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研究用

UV誘導DNA損傷マーカー CPD／6-4PP 解析キット OxiSelect™ 紫外線によるDNA損傷アッセイ（ELISA／染色）

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メーカー名：Cell Biolabs, Inc.

DNA損傷解析キットは、紫外線（UV）によって生じるDNA損傷（CPD または 6-4PP）を検出・測定するキットです。

本製品は、インタクトな培養細胞用のDNA損傷ELISAキット［1］、蛍光標識して細胞観察する免疫染色キット［2］、抽出DNAサンプル用のDNA損傷ELISAキット［3］ の3種類のフォーマットで取り扱っています。

背景

紫外線（UV）によるDNA損傷

UVを吸収すると、DNA中のピリミジン塩基が2個連続した部位（dipyrimidine部位）において、シクロブタン型ピリミジンダイマー（CPD）や6-4光産物（6-4PP）等の塩基損傷産物が生成されます（図1）。

塩基CがTに、CCがTTに転移する結果、ヒトやマウスの皮膚癌に多い、p53の変異が生じます。UV照射を受けたDNAは、通常であればヌクレオチド除去修復（NER）や塩基除去修復（BER）等の修復機構によって修復されます。UV照射後に細胞はp53を活性化し、DNA修復のために細胞周期を停止させます。損傷が深刻であれば、細胞はアポトーシスによりDNA損傷や変異細胞を取り除きます。

UV照射によるDNA損傷
図1　UV照射によるDNA損傷のスキーム

実験の流れ

［1］【細胞用（Cellular）】 OxiSelect™ 紫外線によるDNA損傷ELISAキット／染色キット
  1. 96ウェル培養用プレートに細胞を播種
  2. UV照射(DNA損傷誘導)
  3. 固定・変性
  4. 6-4PP抗体もしくはCPD抗体とインキュベート
  5. HRP標識二次抗体もしくはFITC標識二次抗体とインキュベート
  6. ELISA解析もしくは、蛍光顕微鏡観察
［2］【抽出DNAサンプル用】 OxiSelect™ 紫外線によるDNA損傷ELISAキット
  1. DNAを抽出
  2. 熱変性
  3. DNA結合プレートへ吸着
  4. 6-4PP抗体もしくはCPD抗体とインキュベート
  5. HRP標識二次抗体とインキュベート
  6. ELISA定量

構成内容

【細胞用（Cellular）】 OxiSelect™ 紫外線によるDNA損傷 ELISA キット
品名/構成内容 マーカー 検出方法 品番
OxiSelect™ Cellular UV-Induced DNA Damage ELISA Kit（6-4PP）
  • 抗6-4PP抗体, 100 x：1 vial
  • HRP標識二次抗体：1 vial
  • 変性溶液A, 100 x：1 vial
  • 変性溶液B, 100 x：1 vial
  • 希釈液：1 bottle
  • 10x 洗浄溶液：1 bottle
  • 基質溶液：1 bottle
  • 反応停止液： 1 bottle
 6-4PP ELISA（比色）
（実験の流れ [2]）		 STA-328
OxiSelect™ Cellular UV-Induced DNA Damage ELISA Kit（CPD）
  • 抗CPD抗体, 100 x：1 vial
  • HRP標識二次抗体：1 vial
  • 変性溶液A, 100 x：1 vial
  • 変性溶液B, 100 x：1 vial
  • 希釈液：1 bottle
  • 10x 洗浄溶液：1 bottle
  • 基質溶液： 1 bottle
  • 反応停止液： 1 bottle
 CPD STA-326
【細胞用（Cellular）】 OxiSelect™ 紫外線によるDNA損傷 染色キット
品名/構成内容 マーカー 検出方法 品番
OxiSelect™ Cellular UV-Induced DNA Damage Staining Kit（6-4PP）
  • 抗6-4PP抗体, 100 x：1 vial
  • FITC標識二次抗体：1 vial
  • 変性溶液A, 100x：1 vial
  • 変性溶液B, 100 x：1 vial
  • 希釈液：1 bottle
  • 10x 洗浄溶液： 1 bottle
 6-4PP 蛍光顕微鏡
（実験の流れ [1]）		 STA-329
OxiSelect™ Cellular UV-Induced DNA Damage Staining Kit（CPD）
  • 抗CPD抗体, 100 x：1 vial
  • FITC標識二次抗体：1 vial
  • 変性溶液A, 100 x：1 vial
  • 変性溶液B, 100 x：1 vial
  • 希釈液：1 bottle
  • 10x 洗浄溶液： 1 bottle
 CPD STA-327
【抽出DNAサンプル用】 OxiSelect™ 紫外線によるDNA損傷 ELISA キット
品名/構成内容 マーカー 検出方法 品番
OxiSelect™ UV-Induced DNA Damage ELISA Kit（6-4PP Quantitation）
  • 96-well DNA High-Bindingプレート： One strip well 96-well plate, precoated with DNA binding matrix.
  • 抗6-4PP抗体：1 vial
  • HRP標識二次抗体：1 vial
  • 希釈溶液：1 bottle
  • 10x 洗浄溶液：1 bottle
  • 基質溶液：1 bottle
  • 反応停止液：1 bottle
  • 6-4PP-DNAスタンダード： 1 vial（25 B/F 6-4PP-DNA in 1x TE Buffer）
 6-4PP ELISA定量（比色）
（実験の流れ [2]）		 STA-323
OxiSelect™ UV-Induced DNA Damage ELISA Kit（CPD Quantitation）
  • 96-well DNA High-Bindingプレート： One strip well 96-well plate, precoated with DNA binding matrix.
  • 抗CPD抗体：1 vial
  • HRP標識二次抗体：1 vial
  • 希釈溶液：1 bottle
  • 10x 洗浄溶液：1 bottle
  • 基質溶液：1 bottle
  • 反応停止液：1 bottle
  • CPD-DNAスタンダード： 1 vial（25 B/F CPD-DNA in 1x TE Buffer）
 CPD STA-322
OxiSelect™ UV-Induced DNA Damage ELISA Combo Kit
（CPD/6-4PP Quantitation）
※品番：STA-323と品番：STA-322の各48 assay分のセット品です。		 6-4PP, CPD STA-322-C

