばらつきが最小限で、分離ステップがなく、回収率100 %で、完了するまでに2時間以内とロバストなキットです。Buccutite™ Rapid APC-iFluor™ 700 抗体標識キットは、標識したい抗体量別にご用意しています。

【関連商品】

特長

  • 25 µg 〜 100 µg の抗体に APC-iFluor™ 700 を共有結合的に標識するための効率的な方法
  • 標識結合体は、pH5.0 〜 9.0 の範囲で使用可能
  • 優れたロット間の再現性
  • カラム精製ステップは不要
  • 回収率 100 %
  • 長期保存 (4℃、12ヶ月) に対して安定した標識結合体
  • ソーティング、マルチカラーフローサイトメトリー、イムノフェノタイピングに使用可能

構成内容

  • Buccutite™ FOL-Activated APC-iFluor™ 700
  • Buccutite™ MTA
  • Buccutite™ 反応バッファー
  • プロトコール

APC-iFluor™ 700

APC-iFluor™ 700 は分子量 105 kDa の、アロフィコシアニン (APC) と iFluor™ 700 からなるタンデム蛍光色素です。651 nm および 625 nm で励起し、713 nm で最大蛍光を示します。APC-iFluor™ 700 は、赤色のレーザーラインで励起し、Cy5.5フィルターセット (695/40 nm および 730/45 nm) を使用して検出できます。APC-iFluor™ 700は APC-Cy5.5 と近いスペクトルプロファイルのため、同時に使用しないことをお勧めします。単一の励起源を使用したマルチカラーフローサイトメトリー分析には、APC-iFluor™700 を iFluor™647 または AlexaFluor®647 および APC-Cy7結合体と組み合わせて使用します。
赤色レーザーほど最適ではありませんが、APC-iFluor™ 700 は 561 nmレーザーでも励起できます。ただし、APC-iFluor™ 700 とPE-Cy5.5結合体で同時に染色された細胞では、561 nmレーザーによる励起により、PE-Cy5.5チャネルにかなりの波及効果が生じます。このようなアーチファクトのため、PE-Cy5.5シグナルからAPC-iFluor™ 700 蛍光を差し引くためにかなりのクロスビーム補正を実行する必要があります。

表1.APC-iFluor™ 700のスペクトル特性
明るさ Dim
分子量 ~105,000 daltons
Ex (最大) 651 m
Em (最大) 713 nm
吸光係数 700,000 cm-1M-1
ストークシフト 62 nm
レーザーライン 633-647 nm
フィルターセット 720/30 nm

APC-iFluor™ 700スペクトル

APC-Cy5スペクトル
図1. APC-iFluor™ 700 の励起 (赤色の点線) と吸収プロファイル (赤色の影付きの領域)
APC-iFluor™ 700 は、フローサイトメーターに装備された赤色レーザー (633-640 nm) で励起し、695/40 nmフィルターセットで検出できます。

実験データ

PBMC染色

ABD_APC-iFluor700_Spectrum_2.jpg

図2. CD4 PBMC集団のフローサイトメトリー分析
抗ヒトCD4モノクローナル抗体を Buccutite™Rapid APC-iFluor™ 700 抗体標識キット (品番1319) で標識した後、CD4 PBMC集団を抗体で染色し、APC-Cy7チャネルを使用した ACEANovoCyteフローサイトメーターで蛍光シグナルをモニターした。

ABD_APC-iFluor700_Spectrum_3.jpg

図3. CD45 PBMC集団のフローサイトメトリー分析
抗ヒトCD45モノクローナル抗体およびマウスIgGアイソタイプを Buccutite™ Rapid APC-iFluor™ 700 抗体標識キット (品番1319) で標識した後、CD45 PBMC集団を各抗体で染色し、APC-Cy7を使用した ACEANovoCyteフローサイトメーターで蛍光シグナルをモニターした。

 

Buccutite™ Rapid APC-iFluor™ 700 タンデム抗体標識キット

商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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