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商品情報

記事ID : 12075
研究用

CytoSelect™ BrdU 細胞増殖測定ELISAキット

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BrdU 細胞増殖 ELISAキットは、抗BrdU抗体を用いて細胞増殖中にDNAに取り込まれた BrdU を検出するキットです。細胞増殖能の検出・測定にご利用いただけます。

背景

BrdU とは?

細胞周期およびDNA合成についての研究は、多くの分野にとって不可欠です。新しく合成されたDNAや細胞増殖を追跡するために、伝統的に放射性標識チミジンが使用されてきました。放射性標識チミジンは、非常に感度が高い反面、放射性同位体の取り扱いや廃棄に規制があることや、高価な検出装置が必要になる場合があるなど、限界もありました。

最近になって、チミジンのアナログであるBrdU(Bromodeoxyuridine:5-ブロモ-2'-デオキシウリジン)が放射性標識チミジンの代わりに使用されるようになってきています。

BrdUは、活発に増殖する細胞の新しく合成されるDNA鎖に取り込まれます。固定およびDNAの部分的な変性の後、BrdUを免疫組織化学的に検出し、新しくDNAを合成した増殖細胞を解析することができます。

使用目的

本キットは、抗BrdU抗体を用いて細胞増殖の間にDNAに取り込まれたBrdUを検出します。

BrdUを含む培地で細胞をインキュベートすることで、このピリミジンアナログを、増殖細胞中に新しく合成されたDNAにチミジンの代わりに取り込ませます(図1)。BrdUを含む培地を除去し、固定/変性溶液を用いてワンステップで細胞を固定してDNAを変性させます(DNAの変性は、取り込まれたBrdUに対する近づきやすさを向上させるために必要です)。BrdUマウスモノクローナル抗体を加え、HRP標識二次抗体を加えて、取り込まれたBrdUを、検出します。発色の吸光度は細胞に取り込まれたBrdUの量に比例し、細胞増殖と直接関連付けることができます。

BrdU 細胞増殖ELISAキットの概要
図1.CytoSelect™ BrdU 細胞増殖ELISAキットの概要図

特長

  • 細胞増殖の間にDNAに取り込まれたBrdUを抗BrdU抗体を用いて検出
  • BrdU 溶液付属

構成内容

  • BrdU溶液(1000×)
  • 抗BrdUモノクローナル抗体
  • 固定/変性溶液
  • 抗体希釈液
  • 二次抗体(HRP標識)
  • 洗浄バッファー(10×)
  • 基質溶液
  • 停止溶液

使用例

HEK293細胞における血清による増殖刺激
図2.HEK293細胞における血清による増殖刺激
HEK293細胞を37℃でオーバーナイト培養した後、10%FBA存在下/非存在下で24時間インキュベートした(10μM BrdUで1時間または3時間処理)。BrdUの取り込みは、アッセイプロトコールに従って測定した。

CytoSelect™ BrdU 細胞増殖測定ELISAキット

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
CytoSelectTM BrdU Cell Proliferation ELISA Kit詳細データ CBL CBA-251 96 ASSAY
¥85,000
CBL_bnr_05.jpg Cell Biolabs(セルバイオラボ)社商品一覧 セルベースアッセイ商品 ウイルス発現商品 幹細胞研究商品 酸化ストレス / 酸化損傷商品 代謝研究商品 Cell Biolabs(セルバイオラボ)社商品一覧
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