アプリケーション例

CPD ELISA 検出
図2　OxiSelect™ Cellular UV-Induced DNA Damage ELISA Kit（品番：STA-326）によるCPD検出
HeLa細胞に対し、UV照射を行いDNA損傷を引き起こした。HeLa細胞を播種し（20K/well, オーバーナイト）、紫外線殺菌灯下に30分間静置した。

CPD免疫染色
図3　OxiSelect™ Cellular UV-Induced DNA Damage Staining Kit（品番：STA-327）によるCPD検出
HeLa細胞に対し、UV照射を行いDNA損傷を引き起こした。HeLa細胞を播種し（20K/well, オーバーナイト）、紫外線殺菌灯下に30分間静置した。免疫蛍光染色によりCPD損傷を測定した。
左：二次抗体のみ
中：UV照射サンプル
右：未処理サンプル

6-4PP ELISA 定量
図4　OxiSelect™ UV-Induced DNA Damage ELISA Kit （品番：STA-323）による6-4PP定量
ウシ胸腺DNA（0.26c/f）を細胞培養フード内でUV照射、変性させたDNA 40ng中の6-4PPレベルを定量した。

【細胞用】OxiSelect™ 紫外線によるDNA損傷アッセイ（実験の流れ［1］）

• ELISAキット（CPD または 6-4PP）

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
OxiSelectTM Cellular UV-Induced DNA Damage ELISA Kit (6-4PP)詳細データ CBL STA-328 96 ASSAY
 販売終了
OxiSelectTM Cellular UV-Induced DNA Damage ELISA Kit (6-4PP), Trial Size詳細データ CBL STA-328-T 32 ASSAY
 販売終了
OxiSelectTM Cellular UV-Induced DNA Damage ELISA Kit (CPD)詳細データ CBL STA-326 96 ASSAY
 ￥164,000
OxiSelectTM Cellular UV-Induced DNA Damage ELISA Kit (CPD), Trial Size詳細データ CBL STA-326-T 32 ASSAY
 販売終了
OxiSelectTM Cellular UV-Induced DNA Damage ELISA Kit (CPD)詳細データ CBL STA-326-5 5*96 ASSAY
 お問い合わせ

• 染色キット（CPD または 6-4PP）

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
OxiSelectTM Cellular UV-Induced DNA Damage Staining Kit (6-4PP)詳細データ CBL STA-329 96 ASSAY
 販売終了
OxiSelectTM Cellular UV-Induced DNA Damage Staining Kit (6-4PP), Trial Size詳細データ CBL STA-329-T 32 ASSAY
 販売終了
OxiSelectTM Cellular UV-Induced DNA Damage Staining Kit (CPD)詳細データ CBL STA-327 96 ASSAY
 ￥164,000
OxiSelectTM Cellular UV-Induced DNA Damage Staining Kit (CPD), Trial Size詳細データ CBL STA-327-T 32 ASSAY
 販売終了
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【抽出DNAサンプル用】OxiSelect™ 紫外線によるDNA損傷アッセイ（実験の流れ［2］）

• ELISAキット（CPD または 6-4PP）

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
OxiSelectTM UV-Induced DNA Damage ELISA Kit (6-4PP Quantitation)詳細データ CBL STA-323 96 ASSAY
 ￥164,000
OxiSelectTM UV-Induced DNA Damage ELISA Kit (6-4PP Quantitation), Trial Size詳細データ CBL STA-323-T 32 ASSAY
 販売終了
OxiSelectTM UV-Induced DNA Damage ELISA Kit (6-4PP Quantitation)詳細データ CBL STA-323-5 5*96 ASSAY
 お問い合わせ
OxiSelectTM UV-Induced DNA Damage ELISA Kit (CPD Quantitation)詳細データ CBL STA-322 96 ASSAY
 ￥164,000
OxiSelectTM UV-Induced DNA Damage ELISA Kit (CPD Quantitation), Trial Size詳細データ CBL STA-322-T 32 ASSAY
 販売終了
OxiSelectTM UV-Induced DNA Damage ELISA Kit (CPD Quantitation)詳細データ CBL STA-322-5 5*96 ASSAY
 お問い合わせ

• ELISAコンボキット
※品番：STA-322Cは、品番：STA-323と品番：STA-322の各48assay分のセット品です。

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
OxiSelectTM UV-Induced DNA Damage ELISA Combo Kit (CPD / 6-4PP Quantitation)詳細データ CBL STA-322-C 96 ASSAY
 ￥211,000
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商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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「OxiSelect™ 紫外線によるDNA損傷アッセイ（ELISA／染色）」は、下記のカテゴリーに属しています。

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