記事ID ： 12075

CytoSelect™ BrdU 細胞増殖測定ELISAキット

メーカー名：Cell Biolabs, Inc.

BrdU 細胞増殖 ELISAキットは、抗BrdU抗体を用いて細胞増殖中にDNAに取り込まれた BrdU を検出するキットです。細胞増殖能の検出・測定にご利用いただけます。

背景

BrdU とは？

細胞周期およびDNA合成についての研究は、多くの分野にとって不可欠です。新しく合成されたDNAや細胞増殖を追跡するために、伝統的に放射性標識チミジンが使用されてきました。放射性標識チミジンは、非常に感度が高い反面、放射性同位体の取り扱いや廃棄に規制があることや、高価な検出装置が必要になる場合があるなど、限界もありました。

最近になって、チミジンのアナログであるBrdU（Bromodeoxyuridine：5-ブロモ-2'-デオキシウリジン）が放射性標識チミジンの代わりに使用されるようになってきています。

BrdUは、活発に増殖する細胞の新しく合成されるDNA鎖に取り込まれます。固定およびDNAの部分的な変性の後、BrdUを免疫組織化学的に検出し、新しくDNAを合成した増殖細胞を解析することができます。

使用目的

本キットは、抗BrdU抗体を用いて細胞増殖の間にDNAに取り込まれたBrdUを検出します。

BrdUを含む培地で細胞をインキュベートすることで、このピリミジンアナログを、増殖細胞中に新しく合成されたDNAにチミジンの代わりに取り込ませます（図1）。BrdUを含む培地を除去し、固定/変性溶液を用いてワンステップで細胞を固定してDNAを変性させます（DNAの変性は、取り込まれたBrdUに対する近づきやすさを向上させるために必要です）。BrdUマウスモノクローナル抗体を加え、HRP標識二次抗体を加えて、取り込まれたBrdUを、検出します。発色の吸光度は細胞に取り込まれたBrdUの量に比例し、細胞増殖と直接関連付けることができます。

図1．CytoSelect™ BrdU 細胞増殖ELISAキットの概要図