細胞培養液、血清や血漿から、CD81+もしくはCD9+のエクソソームをラベルフリーで精製できます。
特長
エクソソーム精製のためのStrep-tag®技術
Strep-tag®技術は、アフィニティクロマトグラフィーによって表面マーカーを検出することで、ラベルフリーのエクソソーム精製を可能にします。
この技術はエクソソーム精製用Fab-TACS®と呼ばれるトレースレスアフィニティエクソソーム単離方法です。「Fab」は、本方法で使用する抗体由来のFabフラグメントから派生したものです。FabはTwin-Strep-tag® (Fab-Strep)および、エクソソーム表面マーカーに特異的に結合します。
Twin-Strep-tag®は、人工ストレプトアビジンであるStrep-Tactin®とFab-Strepの結合を促進します。Strep-Tactin®でコーティングしたアガロースマクロビーズを含むカラムに、Fab-Strepをロードすることで、アフィニティクロマトグラフィーを使用したエクソソーム精製が可能です。そのため、細胞上清や血漿などのサンプルからのエクソソーム精製に適しています。
エクソソーム用Fab-TACS®は、Fab-Strepの低親和性とTwin-Strep-tag®とStrep-Tactin®の可逆的な結合という二つの要因によって、すべての標識試薬が除去可能です。
Fab fragmentは、ターゲットとのみ弱く結合するため、エクソソームと十分に結合するためには、カラム内でのStrep-Tactin®とFab-Strepsの多量体形成によってavidity(結合力)をあげることが必要です。この反応はビオチン添加によって巻き戻されます。ビオチンとStrep-Tactin®の親和性が高いため、ビオチンはTwin-Strep-Tag®に代わりStrep-Tactin®に結合します。これにより、Fab-Strepと共にエクソソームが解離します。更に、Fab-Strepはエクソソームとの親和性が低いためエクソソーム表面から自然に解離し、その結果、完全にラベルフリーのエクソソームが得られます。
本精製プロトコルはエクソソームへの影響がほとんどなく、精製後のウエスタンブロットやnanoparticle tracking analyses (NTA)、細胞培養実験等に適しています。
Exosome Isolation with Fab-TACS®
Fab-TACS®技術によるエクソソーム単離方法を動画でご確認頂けます。
Fab-TACS®は、低親和性のFab fragmentを用いたイムノアフィニティクロマトグラフィー代替法であり、エクソソームの機能に影響を与えることなく捕捉・遊離することができます。Strep-tag®技術の可逆的な結合特性に基づいて、Fab fragmentはエクソソームの表面タンパク質を標的とし、ビオチンの添加後に自発的に解離します。分離されたエクソソームは完全にラベルフリーで機能的であり、様々なダウンストリームアプリケーションに適しています。
Fab-TACS Exosome Agarose column Starter Kit
Fab-TACS®は、当社のStrep-tag®技術に基づくトレースレスアフィニティエクソソーム単離方法です。Fab-TACS® Exosome Agarose Column Starter Kitは、血漿、血清、細胞培養上清からヒトCD9+(品番:6-3319-002)もしくはCD81+(品番:6-3381-002)エクソソームをラベルフリーで単離することができます。
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【構成品】
- Strep-Tactin® TACS Agarose columns
- CD9 Fab-Strep, human(品番:6-3319-002)or CD81 Fab-Strep, human(品番:6-3381-002)
- Biotin stock solution
- TACS Column Adapter
品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
---|---|---|---|---|
CD9 Fab-TACS(R) Exosome Agarose column Starter Kit, Human![]() |
IBA | 6-3319-002 | 1 KIT |
販売終了 |
CD81 Fab-TACS(R) Exosome Agarose column Starter Kit, Human![]() |
IBA | 6-3381-002 | 1 KIT |
販売終了 |
Strep-Tactin®TACS Agarose Column
Strep-Tactin® TACS Agarose columnsは、ストレプトアビジンバリアントのStrep-Tactin®でコーティングされたアガロースマクロビーズを使用しています。特殊な架橋により、細胞の分離や除去などに使用することができます。本カラムは、Traceless Affinty Cell Selection(Fab-TACS®/Nano-TACS®)用に開発されました。
この方法は、Twin-Strep-tag®(Fab-Streps)またはナノボディ(Nano-Streps)と融合したFabフラグメントがアガロースマトリックス上のStrep-Tactin®に結合します。細胞を特異的に捕捉した後、ビオチン添加によりFab-/Nano-StrepはStrep-Tactin®アガロースから放出されます。細胞はFab-/Nano-Strepと解離し、ダウンストリームアプリケーションに適した状態になります。この原理はエクソソームの分離にも使用可能です(Fab-TACS® for exosomes)。Fab-Strep/Nano-Strepの代わりに、Twin-Strepタグ付き抗体、デスチオビオチン化抗体、ビオチン化抗体(不可逆的結合)をカラムにロードすることも可能です。これにより、Strep-Tactin® TACS Agaroseカラムはネガティブセルセレクションやデプリーションアプローチにも適しています。
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【仕様】
- 細胞結合限界:2×107 (品番:6-6310-300) or 1×108 (品番:6-6310-001) target cells
- ご提供形態:Pre-packed in buffer
- アプリケーション:アフィニティクロマトグラフィー or エクソソーム精製
- 支持体:Crosslinked agarose
品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
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Strep-Tactin(R) TACS Agarose Column | IBA | 6-6310-300 | 0.3 ML |
¥19,000 |
Strep-Tactin(R) TACS Agarose Column | IBA | 6-6310-001 | 1 ML |
¥37,000 |
Strep-Tactin®TACS Agarose
本製品はカラムアフィニティクロマトグラフィーに最適化されているため、懸濁液はグラビティフローカラムの充填に使用することができます。1mlの樹脂床容積のカラムに充填するには、2 mlの50%懸濁液が必要です。
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【仕様】
- ビオチン結合限界:> 40 nmol/ml resin
- ご提供形態:50% 懸濁液
- アプリケーション:アフィニティクロマトグラフィー or エクソソーム精製
- 支持体:Crosslinked agarose
品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
---|---|---|---|---|
Strep-Tactin(R) TACS Agarose | IBA | 6-6350-002 | 4 ML |
¥52,000 |
Strep-Tactin(R) TACS Agarose | IBA | 6-6350-010 | 20 ML |
¥160,000 |
Strep-Tactin(R) TACS Agarose | IBA | 6-6350-025 | 50 ML |
¥362,000 |
Fab-Strep
CD9(CD81)Fab-Strepは、Twin-Strep-tag®に融合した組換え発現の低アフィニティFab fragmentです。Fab-Strepは、IBA GmbH社のStrep-tag®技術に基づくTraceless Affinity Cell Selection(Fab-TACS®)用に開発されました。ターゲットに対する親和性が低いため、細胞やエクソソーム表面への十分な結合を確保するためには、avidity(結合力)の向上が必要です。Fab-StrepをStrep-Tactin®と組み合わせることで、細胞やエクソソームに安定的に結合する複合体を形成することができます。
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【仕様】
- エンドトキシンレベル:≤ 0.1 EU/µg by LAL test
- ご提供形態:凍結乾燥
- アプリケーション:アフィニティクロマトグラフィーによるエクソソーム精製
- 純度:≥90%
- 再構成:最終濃度50 µg/mlになるように、1 mlの緩衝液(例えば、1 mM EDTAと0.5%BSAを含む1xPBS)を使用
- 特異性:Human CD9(CD81)
品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
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CD9 Fab-Strep, Human![]() |
IBA | 6-8019-150 | 50 UG |
販売終了 |
CD81 Fab-Strep, Human![]() |
IBA | 6-8015-150 | 50 UG |
販売終了 |
Elution Buffer
細胞(Fab-TACS®/Nano-TACS®、CD3/CD28 Streptamer®、MHC I Streptamer®)やエクソソーム(Fab-TACS® for exosome)に対してStrep-tag®技術を使用する際の解離バッファー用ビオチンストック溶液です。
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【仕様】
- 濃度:100 mM
- ご提供形態:DPBSに溶解
品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
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100 mM Biotin stock solution | IBA | 6-6325-001 | 1 ML |
¥15,000 |
商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。
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